M-MLV Reverse Transcriptase Buffer
M-MLV Reverse Transcriptase Buffer
Invitrogen™

M-MLV Reverse Transcriptase Buffer

M-MLV逆転写酵素バッファーは、0.1 M DTT 500 µL入り[250 mMトリス-HCl（pH 8.3）詳細を見る
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製品番号（カタログ番号）数量
180570181 mL
製品番号（カタログ番号） 18057018
価格（JPY）
11,100
Each
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数量:
1 mL
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M-MLV逆転写酵素バッファーは、0.1 M DTT 500 µL入り[250 mMトリス-HCl（pH 8.3）、375 mM KCl、15 mM MgCl2]として提供されます。M-MLV、SuperScript™、SuperScript™ II、およびSuperScript™ IIIの各逆転写酵素が付属しています。
研究用にのみ使用できます。診断用には使用いただけません。
仕様
内容M-MLV逆転写酵素バッファー1 mLおよびDTT（0.1 M）500 µLを含みます。-20℃で保存
濃度5X
使用対象（アプリケーション）Reverse Transcription
数量1 mL
Unit SizeEach

よくあるご質問（FAQ）

ABI PRISM 7000　および Applied Biosystems 7300、7500、7500、7900HT SystemのSDS ソフトウェアでは、"Relative Quantification Plate Assay（ddCt)”を指定した場合、なぜ"ADD DISSOCIATION CURVE"ボタンが無効になってしまうのですか?

旧バージョンのソフトウェアでは、Relative Quantification Plate(⊿⊿Ct）アッセイを行う場合、同一ファイル中に融解曲線を設定することができません。ただし最近の機種や、7500/7500fastの最新のsofware( ver.2.0.5)では、サイクルステージの直後にmelt curve(融解曲線）が設定可能となっています。 なお旧バージョンのソフトウェアの場合は、Relative Quantification Plate(⊿⊿Ct）アッセイを行った後に、新しいRunファイルを作成し、融解曲線のみのプログラムでRunを行ってください。 融解曲線のみのRunを行う場合、"File"から "New"を選択します。展開された" New Document Wizard"画面中の"Assay"のプルダウンメニューから"DISSOCIATION"を選択し、融解曲線のみのRunを行ってください。この場合、解析ファイルとは別に融解曲線のみのSDSファイルが作成されます。

How much of the first-strand cDNA reaction should I load for PCR?

While the volume is dependent on the starting amount of RNA used for the first-strand synthesis and the abundance of the target gene, we'd recommend starting with 10% of the first-strand reaction for your PCR reaction.

What is the highest temperature that SuperScript III , SuperScript II, MMLV, or ThermoScript can be used?

The optimal temperature for SuperScript III RT is 50 degrees C, and can be used up to 55 degrees C. For some qRT-PCR reactions where gene-specific primers are used, you can do the RT reaction at 60 degrees C. The optimal temperature for SuperScript II RT is 42 degrees C, and can be used up to 50 degrees C. Optimal temperature for MMLV is 42 degrees C. ThermoScript RT shows optimal activity at 60 degrees C, and can be used at temperatures as high as 70 degrees C (for amplicons expected to be 1 kb or less). For PCR products expected to be greater than 1 kb, a maximum first strand synthesis temperature of 60-65 degrees C is suggested. Be sure your first-strand primer anneals at the high temperature, especially when gene-specific primers are used for high-temperature stable reverse transcriptases. We recommend oligo (dT)20 for cDNA synthesis when using an oligo (dT) primer for first-strand synthesis with these enzymes.

Can I use elevated temperatures for reverse transcription with Moloney Murine Leukemia Virus (M-MLV)?

When using GeneAmp RNA PCR kit (part number N808-0017) with M-MLV, the recommended temperature for reverse transcription is 42°C. It is not recommended that reverse transcription be done at a higher temperature with this enzyme because it will start to lose significant activity. If it is necessary to do reverse transcription at a higher temperature due to strong secondary structure or high G+C content, the recommended enzyme to use would be rTth DNA polymerase, which is included in the GeneAmp Thermostable rTth Reverse Transcriptase RNA PCR kit (part number N808-0069).