Pierce™ Protein A/G Plus Agarose

Thermo Scientific Pierce Protein A/G Plus Agaroseは、きわめて高い結合能を持つProtein A/Gアガロースビーズレジンであり、さまざまな抗体アフィニティ精製法に使用できます。

Protein A/G Plus Agaroseの特長：

•Protein A/G – Protein AとProtein Gの抗体結合ドメインを持つ固定化された組み換え融合タンパク質で、ほぼすべての哺乳類種からポリクローナルIgGを精製可能
• アガロースレジン – タンパク質アフィニティ精製法でもっともよく使用されている6%架橋型アガロースビーズ（CL-6B）を担体とする
• 不活性で安定している – 優れた製造法により、無電荷で耐浸出性のある共有結合によってProtein A/Gが固定化されるため、非特異的結合が少なく、収量を低下させずに複数回の使用が可能
• 高い結合能 – この「Plus」バージョンのPierce Protein A/G Agaroseは、固定化Protein A/Gの高密度の負荷を有し、結合能はヒトIgGでレジン1 mLあたり50 mgを超える

Pierce Protein A/G Plus Agaroseは、精製された天然Protein A/G組み換え融合タンパク質が高品質の6%架橋型アガロースビーズ（CL-6B）に高密度で共有結合的に固定化されたものです。Protein A/Gは、Protein AとProtein Gの両方の免疫グロブリン結合ドメインを結合するため、このレジンは広範囲の哺乳類宿主種からのIgG抗体のアフィニティ精製に効果的です。

Protein A/Gは、Protein AとProtein GのIgG結合ドメインを組み合わせた遺伝子組換えタンパク質です。融合タンパク質は大腸菌で発現します。Protein A/GにはProtein Aの4つのFc結合ドメインとProtein Gの2つのFc結合ドメインが含まれるため、最終質量は50,460ダルトン（SDS-PAGEでは40～45 kDa）になります。Protein A/GはProtein A単独ほどpHに依存しませんが、Protein AおよびGの添加特性はすべてのヒトIgGサブクラスに結合しているため、サブクラスの同定がされていないポリクローナルまたはモノクローナルIgG抗体の精製に最適です。

Pierce Protein A/G Plus Agaroseは、Thermo Scientific AminoLink Coupling Chemistryを用いて調製されており、従来のリガンド固定化法に比べて利点がいくつかあります。AminoLink固定化では、アガロースビーズの糖モノマーとProtein Aの天然リジン残基の間で、シンプルなアミド結合によって結合が形成されます。典型的な臭化シアン (CNBr) による固定化とは異なり、AminoLink では、非特異的結合の原因となり得る新規官能基が導入されず、安定で不可逆な結合が形成されます。その結果、抗体精製を複数回繰り返しても機能性固定化Protein A/Gを保持している結合能の高いレジンになります。

架橋型6%アガロースビーズ（CL-6B）の特性：
• pH安定性の維持：2～14（短期）；3～13（長期）
•平均粒子径：45～165ミクロン
• 排除限界分子量：10,000～4,000,000 Da
• 最大流量：約1 mL／分（直径1 cmのカラムにおいて）
• 最大直線速度：30 cm／時
• 最大圧力：25 psi（1.5 bar）未満、「レジンが耐えられるカラム全体の圧力低下の最大値」と定義される（注：液体クロマトグラフィー装置に表示されるゲージ圧力は、カラム全体の圧力低下ではなく、システム全体の圧力の測定値である場合があります。）

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