Restore™ Western Blot Stripping Buffer
Restore™ Western Blot Stripping Buffer
Thermo Scientific™

Restore™ Western Blot Stripping Buffer

Thermo Scientific Restore Western Blot Stripping Bufferは、ニトロセルロース膜およびPVDF膜から一次および二次抗体を安全かつ効果的に除去し、化学発光ウェスタンブロットの再プローブを可能にします。Restore詳細を見る
製品番号(カタログ番号)数量
210635 L
2106230 mL
21059500 mL
製品番号(カタログ番号) 21063
価格(JPY)
167,000
Each
お問い合わせください ›
数量:
5 L
一括またはカスタム形式をリクエストする
Thermo Scientific Restore Western Blot Stripping Bufferは、ニトロセルロース膜およびPVDF膜から一次および二次抗体を安全かつ効果的に除去し、化学発光ウェスタンブロットの再プローブを可能にします。

Restore Western Blot Stripping Bufferの特長:

•時間を節約—ゲル泳動やブロッティングを再度行う必要なし
• 高価なサンプルを節約—同じターゲットサンプルを使用して膜を再プローブ可能
• 効率的—組成は自家製バッファーよりもより効率的に抗体を除去
• 穏やか—除去時にターゲット抗原を損傷しないため、効率的な再プロービングを実現
• 無臭—メルカプタンを含まないため刺激臭なし
• 経済的—市販の他のストリッピングバッファーよりも安価

製品の詳細
新しい一次抗体や抗体濃度をテストするためにゲル電気泳動を行い、免疫ブロットアッセイ分析を複数回実施するのは、時間とコストがかかります。Restore Western Blot Stripping Bufferにより、化学発光ウェスタンブロッティング基質で免疫ブロットを検出する際のこの無駄を排除できます。Restore Stripping Bufferは、固定された抗原を除去または損傷することなく、免疫ブロットから一次および二次抗体を完全に、かつ効率的に除去するため、ブロットを確実にストリッピングおよび再プローブできます。

西洋ワサビペルオキシダーゼ用Thermo Scientific SuperSignal Substratesなどの試薬による化学発光ウェスタンブロッティング検出は、今日使用されているもっとも一般的で感度の高い手法の1つです。これらの基質は沈殿して膜表面に結合しないため、化学発光によって検出されたウェスタンブロットは、親和結合した一次および二次抗体を除去する試薬でストリッピングできます。ストリッピングバッファーが効果を発揮するためには、結合した抗体を解離させる強さが必要ですが、ニトロセルロース膜またはPVDF膜に転写されたターゲットタンパク質をそのまま残す穏やかさも必要です。Restore Western Blot Stripping Bufferはこれらの特性を備えています。

ストリッピングと再プローブにより、異なるターゲットをプローブするために複数のゲルを泳動する必要がなくなるため、貴重なサンプルや高価なサンプルを無駄にすることはありません。Restore Western Blot Stripping Bufferを使用して1つのゲルから転写した1枚の膜をストリッピングして、一次抗体を除去できます。ブロットのストリッピングにかかる時間は一次抗体の親和性によりますが、わずか15~30分です。ストリッピング後、ブロックして新しい一次抗体で再プローブします。また、最初の結果が良好でなかった場合に、条件を最適化するためにブロットをストリッピングし、濃度を調整した抗体で再プローブできます。

アプリケーション
• ニトロセルロースまたはPVDFブロットを再使用して、異なる一次抗体で異なるターゲットを検出
• 最初に効果的でなかった抗体濃度を補正または最適化するために、ブロットを再プローブ

プロトコルの概要
• ブロットを洗浄し、化学発光基質を除去する。
•ブロットをRestore Western Blot Stripping Bufferで5~15分間37℃(一部の抗体は室温でも十分)でインキュベートする。
•ブロットを取り出し、Wash Buffer(TBS-TまたはPBS-T)で洗浄する。
•抗体が十分除去されていることを確認する。
• 次の免疫ブロット実験を実行する。
研究用途にのみご使用ください。診断目的には使用できません。
仕様
検出法Chemiluminescence
使用対象(アプリケーション)Western Blot
形状液体
Membrane CompatibilityNitrocellulose, PVDF
製品ラインRestore
製品タイプWestern Blot Stripping Buffer
数量5 L
Unit SizeEach
組成および保存条件
保存:受け取り後は、室温または4℃で保存。製品は室温で出荷されます。

よくあるご質問(FAQ)

How many times can I strip my blot using Restore or Restore Plus Western Blot Stripping Buffers ?

The stability of the attached (transferred and bound) protein will determine the number of times the membrane can be successfully re-probed after stripping. The protein may withstand stripping as many as four times or as few as one time.

Find additional tips, troubleshooting help, and resources within our Protein Electrophoresis and Western Blotting Support Center.

What is the proper wash buffer to use after stripping with Restore or Restore Plus Western Blot Stripping buffers?

Wash the membrane with the same buffer as was used between antibody probing steps during the Western blotting procedure.

Find additional tips, troubleshooting help, and resources within our Protein Electrophoresis and Western Blotting Support Center.

Can I strip membranes with Restore or Restore Plus Western Blot Stripping Buffer and reprobe for subsequent detection with fluorescent probes?

No. Although the fluorescent antibodies, like other antibodies, can be stripped with Restore Buffers, stripped membranes typically produce unacceptable background for subsequent fluorescent detection methods. We recommend Restore Fluorescent Western Blot Stripping Buffer, Cat. No. 62299 (20 mL) and Cat. No. 62300 (100 mL).

Note: Restore Fluorescent Western Blot Stripping Buffer is for use with low-fluorescence PVDF membrane (Cat. No. 22860) only.

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Will Restore and Restore Plus Western Blot Stripping Buffers remove biotin-bound avidin, streptavidin or NeutrAvidin Protein conjugates?

No. Restore and Restore Plus Buffers are not stringent enough to break the avidin-biotin interaction. A buffer capable of breaking this interaction would likely also damage the target protein, making it undetectable. However it may be possible to strip the complexed biotinylated primary antibody and streptavidin-HRP secondary antibody from the target protein on the membrane. Please also see Tech Tip: Strip and Reprobe Western Blots (https://assets.thermofisher.com/TFS-Assets/BID/Technical-Notes/strip-reprobe-western-blots-tech-tip.pdf).

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Will the Restore and Restore Plus Western Blot Stripping Buffers remove precipitating substrates?

No. The antibodies are removed but the substrate leaves a permanent precipitate on the membrane that cannot be removed. Restore and Restore Plus Buffers are designed for procedures using chemiluminescent substrates. Please note that this is not compatible with fluorescence supstrates as it will result in increased background. For fluorescent substrates please use our Restore Fluorescent Western Blot Stripping Buffer. Please also see Tech Tip: Strip and Reprobe Western Blots (https://assets.thermofisher.com/TFS-Assets/BID/Technical-Notes/strip-reprobe-western-blots-tech-tip.pdf).

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