EZ-Link™ Sulfo-NHS-LC-Biotin
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Thermo Scientific™

EZ-Link™ Sulfo-NHS-LC-Biotin

Thermo Scientific EZ-Linkスルホ-NHS-LC-ビオチンは、中鎖の水溶性ビオチン化試薬で、第一級アミンを持つ抗体、タンパク質、その他の分子の標識に使用します。EZ-Linkスルホ-NHS-LC-ビオチンの特長:•タンパク質標識—抗体をビオチン化して、ストレプトアビジン樹脂またはプローブを使用した固定化、精製詳細を見る
製品番号(カタログ番号)数量
21335100 mg
A3925710 x 1 mg
製品番号(カタログ番号) 21335
価格(JPY)
66,700
Each
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数量:
100 mg
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Thermo Scientific EZ-Linkスルホ-NHS-LC-ビオチンは、中鎖の水溶性ビオチン化試薬で、第一級アミンを持つ抗体、タンパク質、その他の分子の標識に使用します。

EZ-Linkスルホ-NHS-LC-ビオチンの特長:

タンパク質標識—抗体をビオチン化して、ストレプトアビジン樹脂またはプローブを使用した固定化、精製、または検出を容易にします
細胞表面標識—負電荷を持つ試薬は細胞膜を透過しないため、細胞全体の表面タンパク質のみビオチン化します
アミン反応性—リジン側鎖やポリペプチドのアミノ末端などの第一級アミン(-NH2)と反応します
可溶性—荷電スルホ-NHS基は、通常のNHSエステル化合物に比べて試薬の水溶性を向上させます
不可逆性—恒久的なアミド結合を形成するため、スペーサーアームを切断することはできません
中鎖—スペーサー アーム(標的に追加された全長)は22.4オングストロームで、適切な長さ(ビオチン結合のための立体障害を最小限に抑える)と適度な質量のバランスに優れています

スルホ-NHS-LC-ビオチンは、水溶性で切断できない非常に類似した3種類のEZ-Link試薬の1つで、溶液中の抗体、タンパク質、および他の一級アミン含有マクロ分子のシンプルかつ効率的なビオチン化を実現します。細胞表面タンパク質の特異的標識も、これら独自の水溶性かつ膜非透過性の試薬の一般的なアプリケーションです。スペーサーアームの長さのみが異なるこれら3つのスルホ-NHS-エステル試薬を利用することにより、ビオチン結合の立体障害が重要な要素となる標識および検出試験を最適化することが可能となります。スルホ-NHS-LC-ビオチンは、複数のパッケージサイズと完全なタンパク質標識キットで提供いたします。

弊社は、目的の研究アプリケーションにおいて、可能な限り高い製品の完全性、一貫性、および性能が保証されたビオチン試薬を製造しています。

ビオチンのN-ヒドロキシスルホスクシンイミド(NHS)エステルは、もっとも一般的なビオチン化試薬です。NHS活性化ビオチンは、アルカリ性バッファー中で1級アミノ基(-NH2)と効率的に反応して、安定したアミド結合を形成します。タンパク質(抗体など)は一般的に、リジン(K)残基の側鎖や各ポリペプチドのN末端など、標識の標的として利用できる複数の1級アミンを有しています。

ビオチンNHSエステル試薬には、長さ、溶解性、細胞透過性、および開裂性が異なるさまざまな種類があります。非スルホン化NHSビオチンは細胞透過性ですが、DMSOやDMFなどの有機溶媒に溶解する必要があります。スルホ-NHSビオチン(およびペグ化ペーサーを有するもの)は直接水に溶解しますが、膜透過性ではありません。ジスルフィド結合を含むタイプは還元剤を使用して切断できるため、ビオチン基を標識タンパク質から切断することができます。

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研究用途にのみご使用ください。診断目的には使用できません。
仕様
細胞透過性細胞非透過性
概要EZ-Link Sulfo-NHS-LC-Biotin
標識タイプビオチン&類似体
製品ラインEZ-Link
製品タイプSulfo-NHS-LC-Biotin
数量100 mg
反応性部分活性エステル、スクシンイミジルエステル、Sulfo-NHS Ester
化学反応性アミン
標識または色素ビオチン
溶解性DMF(ジメチルホルムアミド), DMSO(ジメチルスルホキシド), Water
スペーサー中程度の長さ
Unit SizeEach
組成および保存条件
-20℃で乾燥した場所に保存。室温で出荷

よくあるご質問(FAQ)

Can I make a Sulfo-NHS-LC-Biotin stock solution to use later?

No. NHS esters hydrolyze very quickly. The container must be brought to room temperature (RT) prior to opening, then the amount of biotinylation reagent weighed, dissolved and used immediately.

Find additional tips, troubleshooting help, and resources within our Protein Assays and Analysis Support Center.

Can Sulfo-NHS-LC-Biotin be used in cell surface biotinylation?

Yes. Because this molecule dissolves readily in polar solutions and is itself charged by the sodium sulfoxide group on the succinimidyl ring, it cannot permeate the cell wall or membrane of an intact cell. As long as the cell is intact, only the primary amines on the surface will be biotinylated.

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Why can't I perform biotinylation reactions in Tris buffer with Sulfo-NHS-LC-Biotin?

Tris is a primary amine, which will directly compete with protein primary amines for reaction with the NHS-ester activated biotin reagent. However, once a protein is labeled and desalted, Tris buffer can be used for storage or assay buffers, as appropriate for the protein and application.

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What molar excess of Sulfo-NHS-LC-Biotin should I use to label antibodies and other proteins?

The molar excess to use depends on the concentration of the ligand to be biotinylated. Although the literature contains references that use between 2-50 molar excess of biotin, we recommend the following: 10-fold molar excess for 10 mg/mL solution of protein; 25-fold molar excess for 2 mg/mL solution of protein.

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Can I dissolve the EZ-Link Sulfo-NHS-LC-Biotin, No-Weigh Format (Cat. No. A39257, 21335) in water for storage?

No, the EZ-Link Sulfo-NHS-LC-Biotin, No-Weigh Format (Cat. No. A39257) should not be dissolved in water for storage. We recommended storing EZ-Link Sulfo-NHS-LC-Biotin, No-Weigh Format at -20 degrees C with desiccant as it is very moisture sensitive. Furthermore, to avoid moisture condensation onto the product, equilibrate vial to room temperature before opening.

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引用および参考文献 (15)

引用および参考文献
Abstract
Mechanisms of tethering and cargo transfer during epididymosome-sperm interactions.
Authors:Zhou W, Stanger SJ, Anderson AL, Bernstein IR, De Iuliis GN, McCluskey A, McLaughlin EA, Dun MD, Nixon B
Journal:BMC Biol
PubMed ID:30999907
'The mammalian epididymis is responsible for the provision of a highly specialized environment in which spermatozoa acquire functional maturity and are subsequently stored in preparation for ejaculation. Making important contributions to both processes are epididymosomes, small extracellular vesicles released from the epididymal soma via an apocrine secretory pathway. While considerable ... More
Molecular determinants in Frizzled, Reck, and Wnt7a for ligand-specific signaling in neurovascular development.
Authors:Cho C, Wang Y, Smallwood PM, Williams J, Nathans J
Journal:Elife
PubMed ID:31225798
'The molecular basis of Wnt-Frizzled specificity is a central question in developmental biology. Reck, a multi-domain and multi-functional glycosylphosphatidylinositol-anchored protein, specifically enhances beta-catenin signaling by Wnt7a and Wnt7b in cooperation with the 7-transmembrane protein Gpr124. Among amino acids that distinguish Wnt7a and Wnt7b from other Wnts, two clusters are essential ... More
Norrin-induced Frizzled4 endocytosis and endo-lysosomal trafficking control retinal angiogenesis and barrier function.
Authors:Zhang C, Lai MB, Khandan L, Lee LA, Chen Z, Junge HJ
Journal:Nat Commun
PubMed ID:28675177
Angiogenesis and blood-brain barrier formation are required for normal central nervous system (CNS) function. Both processes are controlled by Wnt or Norrin (NDP) ligands, Frizzled (FZD) receptors, and ß-catenin-dependent signalling in vascular endothelial cells. In the retina, FZD4 and the ligand NDP are critical mediators of signalling and are mutated ... More
USP48 restrains resection by site-specific cleavage of the BRCA1 ubiquitin mark from H2A.
Authors:Uckelmann M, Densham RM, Baas R, Winterwerp HHK, Fish A, Sixma TK, Morris JR
Journal:Nat Commun
PubMed ID:29335415
BRCA1-BARD1-catalyzed ubiquitination of histone H2A is an important regulator of the DNA damage response, priming chromatin for repair by homologous recombination. However, no specific deubiquitinating enzymes (DUBs) are known to antagonize this function. Here we identify ubiquitin specific protease-48 (USP48) as a H2A DUB, specific for the C-terminal BRCA1 ubiquitination ... More
The IgCAM CLMP regulates expression of Connexin43 and Connexin45 in intestinal and ureteral smooth muscle contraction in mice.
Authors:Langhorst H, Jüttner R, Groneberg D, Mohtashamdolatshahi A, Pelz L, Purfürst B, Schmidt-Ott KM, Friebe A, Rathjen FG
Journal:Dis Model Mech
PubMed ID:29361518
CAR-like membrane protein (CLMP), an immunoglobulin cell adhesion molecule (IgCAM), has been implicated in congenital short-bowel syndrome in humans, a condition with high mortality for which there is currently no cure. We therefore studied the function of CLMP in a ... More