Thermo Scientific EZ-Link HPDP-Biotinは、スルフヒドリル(-SH)基と反応する膜透過性ビオチン標識試薬です。反応によって生じる、標的スルフヒドリル分子とビオチン基とのジスルフィド結合は、還元剤により切断してビオチン基を放出させ、タンパク質(またはペプチド)を元の未修飾形態に再生できます。HPDP-ビオチンによる標識は、固定化アビジン、ストレプトアビジン、またはThermo Scientific™ NeutrAvidin™ Proteinを使用して標的分子を精製する場合に便利で、SDS PAGEまたは質量分析を削減できます;捕捉したビオチン化分子は、アビジンとビオチンとの高親和性相互作用を強酸または変性剤で解離させるのではなく、ジスルフィド結合をジチオスレイトール(DTT)または他の還元剤で切断することにより、効率的に担体から溶出できます。
Thermo Scientific™ No-Weigh™製品は、あらかじめ分注した形で提供される特殊試薬です。計量済みのパッケージではバイアルを繰り返し開閉することがないため、経時的な試薬反応性の喪失や汚染を防ぎます。このフォーマットでは、毎回新しい試薬バイアルを使用できるため、少量の試薬を計量する手間がなくなり、試薬の安定性に対する懸念が軽減します。
EZ-Link HPDP-Biotinの特長:
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タンパク質の標識—タンパク質法で使用する抗体または他のタンパク質をビオチン化
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チオール反応性—システイン(C)の側鎖などのスルフヒドリル基(-SH)と反応
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ピリジルジチオール活性化—PBSなどの緩衝液中(pH 6.5~7.5)で反応を実施
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可逆的—DTTやその他の還元剤で切断可能なジスルフィド結合を形成
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可溶性—DMSOまたはDMSOに溶解してから水系バッファーでさらに希釈
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中程度の長さ—スペーサーアーム(ターゲットに付加された全長)は29.2オングストローム
HPDP-Biotinは、タンパク質のシステインやスルフヒドリル基を含有する他の分子を標識するためのピリジルジチオール-ビオチン化合物です。この試薬は中性付近のバッファー中で還元チオール(-SH)と特異的に反応して、可逆性のジスルフィド結合を形成します。HPDP-Biotinは、元の未修飾分子を回収する必要がある標識およびアフィニティー精製アプリケーションに有用です。たとえば、あるタンパク質をビオチン化して、その相互作用物質に結合させ、ストレプトアビジンカラムに捕捉し、最終的にジチオスレイトールでジスルフィド結合を還元することで溶出させ、回収できます。
当社は、意図した研究アプリケーションで可能な限り最高の製品完全性、一貫性、および性能を確保するようビオチン試薬を製造しています。
ビオチン化試薬は、反応性、長さ、溶解性、細胞透過性、および切断性が異なります。3
種類のスルフヒドリル反応性化合物(マレイミド、ヨードアセチル、およびピリジルジチオール)を提供しています。ピリジルジチオール試薬は中性付近のバッファー中でスルフヒドリル基(-SH)と特異的に反応して、可逆的なジスルフィド結合を形成します。
タンパク質では、システイン(C)残基が存在するところにスルフヒドリル基が存在します。スルフヒドリル基を標識に利用可能な状態にするには、シスチンジスルフィド結合を還元する必要があります。抗体のヒンジ領域のジスルフィド結合を選択的に還元して、標識可能な機能性半抗体を作製できます。
アプリケーション:• 細胞表面受容体の回収、および固定化アビジンカラムでビオチンの切断