EZ-Link™ HPDP-Biotin, No-Weigh™ Format
EZ-Link™ HPDP-Biotin, No-Weigh™ Format
Thermo Scientific™

EZ-Link™ HPDP-Biotin, No-Weigh™ Format

Thermo Scientific EZ-Link HPDP-Biotinは、スルフヒドリル(-SH)基と反応する膜透過性ビオチン標識試薬です。反応によって生じる、標的スルフヒドリル分子とビオチン基とのジスルフィド結合は、還元剤により切断してビオチン基を放出させ詳細を見る
製品番号(カタログ番号)数量
2134150 mg
A3539010 x 1 mg
製品番号(カタログ番号) 21341
価格(JPY)
73,600
Each
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数量:
50 mg
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Thermo Scientific EZ-Link HPDP-Biotinは、スルフヒドリル(-SH)基と反応する膜透過性ビオチン標識試薬です。反応によって生じる、標的スルフヒドリル分子とビオチン基とのジスルフィド結合は、還元剤により切断してビオチン基を放出させ、タンパク質(またはペプチド)を元の未修飾形態に再生できます。HPDP-ビオチンによる標識は、固定化アビジン、ストレプトアビジン、またはThermo Scientific™ NeutrAvidin™ Proteinを使用して標的分子を精製する場合に便利で、SDS PAGEまたは質量分析を削減できます;捕捉したビオチン化分子は、アビジンとビオチンとの高親和性相互作用を強酸または変性剤で解離させるのではなく、ジスルフィド結合をジチオスレイトール(DTT)または他の還元剤で切断することにより、効率的に担体から溶出できます。

Thermo Scientific™ No-Weigh™製品は、あらかじめ分注した形で提供される特殊試薬です。計量済みのパッケージではバイアルを繰り返し開閉することがないため、経時的な試薬反応性の喪失や汚染を防ぎます。このフォーマットでは、毎回新しい試薬バイアルを使用できるため、少量の試薬を計量する手間がなくなり、試薬の安定性に対する懸念が軽減します。

EZ-Link HPDP-Biotinの特長:

タンパク質の標識—タンパク質法で使用する抗体または他のタンパク質をビオチン化
チオール反応性—システイン(C)の側鎖などのスルフヒドリル基(-SH)と反応
ピリジルジチオール活性化—PBSなどの緩衝液中(pH 6.5~7.5)で反応を実施
可逆的—DTTやその他の還元剤で切断可能なジスルフィド結合を形成
可溶性—DMSOまたはDMSOに溶解してから水系バッファーでさらに希釈
中程度の長さ—スペーサーアーム(ターゲットに付加された全長)は29.2オングストローム

HPDP-Biotinは、タンパク質のシステインやスルフヒドリル基を含有する他の分子を標識するためのピリジルジチオール-ビオチン化合物です。この試薬は中性付近のバッファー中で還元チオール(-SH)と特異的に反応して、可逆性のジスルフィド結合を形成します。HPDP-Biotinは、元の未修飾分子を回収する必要がある標識およびアフィニティー精製アプリケーションに有用です。たとえば、あるタンパク質をビオチン化して、その相互作用物質に結合させ、ストレプトアビジンカラムに捕捉し、最終的にジチオスレイトールでジスルフィド結合を還元することで溶出させ、回収できます。

当社は、意図した研究アプリケーションで可能な限り最高の製品完全性、一貫性、および性能を確保するようビオチン試薬を製造しています。

ビオチン化試薬は、反応性、長さ、溶解性、細胞透過性、および切断性が異なります。3種類のスルフヒドリル反応性化合物(マレイミド、ヨードアセチル、およびピリジルジチオール)を提供しています。ピリジルジチオール試薬は中性付近のバッファー中でスルフヒドリル基(-SH)と特異的に反応して、可逆的なジスルフィド結合を形成します。

タンパク質では、システイン(C)残基が存在するところにスルフヒドリル基が存在します。スルフヒドリル基を標識に利用可能な状態にするには、シスチンジスルフィド結合を還元する必要があります。抗体のヒンジ領域のジスルフィド結合を選択的に還元して、標識可能な機能性半抗体を作製できます。

アプリケーション:
• 細胞表面受容体の回収、および固定化アビジンカラムでビオチンの切断
研究用途にのみご使用ください。診断目的には使用できません。
仕様
細胞透過性細胞透過性
標識タイプビオチン&類似体
製品ラインEZ-Link
製品タイプHPDP-ビオチン
数量50 mg
反応性部分ピリジルジスルフィド
化学反応性チオール
標識または色素ビオチン
溶解性DMF(ジメチルホルムアミド), DMSO(ジメチルスルホキシド)
スペーサー長さがあり、切断可能
Unit SizeEach
組成および保存条件
4℃で保存。

よくあるご質問(FAQ)

What is the advantage of using EZ-Link HPDP-Biotin over maleimide- or iodoacetyl-containing biotinylation reagents?

Both maleimide- and iodoacetyl-containing biotinylation reagents react with sulfhydryl (-SH) groups to form stable thioether bonds that are not cleavable. EZ-Link HPDP-Biotin on the other hand is a pyridyldithiol-biotin compound that reacts with -SH groups in near-neutral buffers to form reversible disulfide bonds. Because the disulfide group can be cleaved using DTT or other reducing agents, HPDP-Biotin is useful for labeling and affinity-purification applications that require recovery of the original, unmodified molecule.

Find additional tips, troubleshooting help, and resources within our Protein Purification and Isolation Support Center.

Is it possible that HPDP-biotin (Cat. No. 21341) can also react with non-reduced sulfur?

We have no evidence that HPDP-biotin (or any pyridyldithiol compound) reacts with anything other than sulfhydryl (-SH) groups. However, many sulfur-containing compounds interconvert among several different forms. For thiouracil, with the different tautomers that are possible, the =S is in equilibrium with –SH, which can then react with the HPDP.

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引用および参考文献 (4)

引用および参考文献
Abstract
A variant NuRD complex containing PWWP2A/B excludes MBD2/3 to regulate transcription at active genes.
Authors:Zhang T, Wei G, Millard CJ, Fischer R, Konietzny R, Kessler BM, Schwabe JWR, Brockdorff N
Journal:Nat Commun
PubMed ID:30228260
'Transcriptional regulation by chromatin is a highly dynamic process directed through the recruitment and coordinated action of epigenetic modifiers and readers of these modifications. Using an unbiased proteomic approach to find interactors of H3K36me3, a modification enriched on active chromatin, here we identify PWWP2A and HDAC2 among the top interactors. ... More
Splicing of long non-coding RNAs primarily depends on polypyrimidine tract and 5' splice-site sequences due to weak interactions with SR proteins.
Authors:Krchnáková Z, Thakur PK, Krausová M, Bieberstein N, Haberman N, Müller-McNicoll M, Stanek D
Journal:Nucleic Acids Res
PubMed ID:30445574
'Many nascent long non-coding RNAs (lncRNAs) undergo the same maturation steps as pre-mRNAs of protein-coding genes (PCGs), but they are often poorly spliced. To identify the underlying mechanisms for this phenomenon, we searched for putative splicing inhibitory sequences using the ncRNA-a2 as a model. Genome-wide analyses of intergenic lncRNAs (lincRNAs) ... More
The Implication of Early Chromatin Changes in X Chromosome Inactivation.
Authors:Zylicz JJ, Bousard A, Žumer K, Dossin F, Mohammad E, da Rocha ST, Schwalb B, Syx L, Dingli F, Loew D, Cramer P, Heard E
Journal:Cell
PubMed ID:30595450
'During development, the precise relationships between transcription and chromatin modifications often remain unclear. We use the X chromosome inactivation (XCI) paradigm to explore the implication of chromatin changes in gene silencing. Using female mouse embryonic stem cells, we initiate XCI by inducing Xist and then monitor the temporal changes in ... More
Bioconjugation strategy for cell surface labelling with gold nanostructures designed for highly localized pH measurement.
Authors:Puppulin L, Hosogi S, Sun H, Matsuo K, Inui T, Kumamoto Y, Suzaki T, Tanaka H, Marunaka Y
Journal:Nat Commun
PubMed ID:30538244
Regulation of intracellular pH is critically important for many cellular functions. The quantification of proton extrusion in different types of cells and physiological conditions is pivotal to fully elucidate the mechanisms of pH homeostasis. Here we show the use of gold nanoparticles (AuNP) to create a high spatial resolution sensor ... More