Thermo Scientific EZ-リンクヒドラジド-PEG4-ビオチン(ビオチン-PEG4-ヒドラジドとも呼ぶ)は、アルデヒド反応性ビオチン化試薬であり、4ユニットのポリエチレングリコール(PEG)スペーサーアームを備えているため、親水性が向上しています。
EZ-リンクヒドラジド-PEG4-ビオチンの特長:
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糖タンパク質のラベリング—ストレプトアビジンプローブまたは樹脂を使用して検出や精製を行うためにシアル酸残基で糖タンパク質をビオチン化します
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細胞表面のラベリング—細胞表面の糖タンパク質をビオチン化し分離します。試薬は細胞全体の細胞膜を透過しません
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アルデヒド活性化—糖基の過ヨウ素酸化によって形成されるアルデヒドで反応します
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ヒドラジド活性化—酢酸ナトリウムのようなバッファー中でpH4∼6で反応します
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ペグ化 – スペーサーアームは親水性で4ユニットのポリエチレングリコール(PEG)基を含みます
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可溶性向上 – ペグ化によりビオチン化分子に水溶性が加わり、溶液中に残っているビオチン化抗体の凝集を防ぎます
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不可逆性—半恒久的なヒドラゾン結合を形成し、スペーサーアームは開裂できません
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水溶性—通常はDMSOに溶解して濃縮ストック溶液となります
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長いリーチ—スペーサーアーム(ターゲットに追加した状態での全長)は31.3オングストロームです
ビオチン-PEG4-ヒドラジドは、アルデヒドや酸化性糖基を含む糖タンパク質やその他の分子のビオチン化を可能にします。ヒドラジド基はアルデヒド基やケトン基と自発的に反応し、安定したヒドラゾン結合を形成します。アルデヒド基は、シアル酸や糖鎖中のその他の糖内のシス-ジオールの穏やかな
過ヨウ素酸化によって形成できます。
親水性の4単位
ポリエチレングリコール(PEG)スペーサーアームは、ビオチン化分子に水溶性を供与するため、溶液に保存されたビオチン化抗体の凝集を低減します。PEGセグメントはスペーサーアームに長さと柔軟性を追加し、アビジン分子への結合に伴う立体障害を最小限に抑えます。
当社は、研究での用途を目的としてビオチン試薬を製造し、可能な限り最高の製品完全性、一貫性、性能を確保しています
ビオチン化試薬は、反応性、長さ、溶解性、細胞透過性、切断性が異なります。ヒドラジドとアルコキシアミンは、
カルボニル反応性基の2つの種類です。ヒドラジド(—NH-NH2)は、わずかに酸性の条件下でアルデヒド基と特異的に反応してヒドラゾン結合を形成します。これらの結合は、
シアノ水素化ホウ素ナトリウム(製品番号44892)を使用して、安定した二次アミン結合にさらに還元させることができます。
アニリン(製品番号88944)の存在下では、反応がより効率的になります。または
EDCカルボジイミド化合物を使用して、ヒドラジドをカルボン酸に結合させることもできます
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反応性アルデヒド基 は、
過ヨウ酸ナトリウム(製品番号 20504)を使って構成要素の糖ジオールを酸化して、糖タンパク質やその他の多糖類化合物中で生成できます。シアル酸残基はタンパク質のグリコシル化の一般的な成分であり、1 mM NaIO4でアルデヒドに容易に変換できます。