Thermo Scientific EZ-Link NHS-SS-PEG4ビオチンは、スペーサーアームにジスルフィドおよびポリエチレングリコール(PEG)基を含み、切断可能で溶解性を向上させるビオチン化を実現します。
EZ-Link NHS-SS-PEG4ビオチンの特長:
•
タンパク質標識化—ストレプトアビジンまたは樹脂を使用する検出または精製を目的とする抗体または他のタンパク質のビオチン化
•
アミン反応性—リジン側鎖(K)やポリペプチドのアミノ末端などの一級アミン(-Nh2)と反応します
•
切断可能—スペーサーアーム中のジスルフィド結合により、DTTなどの還元剤を使用してビオチン標識を除去できます。分子に付着残留するスルフヒドリル基はごくわずかです
•
ペグ化—スペーサーアームは、4ユニットの親水性ポリエチレングリコール(PEG)基を持っています
•
可溶性の強化—ペグ化はビオチン化分子に可溶化性を付与し、溶液中に保存されているビオチン化抗体の凝集を防ぎます
•
長いリーチ—スペーサーアーム(ターゲットに追加された全長)が37.9オングストロームであるため、アビジン分子に結合する際の立体障害を低減します
NHS-SS-PEG4により、ビオチン抗体、タンパク質、および他の一級アミン含有マクロ分子のビオチン標識化がシンプルかつ効率的になります。
N-ヒドロキシスクシンイミドエステル(NHSエステル)基は、pH 7~9でタンパク質およびペプチドリジン(K)およびN末端アミノ基と特異的かつ効率的に反応して、安定したアミド結合を形成します。親水の性の
ポリエチレングリコール(PEG)スペーサーアームは、ビオチン化分子に水溶性を供与するため、溶液に保存されたビオチン化タンパク質の凝集を低減します。一体型ジスルフィド結合により、DTTまたは他の還元剤を使用して標識化分子からビオチングループを切断できるため、アフィニティーベースのアッセイでアビジン結合タンパク質複合体を効率的に回収できます。
当社はビオチン試薬の製造において、目的の研究アプリケーションに対して可能な限り最高の製品完全性、一貫性、および性能を保証しています。
N-ヒドロキシスルホスクシンイミド(NHS)エステルは、最も一般的なビオチン化試薬です。NHS活性化ビオチンは、アルカリ性バッファー中で1級アミノ基(-NH2)と効率的に反応して、安定したアミド結合を形成します。タンパク質(抗体など)は一般的に、リジン(K)残基の側鎖や各ポリペプチドのN末端など、標識の標的として利用できる複数の1級アミンを有しています。
ビオチンNHSエステル試薬には、長さ、溶解性、細胞透過性、および開裂性が異なるさまざまな種類があります。非スルホン化NHSビオチンは細胞透過性ですが、DMSOやDMFなどの有機溶媒に溶解する必要があります。スルホ-NHSビオチン(およびペグ化ペーサーを有するもの)は直接水に溶解しますが、膜透過性ではありません。ジスルフィド結合を含む種類は還元剤を使用して開裂できるため、ビオチン基を標識タンパク質から切り離すことができます。