DTNB (Ellman's Reagent) (5,5-dithio-bis-(2-nitrobenzoic acid)
DTNB (Ellman's Reagent) (5,5-dithio-bis-(2-nitrobenzoic acid)
Thermo Scientific™

DTNB (Ellman's Reagent) (5,5-dithio-bis-(2-nitrobenzoic acid)

Thermo Scientific PierceのEllmanの試薬(DTNB)は、スルフヒドリル基と反応して着色された製品を生成し、溶液中の還元システインやその他の遊離スルフヒドリルを測定する信頼性の高い方法を提供します。Ellmanの試薬(5,5'-dithio-bis-[2-nitrobenzoic acid]詳細を見る
製品番号(カタログ番号)数量
225825 g
製品番号(カタログ番号) 22582
価格(JPY)
26,900
Each
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数量:
5 g
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Thermo Scientific PierceのEllmanの試薬(DTNB)は、スルフヒドリル基と反応して着色された製品を生成し、溶液中の還元システインやその他の遊離スルフヒドリルを測定する信頼性の高い方法を提供します。

Ellmanの試薬(5,5'-dithio-bis-[2-nitrobenzoic acid])は、システインなどのスルフヒドリル基を含む化合物の標準曲線と比較することで、サンプル中のスルフヒドリル基を推定するために使用されます。または、スルフヒドリル基は、TNBの消散係数(412 nmで14,150M-1 cm-1)を使用して測定できます。Ellmanの試薬は、プレカラム誘導体化手順を用いたHPLCによるアルキルチオールの測定や、複数の酵素の活性部位におけるチオールの研究など、スルフヒドリル基推定以外のアプリケーションに使用されています。

Ellmanの試薬の特長:

スルフヒドリル基アッセイ—遊離(還元)スルフヒドリル基(—SH)と定量的に反応して検出可能なTNB製品を生成します
比色検出—着色製品により、キュベットまたはマイクロプレートでの分光光度測定が可能です(λ最大=412 nm、ε=14,150/M·cm)
実績のある方法—特性評価された化学的性質により、消散係数の計算またはシステイン標準液の比較によって、ペプチドまたはタンパク質スルフヒドリル基を定量できます

試薬の特性
•代替名:DTNB、Ellmanの試薬
•化学名:5,5'-dithio-bis-(2-nitrobenzoic acid)
•反応性:スルフヒドリル基(—SH)
•化学式:C14H8N2O8S2
• CAS番号:69-78-3
• 分子量:396.35
• 形状:黄色の結晶粉末

DTNBは遊離スルフヒドリル基と反応して、ジスルフィドと2-nitro-5-thiobenzoic acid (TNB)を混合して生成します。この反応におけるDTNBの標的は、遊離スルフヒドリル基の接合ベース(R—S-)です。したがって、この反応の速度はいくつかの要因に依存します。(1)反応pH、(2)スルフヒドリル基のpKa'、(3)立体的および静電的影響。TNBは、この反応で生成される着色種で、可視範囲でモル吸光係数が高くなっています。TNBのモル吸光係数は当初、Ellman(1959)により412 nmおよびpH 8.0で13,600M-1 cm-1と報告されていました。そのため、この値は文献で頻繁に引用されています。しかし、その後の研究では、モル吸光係数が412 nmで14,150M-1 cm-1 at 412 nmの値によってより正確に反映されることが示されています。TNBの消失は、7.6~8.6のpH変化による影響を受けません。ただし、TNBの消散は他の溶媒とは異なります。
研究用途にのみご使用ください。診断目的には使用できません。
仕様
数量5 g
製品タイプDTNB
Unit SizeEach

よくあるご質問(FAQ)

Are there other uses for Thermo Scientific Ellman's Reagent besides estimation of sulfhydryls?

Ellman's Reagent may be used for applications other than the estimation of sulfhydryls in solution. It has been used for the determination of alkylthiols by HPLC using a pre-column derivatization procedure and to study thiols in the active site of several enzymes including thiolase, fatty acid synthase and mevalonate 5-diphosphate decarboxylase.

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What should I do if the sulfhydryl content in my sample is lower than expected?

It is possible that the sulfhydryls in the sample are not in reduced (free) state; i.e., have become oxidized. Ensure reduction of sulfhydryls using a reducing agent, then minimize the time delay between assay of the sample and its use in applications that depend on its free sulfhydryl content. Also maintain 1-5 mM EDTA in the sample to chelate divalent metal ions, which can oxidize sulfhydryls.

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What are the Quality Specifications for each lot of Thermo Scientific Ellman's Reagent?

The Certificate of Analysis lists if the infrared spectrum conforms to the structure and if the purity ≥ 98%.

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How stable are working solutions of Thermo Scientific Ellman's Reagent?

The Ellman's Reagent Solution can be prepared in advance in the recommended reaction buffer (0.1 M sodium phosphate, pH 8.0, containing 1 mM EDTA), and will be stable for about 1 week . An Ellman's Reagent Solution prepared in Tris pH 8.0 will also be stable for 1 week. The Ellman's Reagent Solution preapred in PBS, pH 7.2 is only stable for 1-2 days. This chemical is incompatible with strong oxidizing agents, strong bases and is sensitive to the presence of thiols. We have not tested Ellman's Reagent with DMSO.

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What is the recommended storage condition for Thermo Scientific Ellman's Reagent?

We recommend storing the product protected from moisture at 4 degrees C. It is susceptible to some hydrolysis by moisture. The product is shipped at ambient temperature.

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