Pierce™ Far-Western Blot Kit for Biotinylated Proteins
Pierce™ Far-Western Blot Kit for Biotinylated Proteins
Thermo Scientific™

Pierce™ Far-Western Blot Kit for Biotinylated Proteins

ビオチン化タンパク質用のThermo Scientific Pierceファーウエスタンブロットキットは、一次プローブとして使用されるビオチン標識試験タンパク質との相互作用により、ターゲットタンパク質のゲル内またはメンブレン上でのウェスタンブロッティング検出が可能です。ビオチン化タンパク質用ファーウェスタンブロッティングキットの特長:•メンブレン上またはゲル内の検出オプション— メンブレン上の検出は、より高い感度を提供します。ゲル内の検出はより高速であり、不完全または非効率的な転写に関連する問題を防止します•詳細を見る
製品番号(カタログ番号)数量
23500220 mL
製品番号(カタログ番号) 23500
価格(JPY)
143,000
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数量:
220 mL
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ビオチン化タンパク質用のThermo Scientific Pierceファーウエスタンブロットキットは、一次プローブとして使用されるビオチン標識試験タンパク質との相互作用により、ターゲットタンパク質のゲル内またはメンブレン上でのウェスタンブロッティング検出が可能です。

ビオチン化タンパク質用ファーウェスタンブロッティングキットの特長:

メンブレン上またはゲル内の検出オプション— メンブレン上の検出は、より高い感度を提供します。ゲル内の検出はより高速であり、不完全または非効率的な転写に関連する問題を防止します
ファーウエスタン分析のための非放射性代替物—信頼性が高く高感度なビオチン/ストレプトアビジン-HRP化学特性は、化学発光検出を組み合わせることで、ベイトタンパク質の放射標識に代わる実用的かつ安全な方法を提供します
有用な相互作用範囲— preyタンパク質とビオチン化ベイトタンパク質の間の中程度から強度の結合関連がある相互作用ペアに対して効果的です
一次抗体フリー検出— プローブとしてビオチン化タンパク質を使用し、一次抗体が不要になります。さらに、ターゲットタンパク質の同一性に関する事前の知識さえも不要になります
SDS-PAGEとnativeゲルの両方に適合— 還元または変性システムでは意図した相互作用が常に考慮されているとは限らないため、よりネイティブな環境でpreyタンパク質をプローブするオプションを提供します
非特異的結合の低減— ビオチン/ストレプトアビジン-HRPシステムは、ベイトタンパク質に対する抗体と比較して非特異的結合が少ないことを示しています
タンパク質染色に適合 — ゲル内化学発光検出ステップ後の総タンパク質染色にゲルを使用でき、2つのゲルを泳動する必要がなくなります

このファーウェスタンブロッティングキットは、特定の結合パートナーとの相互作用によってターゲットタンパク質をプローブするために必要な試薬とプロトコルを提供します。このパートナーは、精製およびビオチン化された形態で提供されます。このキットは、ゲル電気泳動で分離した後にターゲット(prey)タンパク質を結合できるタンパク質間相互作用の分析に役立ちます。このキットには、ブロットまたはミニゲルから直接プローブおよび化学発光検出するための試薬と手順が含まれています。

内容:
• ストレプトアビジン-HRPコンジュゲート、希釈および洗浄バッファー、化学発光基質溶液、ミニゲル用セロファンシート

アプリケーション:
• タンパク質相互作用の発見— 精製したビオチン化タンパク質との親和性を有する細胞ライセート中のタンパク質の探索とスクリーニングを行います
• タンパク質相互作用の確認 — 特定のビオチン化タンパク質や特定の試料に関連するネイティブまたはオフターゲット結合相互作用の存在の特徴付けおよび特定を行います

ファーウエスタンブロッティングでは、最初に一次抗体ではなく推定相互作用タンパク質を使用してターゲットをプロービングします。この手法はファーウェスタンブロッティングと呼ばれます。これは、ターゲットタンパク質ではなく一次相互作用プローブを検出するために一次抗体が二次的に使用されるためです。ビオチン化タンパク質用Pierceファーウェスタンブロッティングキットは、抗体の使用を完全に排除します。一次プローブ(すなわち、研究者から提供されたビオチン化ベイトタンパク質)は、ストレプトアビジン-HRP コンジュゲートで二次的に検出され、その活性は非常に高感度な化学発光基質を用いた反応によって可視化されます。
研究用途にのみご使用ください。診断目的には使用できません。
仕様
反応性全生物種
対応可能対象10 Mini Gels
検出法化学発光
製品ラインPierce
製品タイプWestern Blot Kit
数量220 mL
Substrateストレプトアビジン-HRP
Unit SizeEach
組成および保存条件
対応範囲:ビオチン化タンパク質プローブを用いたミニゲルまたはブロッティングの実験10回
• ストレプトアビジン-HRPコンジュゲート、0.1 mg
• 希釈バッファー(10倍)、50 mL
• PBSパック(それぞれから500 mL作成)、17パック
• ルミノールエンハンサー、55 mL
• 安定した過酸化物バッファー、55 mL
• Surfact-Amps 20界面活性剤溶液、6×10 mL
• あらかじめカットされたセロファンシート10シート

キットは4℃で保存。

よくあるご質問(FAQ)

If my protein is endogenously expressed, which Thermo Scientific Protein:Protein Interaction (PPI) kit should I choose?

We recommend the biotin kit for endogenously expressed proteins. The reason for this is the wide variety of biotinylation reagents that can be used to label the detection protein of the binding pair. For help choosing a biotinylation reagent, refer to the Biotinylation Selection Guide available at our website.

Find additional tips, troubleshooting help, and resources within our Protein Assays and Analysis Support Center.

How is the tagged protein detected on the membrane using the Thermo Scientific Protein:Protein Interaction (PPI) kits?

The biotin kit utilizes streptavidin-HRP to detect the biotinylated protein bound to the prey protein on the membrane. The GST kit utilizes a polyclonal goat anti-GST antibody for detection of the glutathione-S-transferase tagged fusion protein bound to another protein on a membrane.

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How many reactions can be performed using one Thermo Scientific Protein:Protein Interaction (PPI) kit?

The Thermo Scientific Pull-Down Protein:Protein Interaction Kits contain a complete, validated set of reagents specifically developed for performing pull-down assays.The kits contain sufficient materials for conducting 25 pull-down assays.

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Are all of the conditions for binding the prey protein to the bait protein described in the Thermo Scientific Protein:Protein Interaction (PPI) kits?

No. Every protein pair will require unique conditions in order to bind with one another. Factors to consider are pH, ionic strength of the buffer, need for cofactors, whether the interaction is long term or transient, etc. The researcher is recommended to perform a literature search or try several different conditions in order to determine what conditions are best for the binding of their proteins of interest. The kit includes a “universal“ wash buffer formed by diluting the lysis buffer 1:1 in TBS.

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With the Thermo Scientific Protein:Protein Interaction (PPI) kits, what methods can be used to detect the prey protein?

The prey protein can be detected following transfer on a membrane. The membrane procedures uses 1:100,000 - 1:500,000 dilution of the anti-GST antibody.

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