PEG4-SPDP (PEGylated, long-chain SPDP crosslinker)

Thermo Scientific Pierce PEG4-SPDPは、4ユニットのポリエチレングリコール（PEG）基と還元性（切断可能）ジスルフィド結合を含むアミン-アミン間またはアミン-スルフヒドリル間架橋を介したタンパク質接合用の多機能クロスリンカーです。

PEG4-SPDPの特長：

•効率的なアミン接合—NHS Esterは、リジン、ペプチドのN末端、および他の第一級アミンへの効果的な接合を実現します
• 可逆的スルフヒドリル接合—ピリジルジチオ基は、還元システインや他のスルフヒドリル基とのジスルフィド結合を可能にし、安定した切断可能な結合を提供します
• ポリエチレングリコール—PEG基は、柔軟性が高く、免疫原性がなく疎水性であり、多くの場合、結合分子の溶解性が向上します
• スペーサーアーム—第一級アミンとスルフヒドリル基を最大25.7オングストロームの距離で接続します（PEG12-SPDPでは54.1オングストローム）。

SPDP試薬は、一方の末端にアミン反応性N-ヒドロキシスクシンイミド（NHS）Esterを、もう一方の端にスルフヒドリル反応性2-ピリジルジチオ基を有しています。PEG4-SPDPは、4ユニットのポリエチレングリコールスペーサーアームを備えており、炭化水素スペーサーのみを持つクロスリンカーと比べて、クロスリンカーや結合タンパク質への溶解性が高くなります。ピリジルジチオール試薬はジスルフィド含有の結合を生成し、ジチオトリトール（DTT）などの還元剤で切断できます。SPDP試薬による架橋実験は、タンパク質を含む実験に限定されません。第一級アミンおよびスルフヒドリル基を持つさまざまな分子は、SPDP試薬を使用して修飾または架橋できます。

NHS Esterを介した第一級アミンとのSPDP試薬の接合反応は、リン酸塩、炭酸塩／重炭酸塩またはホウ酸塩緩衝液でホスファチジルpH 7～8で行われることが最も一般的です。第一級アミン（またはチオールまたはジスルフィド還元試薬）を含まない他の緩衝液（スルフヒドリル反応性の説明を参照）も有効です。

スルフヒドリル反応性ピリジルジチオ基との反応は、アミン反応を伴う（同時に）か、または反応後に行うことができ、pH 7～8で最適に起こります。反応によりピリジン-2-チオン置換が生じ、その濃度は343 nmで吸光度を測定することで測定できます。2-ピリジルジチオの消光または還元が必要になるまで、反応緩衝液にチオールおよびジスルフィド還元剤が含まれていないことが必要です。

製品リファレンス：
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