IPTG

Thermo Scientific Pierce IPTGは、イソプロピル-β-D-チオガラクトピラノシドであり、X-Galなどのβ-ガラクトシダーゼ基質とともに使用して、レポーター遺伝子を含むベクター、プラスミド、またはDNAフラグメントの発現を検出します。

試薬X-Gal（5-ブロモ-4-クロロ-3-インドリル-β-D-ガラクトピラノシド）は、β-ガラクトシダーゼの発色基質であり、青色の沈殿物を生成し、DMFに可溶で、ベクター、プラスミド、またはβ-ガラクトシダーゼ遺伝子を含むDNAフラグメントの検出に使用できます。

IPTG（イソプロピル-β-D-チオガラクトピラノシド）を使用して、発現ベクターでの遺伝子の発現を最大化することができます。ラムダバクテリオファージライブラリを抗体でスクリーニングする場合、プラークが十分に確立されるまで融合タンパク質の発現を防止することで、成功率を高めることができます。誘導物質IPTGを含むニトロセルロースフィルターをプレート上に置き、37℃で増殖を続けることにより、3-4時間のプラーク増殖後に潜在的なβ-ガラクトシダーゼ-cDNA融合タンパク質の発現を誘発することができます。その後、ニトロセルロースフィルターを抗体でスクリーニングします。IPTGは、X-Galと組み合わせて活性β-ガラクトシダーゼを検出するためにも使用され、バクテリオファージM13およびIgt11ベクターを使用するアプリケーションで役立ちます。

IPTGの特徴：

•X-Galは、β-ガラクトシダーゼ発現を検出するための強い青色の沈殿物を生成します
•IPTGと組み合わせることで、β-ガラクトシダーゼの検出を選択的に最大化できます