TaqMan™ Cells-to-CT™ Control Kit
TaqMan&trade; Cells-to-C<sub>T</sub>&trade; Control Kit
Invitrogen™

TaqMan™ Cells-to-CT™ Control Kit

Green features
Ambion™ TaqMan™ Cells-to-CTコントロールキットは、TaqMan™遺伝子発現Cells-to-CTキットとともに使用するように設計されています。コントロールキットには、現在アノテーションされている生物学的配列との相同性がない独自の配列を持つ合成RNAの転写産物であるXenoRNA™コントロールが含まれており、あらゆる実験に最適なコントロールになります。コントロールキットには、TaqMan™遺伝子発現アッセイXenoRNA™コントロールターゲット用、およびTaqMan™遺伝子発現アッセイ高発現内在コントロール遺伝子β-アクチン用も含まれています詳細を見る
製品番号(カタログ番号)数量
4386995100 reactions
製品番号(カタログ番号) 4386995
価格(JPY)
99,800
Each
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数量:
100 reactions
Ambion™ TaqMan™ Cells-to-CTコントロールキットは、TaqMan™遺伝子発現Cells-to-CTキットとともに使用するように設計されています。コントロールキットには、現在アノテーションされている生物学的配列との相同性がない独自の配列を持つ合成RNAの転写産物であるXenoRNA™コントロールが含まれており、あらゆる実験に最適なコントロールになります。コントロールキットには、TaqMan™遺伝子発現アッセイXenoRNA™コントロールターゲット用、およびTaqMan™遺伝子発現アッセイ高発現内在コントロール遺伝子β-アクチン用も含まれています。

Ambion™ TaqMan™ Cells-to-CTコントロールキットの特長:
• 十分な細胞インプットであることを確認します
• RTまたはリアルタイムPCR阻害剤の有無をモニタリングします
• サンプル標準化用のコントロール

阻害をモニターし、十分な細胞インプットを確認します
TaqMan™ Cells-to-CT™コントロールキットは、Cells-to-CT反応における阻害と細胞インプットを評価するために使用されます。たとえば、XenoRNA™コントロールは、サンプルがRT-PCRに対応することを確認でき、反応阻害剤のインジケーターになります。細胞溶解手順の最後のステップで、XenoRNA™コントロールを停止液に加えることで、各サンプルに一定量のコントロールターゲットが備わり、その後XenoRNA™ TaqMan™遺伝子発現アッセイによって増幅されます。

β-アクチン遺伝子発現アッセイによる増幅は、標準化の内在コントロールとして機能し、溶解反応に十分な数の細胞が含まれることを保証します—これは、約100個未満の細胞を用いる実験に重要で、細胞溶解の有効性をモニターします。

新しい細胞株との適合性を評価します
TaqMan™ Cells-to-CT™コントロールキットは、検証されていない細胞株とTaqMan™遺伝子発現Cells-to-CTキットとの適合性を評価し、溶解反応ごとに使用できる細胞の最大数を決定するのに最適です。
研究用にのみ使用できます。診断用には使用いただけません。
仕様
コントロールテンプレートXenoRNA™ control (synthetic RNA transcript)
フォーマットチューブ
遺伝子記号ACTB
グリーン機能使用するリソースが少ないことから廃棄物が少なく、危険性も低減
内部プローブの変更MGB(マイナーグルーブバインダー)(3')、非蛍光クエンチャー(3')、FAM(5')
反応数反応100回分
製品ラインAmbion、Cells-to-CT、TaqMan
製品タイプCells-to-Cコントロールキット
数量100 reactions
出荷条件ドライアイス
対応可能対象100反応
ターゲットXenoRNA™ control, β-actin
検出法蛍光
使用対象(アプリケーション)遺伝子発現解析
GC-Rich PCR Performance
標識または色素FAM
PCR法qPCR、RT-PCR
Unit SizeEach
組成および保存条件
Xeno™ RNAコントロール、20X Xeno™ RNAコントロールTaqMan™遺伝子発現アッセイ、および20X ACTB(β-アクチン)TaqMan™遺伝子発現アッセイはすべて-20℃で保存します。すべての試薬は、適切な保管条件であれば、6カ月間安定していることが保証されています。

よくあるご質問(FAQ)

I'm seeing PCR products in the minus-RT control after performing my Cells-to-CT experiment. What does this mean?

If PCR products are seen in the minus-RT control reaction, but not in the no-template control, it indicates that genomic DNA remains in the sample and that genomic DNA was amplified in real-time PCR. Please follow the suggestions below:

- Ensure the DNase I is mixed thoroughly into the Lysis Solution.
- Use fewer cells per lysis reaction.
- Lyse cells using Lysis Solution that is at room temperature, and make sure that the lysis reaction occurs at room temperature.
You can also try increasing the incubation time of the lysis reaction to 8 minutes and/or using Lysis Solution that has been warmed up to 25 degrees C for cell lysis.

I'm getting PCR products in the no-template PCR control when performing a Cells-to-CT experiment. What could cause this?

PCR products in the no-template PCR control indicate that the sample is contaminated with DNA. More stringent steps need to be taken to control contamination.

I'm getting no PCR product or unexpected PCR products after performing a Cells-to-CT experiment. What could be the cause of this?

Please review the following possibilities and suggestions:

- A problem with adding or mixing the Stop Solution: ensure that the Stop Solution was added directly to the lysate, as components of the Lysis Solution may inhibit RT-PCR if not fully inactivated.
- The RNA was degraded: keep cells in PBS on ice before starting the cell lysis procedure.
- RNase in the sample was not completely inactivated: Too many cells could have been used or too much PBS left on the cells, diluting the lysis solution.
- The lysates sat too long before going to room temperature: Do not allow lysates to sit longer than 20 minutes at room temperature once the Stop Solution has been added.
- The sample does not contain the target RNA: Verify that the procedure is working by using the XenoRNA Control in the sample. Also check that your PCR primers can amplify your target under the PCR conditions you are using.

I ran out of stop solution for my Cells-to-CT experiment. Can I purchase it separately?

Yes, it is available in 1 mL aliquots (Cat. No. 4402960).

I have genomic DNA contamination in my Cells-to-CT reaction. How do I get rid of it?

1. Ensure that all medium is removed from the wells.
2. Wash with an equal volume of room temperature 1X PBS after the medium is removed.
3. Ensure that the reaction happens at room temperature (the lysis reaction may not reach room temperature if the plate is on ice, if the plate was quickly moved to the bench, or if a cold lysis solution was added).
4. Warm lysis solution to room temperature before adding to cells.
5. Allow the lysis reaction to proceed for 8 minutes at 25 degrees C.