AmpliTaq Gold™ 360 DNA Polymerase

Applied Biosystems™ AmpliTaq Gold™ 360 DNAポリメラーゼは、改良されたAmpliTaq Gold 360バッファーおよびオプションの360 GCエンハンサーと併用することで、幅広いDNA配列コンテキストを増幅します。AmpliTaq Gold™ 360 DNAポリメラーゼは、幅広いターゲットに対してカバー範囲が360°。
*最も広域のターゲットに最適化—日常的なものから困難なものまで
* 卓越した感度、特異性、および収量
* 市場をリードする360 GCエンハンサーによるGCリッチ配列の確実な増幅
* 最高品質のシーケンシングデータを達成

簡単な、および困難なターゲットに最適化
困難なターゲットとしては、ATリッチ、GCリッチ、プライマー二量体形成アンプリコン、ホモポリマーの繰り返し、シーケンシングの諸課題を提起するアンプリコンが含まれます。これまでは、アンプリコンには特殊な酵素や反応条件が必要でしたが、標準化された条件下で、単一の試薬を使用して再現性の高い増幅ができるようになりました（図1）。アンプリコンの競合ベンチマークの数は40を超え、AmpliTaq Gold™ 360が最高の性能を持つ酵素であることが明らかになっています。日常的なターゲットと難易度の高いターゲットの増幅の両方とも、成功確率が最大となっています（表1）。
図1に示すように、GCリッチな領域は、他社のDNAポリメラーゼとオリジナルのAmpliTaq Goldでは特に増幅が不十分である一方、AmpliTaq Gold 360では確実に増幅させることができます。

AmpliTaq Gold 360 DNAポリメラーゼはホットスタートPCR
用に最適化されており、AmpliTaq Gold DNAポリメラーゼと同じホットスタート特異性が得られます。AmpliTaq Gold DNAポリメラーゼを活性化するには、高温インキュベーション処理が必要です。このステップにより、DNAが完全に変性した温度とプライマーがアニールされていない温度でのみ、活性酵素が生成されます。
ポリメラーゼを室温で反応混合物に添加すると、酵素が不活性化するため、プライマーの伸長は起こりません。緊急性の低いミスプライミング事象が発生した場合、酵素としては伸長されず、増幅されません。そのため、PCRのセットアップは室温で行うことができますが、ミスプライミングのある部位での伸長について考慮する必要はありません。AmpliTaq Gold 360 DNAポリメラーゼの量は、サイクル数ごとに少しずつ増加し、プライマー二量体などの非特異的な産物を蓄積することなく特異的な生成物の収量が増加します。図1は幅広いターゲットに対する優れた特異性を示しています。これを図2にまとめています。特異性がきわめて高いため、多重化とアレル識別を簡単に行えます。
反応におけるAmpliTaq Gold 360 DNAポリメラーゼの量は、各サイクル数で少しずつ増加し、特異的な生成物の収量はプライマーダイマーなどの非特異的な産物を蓄積することなく増加します。図1は広範なターゲットに対する優れた特異性を示しており、図2A&Bに要約されています。高度な特異性により、多重化とアレル識別が容易になります。

優れた感度と増幅長さ
AmpliTaq Gold™ 360 DNAポリメラーゼは、オリジナルのAmpliTaq Gold™ DNAポリメラーゼと比較した場合に、酵素調製時の汚染に由来する細菌DNA配列を除去するための、追加の特許取得済み分離プロセスにより精製度が高くなっています。この超高純度酵素は、増強された360 Goldバッファーとともに使用したとき、ホットスタート機能に加えて、偽陽性結果を低減させ、低レベルのターゲット配列を増幅し、雑菌からヒトのゲノムまでさまざまなテンプレートの増幅を促進します。
AmpliTaq Gold 360 DNAポリメラーゼは、複雑なDNAが高濃度で存在する場合でも、低コピー数（図 3）で存在するターゲットを効率的に増幅するため、特に低コピー病原体の検出や、分解されたDNAサンプルからのターゲットの増幅に適しています。酵素の純度がきわめて高いため、卓越した感度が得られます。AmpliTaq Gold 360 DNAポリメラーゼは、長い（最大5 Kb）シーケンスに対して効率的かつ再現性の高い増幅を実現。図4は、長鎖のヒトおよびプラスミドDNAの堅牢なPCR増幅を示しています。


注：
限定的なラベルライセンスおよび商標情報については、ユーザーマニュアルまたはパッケージの添付文書を参照してください。
研究用途にのみ使用できます。診断には使用できません。