Fast SYBR™ Green Cells-to-CT™ Kit
Fast SYBR&trade; Green Cells-to-C<sub>T</sub>&trade; Kit
Invitrogen™

Fast SYBR™ Green Cells-to-CT™ Kit

Green features
Ambion™ Fast SYBR™ Green Cells-to-CT™キットは、培養細胞から直接、リアルタイムPCRの結果まで得ることができる、迅速簡便で堅牢な方法です。この画期的な細胞溶解法とRNA安定化テクノロジーにより、面倒で時間がかかるRNA浄化プロセスは不要になります詳細を見る
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製品番号（カタログ番号）反応数
4402957400 reactions
4402956100 reactions
製品番号（カタログ番号） 4402957
価格（JPY）
665,600
Each
お問い合わせください ›
反応数:
400 reactions
Ambion™ Fast SYBR™ Green Cells-to-CT™キットは、培養細胞から直接、リアルタイムPCRの結果まで得ることができる、迅速簡便で堅牢な方法です。この画期的な細胞溶解法とRNA安定化テクノロジーにより、面倒で時間がかかるRNA浄化プロセスは不要になります。本キットには400回の反応分の試薬が含まれています。Fast SYBR™ Green Cells-to-CT™キットにはAmpliTaq™ Fast DNAポリメラーゼが含まれており、これにより即時のホットスタートが可能になり、高速リアルタイムPCRにより非特異的な産物の形成を最小限に抑えます。

•箱から出してすぐに使用可能なように最適化された試薬が含まれています
• シンプルで効果的なCells-to-CT™テクノロジーにより、DNase処理を含めて、室温でわずか7分でサンプルの準備が可能です
• 検証された精度、優れた再現性、および1つのサンプルあたり10～100,000個の細胞の最大感度。浄化されたRNAと同等の結果

優れた価値
このキットには、逆転写試薬やSYBR™ Greenを使用した高性能PCRマスターミックスなど、最適化された完全な遺伝子発現ワークフローに統合されたサンプル準備用試薬が含まれています。

非常に簡単
このプロトコルはシンプルな7分間のサンプルの準備手順から始まります。細胞をPBSで洗浄後、室温で5分間溶解します。同時にDNase処理も可能です。溶解反応が停止し、サンプルを–20℃で最大5ヶ月間逆転写または保存する準備ができます。サンプルは培養プレート（96または384ウェル）上で直接処理できるため、サンプル操作回数やサンプルロスあるいは移し替えによるエラの可能性が最小限に抑えられ、再現性が向上します。サンプルの準備後、細胞ライセートの一部をRT反応に加え、付属のマスターミックスを使用してリアルタイムPCRを行います。

卓越した性能
キットの性能を実証するために、従来のRNA浄化とリアルタイムPCR分析、またはFastSYBR™ Green Cells-to-CT™キットのいずれかを使用して、複製実験を実施しました。このキットは、10～100,000個の細胞の分析に浄化RNAを使用して得られる結果と同等の性能を示します。さらに、感度、効率、ダイナミックレンジが他社のライセートキットよりも優れていることが示されています。このキットで調製したサンプルは、Applied Biosystems™、Roche、Bio-RadなどのさまざまなリアルタイムPCRプラットフォームでの互換性が検証されています。

アクセサリ製品：
SYBR™ Green Cells-to-CT™コントロールキット（SKU：4402959）にはXeno™ RNAコントロールおよびプライマーセットが含まれており、Cells-to-CT™反応における細胞溶解および増幅阻害の効率をモニタリングするために推奨されます。
研究用にのみ使用できます。診断用には使用いただけません。
仕様
使用対象 (装置)7500高速システム、7900HT高速システム、StepOne™、高速モード、StepOnePlus™、高速モード
グリーン機能使用するリソースが少ないことから廃棄物が少なく、危険性も低減
ホットスタート内蔵ホットスタート
反応数400 reactions
受動的参照色素ROX（プレミックス）
ポリメラーゼAmpliTaq Fast DNA Polymerase
製品ラインCells-to-CT、SYBR
精製時間5 min.
純度または品質グレード高（超高純度）
数量400 reactions
逆転写酵素M-MLV
サンプルタイプCells
出荷条件ドライアイス
濃度20X
検出法SYBR
使用対象（アプリケーション）RT-PCR
標識または色素SYBR Green
反応速度高速
Unit SizeEach
組成および保存条件
停止液、DNase I、20X RT酵素ミックスは-20℃で保存してください。溶解液、2X SYBR™ RTバッファー、Fast SYBR™グリーンPCRマスターミックスは4℃で保管してください。ヌクレアーゼフリー水は室温で保管してください。

よくあるご質問（FAQ）

I'm seeing PCR products in the minus-RT control after performing my Cells-to-CT experiment. What does this mean?

If PCR products are seen in the minus-RT control reaction, but not in the no-template control, it indicates that genomic DNA remains in the sample and that genomic DNA was amplified in real-time PCR. Please follow the suggestions below:

- Ensure the DNase I is mixed thoroughly into the Lysis Solution.
- Use fewer cells per lysis reaction.
- Lyse cells using Lysis Solution that is at room temperature, and make sure that the lysis reaction occurs at room temperature.
You can also try increasing the incubation time of the lysis reaction to 8 minutes and/or using Lysis Solution that has been warmed up to 25 degrees C for cell lysis.

I'm getting PCR products in the no-template PCR control when performing a Cells-to-CT experiment. What could cause this?

PCR products in the no-template PCR control indicate that the sample is contaminated with DNA. More stringent steps need to be taken to control contamination.

I'm getting no PCR product or unexpected PCR products after performing a Cells-to-CT experiment. What could be the cause of this?

Please review the following possibilities and suggestions:

- A problem with adding or mixing the Stop Solution: ensure that the Stop Solution was added directly to the lysate, as components of the Lysis Solution may inhibit RT-PCR if not fully inactivated.
- The RNA was degraded: keep cells in PBS on ice before starting the cell lysis procedure.
- RNase in the sample was not completely inactivated: Too many cells could have been used or too much PBS left on the cells, diluting the lysis solution.
- The lysates sat too long before going to room temperature: Do not allow lysates to sit longer than 20 minutes at room temperature once the Stop Solution has been added.
- The sample does not contain the target RNA: Verify that the procedure is working by using the XenoRNA Control in the sample. Also check that your PCR primers can amplify your target under the PCR conditions you are using.

I ran out of stop solution for my Cells-to-CT experiment. Can I purchase it separately?

Yes, it is available in 1 mL aliquots (Cat. No. 4402960).

I have genomic DNA contamination in my Cells-to-CT reaction. How do I get rid of it?

1. Ensure that all medium is removed from the wells.
2. Wash with an equal volume of room temperature 1X PBS after the medium is removed.
3. Ensure that the reaction happens at room temperature (the lysis reaction may not reach room temperature if the plate is on ice, if the plate was quickly moved to the bench, or if a cold lysis solution was added).
4. Warm lysis solution to room temperature before adding to cells.
5. Allow the lysis reaction to proceed for 8 minutes at 25 degrees C.

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