SYBR™ Green Cells-to-CT™ Control Kit
SYBR&trade; Green Cells-to-C<sub>T</sub>&trade; Control Kit
Invitrogen™

SYBR™ Green Cells-to-CT™ Control Kit

Green features
このキットは、Power SYBR™ Green(SKU番号4402953、4402954、および4402955)および Fast SYBR™詳細を見る
製品番号(カタログ番号)数量
4402959100 Reactions
製品番号(カタログ番号) 4402959
価格(JPY)
53,400
Each
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数量:
100 Reactions
このキットは、Power SYBR™ Green(SKU番号4402953、4402954、および4402955)および Fast SYBR™ Green Cells-to-CT™キット(SKU番号4402956および4402957)で使用するように設計されています。100回の反応に十分な量の試薬が提供されています。Xeno™ RNAコントロール、現在のアノテーション付き生物学的配列への相同性のない独自の配列がある合成RNA転写産物、およびXeno™ RNAコントロールターゲット用のPCRプライマーセットが含まれます。また、発現量の多い内在性コントロール遺伝子β-アクチン(ACTB)用のPCRプライマーセットも含まれます。これらの試薬は、逆転写およびSYBR™ GreenベースのリアルタイムPCRのポジティブコントロールを実現し、逆転写またはPCR阻害剤の存在を示すことができます。SYBR™ ACTBプライマーを用いたリアルタイムRT-PCRは、サンプルの標準化のための内在性コントロールを実現するだけでなく、1回の溶解につき100を超える細胞で構成されるサンプルを用いた実験で十分な細胞インプットを確認することもできます。
研究用にのみ使用できます。診断用には使用いただけません。
仕様
コントロールテンプレートXenoRNA™ control (synthetic RNA transcript)
フォーマットチューブ
遺伝子記号ACTB
グリーン機能使用するリソースが少ないことから廃棄物が少なく、危険性も低減
反応数反応100回分
製品ラインCells-to-CT、SYBR
数量100 Reactions
出荷条件ドライアイス
ターゲットXenoRNA™ control, β-actin
標識または色素Unconjugated
Unit SizeEach
組成および保存条件
成分:

100 µLのXeno™ RNAコントロール、10^5コピー/µL

250 µLのSYBR Xenoプライマー

250 µLの20倍のSYBR ACTBプライマー



量:

Xeno RNAコントロール :約100回分の溶解反応、SYBR XenoおよびSYBR ACTBプライマー:それぞれ最大250回分のPCR(20 µL)




保存条件:−20℃にて保存してください。霜取り不要フリーザーには保管しないでください。

よくあるご質問(FAQ)

I'm seeing PCR products in the minus-RT control after performing my Cells-to-CT experiment. What does this mean?

If PCR products are seen in the minus-RT control reaction, but not in the no-template control, it indicates that genomic DNA remains in the sample and that genomic DNA was amplified in real-time PCR. Please follow the suggestions below:

- Ensure the DNase I is mixed thoroughly into the Lysis Solution.
- Use fewer cells per lysis reaction.
- Lyse cells using Lysis Solution that is at room temperature, and make sure that the lysis reaction occurs at room temperature.
You can also try increasing the incubation time of the lysis reaction to 8 minutes and/or using Lysis Solution that has been warmed up to 25 degrees C for cell lysis.

I'm getting PCR products in the no-template PCR control when performing a Cells-to-CT experiment. What could cause this?

PCR products in the no-template PCR control indicate that the sample is contaminated with DNA. More stringent steps need to be taken to control contamination.

I'm getting no PCR product or unexpected PCR products after performing a Cells-to-CT experiment. What could be the cause of this?

Please review the following possibilities and suggestions:

- A problem with adding or mixing the Stop Solution: ensure that the Stop Solution was added directly to the lysate, as components of the Lysis Solution may inhibit RT-PCR if not fully inactivated.
- The RNA was degraded: keep cells in PBS on ice before starting the cell lysis procedure.
- RNase in the sample was not completely inactivated: Too many cells could have been used or too much PBS left on the cells, diluting the lysis solution.
- The lysates sat too long before going to room temperature: Do not allow lysates to sit longer than 20 minutes at room temperature once the Stop Solution has been added.
- The sample does not contain the target RNA: Verify that the procedure is working by using the XenoRNA Control in the sample. Also check that your PCR primers can amplify your target under the PCR conditions you are using.

I ran out of stop solution for my Cells-to-CT experiment. Can I purchase it separately?

Yes, it is available in 1 mL aliquots (Cat. No. 4402960).

I have genomic DNA contamination in my Cells-to-CT reaction. How do I get rid of it?

1. Ensure that all medium is removed from the wells.
2. Wash with an equal volume of room temperature 1X PBS after the medium is removed.
3. Ensure that the reaction happens at room temperature (the lysis reaction may not reach room temperature if the plate is on ice, if the plate was quickly moved to the bench, or if a cold lysis solution was added).
4. Warm lysis solution to room temperature before adding to cells.
5. Allow the lysis reaction to proceed for 8 minutes at 25 degrees C.