Thermo Scientific Pierce Protein Aアガロースは、さまざまな抗体アフィニティー精製で使用される、標準的な結合能を持つProtein Aアガロースレジンです。このProtein A IgG精製キットには、5本のProtein Aカラム（各1 mL）、Protein A IgG結合バッファー、IgG溶出バッファー、脱塩カラムが含まれています。

Protein Aアガロースの特長：

•天然型Protein A – 固定化Protein Aは、ヒト、ウサギ、ブタ、イヌ、またはネコ血清からのポリクローナルIgG精製に最適
• アガロースレジン – 担体は、タンパク質アフィニティー精製法で最も一般的なレジンである架橋型6%アガロースビーズ（CL-6B）
• 不活性かつ安定 – 優れた製造方法で、電荷を持たない耐浸出性のある共有結合によりProtein Aを固定化するため、非特異的結合が少なく、収率を低下させることなく複数の用途に使用可能
• 標準的な結合能 – Pierce Protein Aアガロースは固定化Protein Aの負荷が標準的で、ヒトIgGではレジン1 mLあたり12～19 mg（マウスIgGではレジン1 mLあたり約6～8 mg）の結合能を提供

Pierce Protein Aアガロースは、6%架橋型アガロースビーズに共有結合的に固定化されている精製済み天然型Protein Aで構成されています。このアガロースビーズは、さまざまなバッチタイプやカラムタイプのアフィニティ精製手順に使用できる物理特性と化学特性を有しています。

Protein Aは、黄色ブドウ球菌のいくつかの菌株が産生する細胞壁成分です。この分子量46.7 kDaのタンパク質は、基本的に糖鎖を含まない一本鎖ポリペプチドで構成されています。天然タンパク質Aには、特定の哺乳類種に由来するIgGクラス抗体のFc領域と高い親和性（Ka = 10^8／モル）で相互作用する4つの結合部位があります。IgG結合能はpH 8.2で最適になりますが、中性の生理的バッファー（pH 7.0～7.6）中でも効率的に結合します。

Protein Aは、抗体（特にIgGクラスの抗体）のFc部分に高い親和性で特異的に結合する、細菌由来のタンパク質です。Protein A は、Protein G と比べ、ラビット、ブタ、イヌ、およびネコ IgG に対して、高い結合能を示します。タンパク質AはヒトIgGに対しても高い結合能を示しますが、IgG3に対しては結合が弱まります。Protein AのマウスIgG1への結合性が弱いため、その抗体アイソタイプを用いるほとんどのアプリケーションには推奨されません。

Pierce Protein A Agaroseは、Thermo Scientific AminoLink Coupling Chemistryを使用して調製しており、従来のリガンド固定化法と比べていくつかの利点があります。AminoLink固定化では、アガロースビーズの糖モノマーとProtein Aの天然リジン残基の間で、シンプルなアミド結合によって結合が形成されます。典型的な臭化シアン (CNBr) による固定化とは異なり、AminoLink では、非特異的結合の原因となり得る新規官能基が導入されず、安定で不可逆な結合が形成されます。その結果、抗体精製を複数回繰り返しても機能性固定化Protein Aを保持している結合能の高いレジンになります。

架橋型6%アガロースビーズ（CL-6B）の特性：
• pH安定性の維持：2～14（短期）；3～13（長期）
•平均粒子径：45～165ミクロン
• 排除限界分子量：10,000～4,000,000 Da
• 最大流量：約1 mL／分（直径1 cmのカラムにおいて）
• 最大直線速度：30 cm／時
• 最大圧力：25 psi（1.5 bar）未満、「レジンが耐えられるカラム全体の圧力低下の最大値」と定義される（注：液体クロマトグラフィー装置に表示されたゲージ圧力は、カラム全体の圧力低下ではなく、システム全体の圧力の測定値である場合があります。）

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