Pierce™ Fab Preparation Kit
Pierce™ Fab Preparation Kit
Thermo Scientific™

Pierce™ Fab Preparation Kit

Thermo Scientific Pierce Fab調製キットは、固定化パパインプロテアーゼを使用してヒトまたはマウスIgG抗体を消化し、FabフラグメントとFcフラグメントを作製します。その後、Protein Aアガロースを使用してFabを精製します。Fab調製キットの特長:•高い処理能力詳細を見る
製品番号(カタログ番号)数量
4498510 Antibody Samples, each containing 0.25 to 4 mg IgG kit
製品番号(カタログ番号) 44985
価格(JPY)
173,800
Each
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数量:
10 Antibody Samples, each containing 0.25 to 4 mg IgG kit
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Thermo Scientific Pierce Fab調製キットは、固定化パパインプロテアーゼを使用してヒトまたはマウスIgG抗体を消化し、FabフラグメントとFcフラグメントを作製します。その後、Protein Aアガロースを使用してFabを精製します。

Fab調製キットの特長:

高い処理能力 — 標準サイズのキットは0.25~4 mgのIgGのフラグメント化に使用
酵素の持ち込みのない消化産物 — 固定化パパイン(アガロースビーズレジン)によって消化反応を制御し、タンパク質分解酵素を除去して抗体フラグメントを最大限に回収
ヒトやその他の種のIgGに適している — 本キットのプロトコルはヒト、マウス、ウサギのIgG用に最適化されています。パパインベースの消化は他の種やIgGサブクラス(ヤギやブタなど)にも有効ですが、精製ステップにおいて抗体がProtein Aに効果的に結合する必要があります(注:マウスIgG1で最良の結果を得るには、部品番号44980を使用してください)。
すぐに使用可能なFabを提供 — 消化反応と精製されたFabフラグメントの最終的な回収は中性pHのリン酸ナトリウムバッファー中で行われ、そのまま保管することも、一般的なアプリケーションですぐに使用することも可能
包括的 — キットには、抗体フラグメントの調製と精製に必要なすべての試薬が含まれる
迅速 — スピンフォーマットにより、サンプル処理時間を大幅に短縮
柔軟性が高い — 複数の種とIgGサブクラス、およびサンプルサイズと濃度に対応するプロトコルが含まれる
効率的 — 収率とサンプル純度が高い

これらのFab調製キットは、ヒト、ウサギ、マウス、その他の種やIgGサブクラスに適しています。パパインによる抗体消化反応は便利な使い捨てスピンカラム内で行われるため、固定化プロテアーゼを効率的に除去してIgGフラグメントを最大限に回収できます。また、Thermo Scientific NAb Protein Aスピンカラムとバッファーもキットに含まれており、作製されたフラグメントを効率的に精製できます。Protein AはFcフラグメントと未消化IgGに結合するので、純粋なFabフラグメントは素通り画分に回収されます。キットにはThermo Scientific Zeba脱塩スピンカラムも含まれており、IgGサンプルを希釈せずに迅速に調製できます。時間のかかる透析手順を行う必要はありません。

このキットは、パパイン酵素(非特異的なチオールエンドペプチターゼ)を使用してWhole IgGのヒンジ領域の真上を酵素的に切断し、抗体分子あたり2つのFabフラグメントと1つのFcフラグメントを作製します。パパインプロテアーゼはアガロースビーズレジンに固定化されているため、IgG溶液からこのレジンを除去することで消化反応を簡単に停止でき、酵素の夾雑のない消化産物が得られます。

関連製品
Pierce™ Fab Micro調製キット
Pierce™ F(ab')2調製キット
Pierce™マウスIgG1 FabおよびF(ab')2調製キット
研究用途にのみご使用ください。診断目的には使用できません。
仕様
概要Pierce Fab Preparation Kit
数量10 Antibody Samples, each containing 0.25 to 4 mg IgG kit
製品ラインPierce
Unit SizeEach
組成および保存条件
対応範囲:抗体サンプル10回分、1回あたり0.25~4 mgのIgG
• Pierceパパインアガロース、1.25 mL
• システイン-HCl、1 g
• Fab消化バッファー、120 mL
• NAb Protein A Plusスピンカラム、1 mL、1本
• PBSパック(500 mL分)、2パック
• IgG溶出バッファー、120 mL
• Zeba脱塩スピンカラム、7K MWCO、2 mL、10本
• スピンカラム、0.8 mL、10本
• 微量遠心機用チューブ、2 mL、30本

4~8℃で保管してください。

よくあるご質問(FAQ)

Can I reuse the immobilized digestion enzymes in the Thermo Scientific IgG Fragmentation kit?

No. For best results, use the immobilized enzyme once and discard after use.

Find additional tips, troubleshooting help, and resources within our Protein Assays and Analysis Support Center.

How long does IgG digestion take using the Thermo Scientific IgG Fragmentation kit?

The digestion time is a function of the IgG concentration and source. For rabbit, mouse and human IgG, optimized digestion times are given in the instructions for each kit. Digestion times listed in the product instructions result in 80-90% digestion, although efficiency varies depending on IgG preparation and source.

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In the Thermo Scientific IgG Fragmentation kit, when digesting an IgG that does not bind to Protein A, how do I purify the Fab and F(abÁ)2 fragments?

If the IgG is a species or subclass that does not bind to Protein A, researchers can immobilize an antibody specific for the desired fragment. For example, to purify digested rat IgG2a, use the Aminolink Plus Immobilization Kit (Cat. No. 44894) to immobilize goat anti-rat Fc antibody. Our Tech Tip #34 and other web resources list IgG binding properties of Protein A. (Because Protein G and Protein A/G bind Fab fragments, they are not effective for this application.)

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Can I purchase the immobilized enzymes (proteases) from the Thermo Scientific IgG Fragmentation kit separately?

Yes. The three immobilized enzymes are available in 5 mL package sizes as shown below:

• Immobilized Ficin, Cat. No. 44881
• Immobilized Papain, Cat. No. 20341
• Immobilized Pepsin, Cat. No. 20343

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How many Thermo Scientific IgG Fragmentation kits are available and which enzymes are included?

There are six Thermo Scientific IgG fragmentation kits:

• Fab Preparation Kit (Papain), Cat. No. 44985
• Fab Micro Preparation Kit (Papain), Cat. No. 44685
• F(abÁ)2 Preparation Kit (Pepsin), Cat. No. 44988
• F(abÁ)2 Micro Preparation Kit, (Pepsin), Cat. No. 44688
• Mouse IgG1 Fab and F(abÁ)2 Preparation Kit (Ficin), Cat. No. 44980
• Mouse IgG1 Fab and F(abÁ)2 Micro Preparation Kit (Ficin), Cat. No. 44680

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引用および参考文献 (4)

引用および参考文献
Abstract
A novel MARV glycoprotein-specific antibody with potentials of broad-spectrum neutralization to filovirus.
Authors:Zhang Y,Zhang M,Wu H,Wang X,Zheng H,Feng J,Wang J,Luo L,Xiao H,Qiao C,Li X,Zheng Y,Huang W,Wang Y,Wang Y,Shi Y,Feng J,Chen G
Journal:eLife
PubMed ID:38526940
Marburg virus (MARV) is one of the filovirus species that cause deadly hemorrhagic fever in humans, with mortality rates up to 90%. Neutralizing antibodies represent ideal candidates to prevent or treat virus disease. However, no antibody has been approved for MARV treatment to date. In this study, we identified a ... More
The structural basis of protective and nonprotective human monoclonal antibodies targeting the parainfluenza virus type 3 hemagglutinin-neuraminidase.
Authors:Miller RJ,Durie IA,Gingerich AD,Elbehairy MA,Branch AG,Davis RG,Abbadi N,Brindley MA,Mousa JJ
Journal:Nature communications
PubMed ID:39738006
Parainfluenza virus 3 (PIV3) infection poses a substantial risk to vulnerable groups including infants, the elderly, and immunocompromised individuals, and lacks effective treatments or vaccines. This study focuses on targeting the hemagglutinin-neuraminidase (HN) protein, a structural glycoprotein of PIV3 critical for viral infection and egress. With the objective of targeting ... More
Correction: Pre-existing antitherapeutic antibodies against the Fc region of the hu14.18K322A mAb are associated with outcome in patients with relapsed neuroblastoma.
Authors:
Journal:Journal for immunotherapy of cancer
PubMed ID:32581046
Biophysical characterization and structure of the Fab fragment from the NIST reference antibody, RM 8671.
Authors:Karageorgos I,Gallagher ES,Galvin C,Gallagher DT,Hudgens JW
Journal:Biologicals : journal of the International Association of Biological Standardization
PubMed ID:28965821
Monoclonal antibody pharmaceuticals are the fastest-growing class of therapeutics, with a wide range of clinical applications. To assure their safety, these protein drugs must demonstrate highly consistent purity and stability. Key to these objectives is higher order structure measurements validated by calibration to reference materials. We describe preparation, characterization, and ... More