TOPO™ TA Cloning™ Kit for Sequencing, without competent cells

シーケンシング用TOPO™ TAクローニング™キットは、Taqポリメラーゼ増幅PCR産物をシーケンシング用のプラスミドベクターに直接挿入する際に、非常に効率的な5分間のクローニング反応を提供します。各キットは、特別にデザインされたシーケンシングプライマー部位を含むpCR™4-TOPO™ TAベクターを使用しており、各反応からより多くのインサート配列とより少ないベクター配列を戻すことができます。また、お客様のニーズや予算に応じて、さまざまなコンピテントセル付きまたはコンピテントセルなしでご利用いただけます。これらのキットには、ご希望のPCRフラグメントを含む組み換えベクターのクローニングおよび選択に必要なツールが含まれています。

•より多くの配列を取得—標準のシーケンシングプライマーを使用すると、より多くのインサート配列を取得し、ベクター配列を減らすことができます
• 迅速で簡単—5分間のクローニング反応を含め、わずか3ステップでPCRからクローンへと移行します
• 効率的—正しいインサートにより最大95％のクローンが得られます
• 実証済み—20,000回以上の引用により10年以上にわたって信頼性の高い性能を実現しています

pCR™4-TOPO™ TAベクター—シーケンシング用に最適化されています
pCR™4-TOPO™ TAベクターは、最小化されたマルチクローニングサイトを持っているため、シーケンシングプライマーサイトとインサートサイトの間の距離が短くなります（わずか33 bp）。それで、シーケンシング反応ではベクター配列が少なくなりインサート配列が多くなります。PCR™4-TOPO™ TA ベクターには、4 種類の一般的なシーケンシングプライマー用の部位があります。M13フォワード、M13リバース、T7、T3の4つが含まれています。このキットには、それぞれのアリコートが含まれています。

pCR™4-TOPO™ TAクローンの選択と操作
pCR™4-TOPO™ TAベクターには、アンピシリンとカナマイシンの両方の耐性マーカーと、ポジティブセレクションおよび青／白スクリーニングのためのLacZα-ccdB遺伝子融合が含まれています。ベクターの最小化されたマルチクローニングサイトには、クローニングされたPCR産物の簡易的な切除のための隣接EcoRI部位と、シーケンシング前にネストされた欠失を生成するための独自のSse8387I部位がまだ含まれています。in vitro転写向けのT7およびT3プロモーターも用意されています。

簡略化されたTOPO™ベースのクローニング
TOPO™クローニング技術を使用すると、特定の配列を含むPCRプライマー、PCR後の手順、ベクターの調製、その他の時間のかかるDNA操作ステップは不要になります。提供されたトポイソメラーゼ荷電ベクターに直接PCR反応を加え、5分間インキュベートして大腸菌コンピテントセルを形質転換するだけです。

効率的なクローニング
目的のインサートを持つクローンを最大95%まで使用することで、少ないクローンをスクリーニングし、時間とコストを節約できます。このキットで使用されているpCR™4-TOPO™ TAベクターには、3´Aオーバーハングを含むTaq増幅PCR産物を効率的にライゲーションするための3´Tオーバーハングが付属しています。

最も広く使用されているクローニングキット
クローニングに関しては、TOPO™クローニング技術が10年以上にわたり何千人もの科学者にとって信頼できるパートナーとなっています。高速で使いやすく効率的なTOPO™クローニングは、さまざまなアプリケーションのために多くの異なるベクターに適用されています。

きっとオプション：シーケンシング用TOPO™ TA Cloning™キット
シーケンシング用TOPO™ TA Cloning™キットは、お客様のニーズに応じてさまざまな利点を提供するさまざまなコンピテントセルと共に購入できます：
• 一般的なクローニング：TOP10（カタログ番号K4575-J10、K4575-01、K4575-40）
• 高効率のクローニング：TOP10 Electrocomp™細胞（カタログ番号K4580-01、K4580-40）•一般クローニング、バクテリオファージT1耐性：DH5α-T1R（カタログ番号：K4595-01、K4595-40）
•迅速な増殖：Mach1™-T1R化学的コンピテント大腸菌（カタログ番号 K4530-20）
• お客様の細胞を提供します（カタログ番号 450071、450030）

当社は、クリーンでシーケンス対応の組み換えプラスミドの分離に使用するためのPureLink™ Quick Plasmid Miniprep Kit（カタログ番号 K4575-02）を含むキットのバージョンも提供しています。（前の文節に統合）