TOPO™ TA Cloning™ Kit for Subcloning, without competent cells

TOPO™ TA Cloning™ Kits for Subcloningは、Taqポリメラーゼ増幅PCR産物をサブクローニング用のプラスミドベクターに直接挿入するための、5分間の高効率ワンステップクローニング戦略（「TOPO™クローニング」）を提供します。各キットは、サブクローニングに便利な制限部位を含むpCR™ 2.1-TOPO™ TAベクターを使用します。クローニングキットは、お客様のニーズや予算に応じて、さまざまなコンピテントセル付きまたはコンピテントセルなしでご利用になれます。TOPO™ TA Cloning™ Kits for Subcloningの特長：

•迅速かつ簡単—PCRからクローンへの移行はわずか3ステップで完了し、ハンズオン時間はわずか5分
• 効率的—正確なインサートを使用して最大95%のクローンを取得
• 実証済み—10年以上にわたる4,000を超える引用による信頼性の高い性能
• シンプル—リガーゼ、PCR後の処理、特定の配列を含むPCRプライマーは不要

TOPO™ TA Cloning™ Kits for Subcloning—概要

• ベクター：pCR™ 2.1-TOPO™ TAベクター—インサートに隣接する15の便利な制限部位を含むサブクローニングベクターで、簡単で方向性の高いサブクローニングを実現
• クローニング法：TOPO™ TA Cloning™—3′Aオーバーハング（Taqポリメラーゼ増幅）を含むPCR産物のTオーバーハングを含むTOPO™ベクターへのトポイソメラーゼIベース5分間ライゲーション
• コンピテントセル：さまざまなオプション—一般用、高効率、バクテリオファージT1耐性、急速に増殖するなどのそれぞれの特徴を持つコンピテントセルのいずれかを含むキットから選択するか、または独自のものを使用

pCR™ 2.1-TOPO™ TAベクター—クローニングおよびサブクローニングの簡易性
pCR™ 2.1-TOPO™ TAベクターは、Taqポリメラーゼ増幅PCR産物（TA Cloning™）の直接ライゲーションのために3'-チミジン（T）オーバーハングで線形化され、共有結合したトポイソメラーゼIで「活性化」されます。ライガーゼを追加する必要はなく、クローニングは5分で完了します。PCR産物インサート部位に隣接するEcoRI部位によりインサートの切除が容易になり、PCRインサートに隣接する15の便利な制限部位の任意の組み合わせを使用して簡単で方向性の高いサブクローニングを実現できます。

pCR™ 2.1-TOPO™ TAクローンの選択および操作
pCR™ 2.1-TOPO™ TAベクターには、アンピシリンとカナマイシンの両方の耐性マーカーと、青白スクリーニング用のLacZα遺伝子が含まれています。

簡略化されたTOPO™ベースクローニング
TOPO™クローニング技術を使用すると、特定の配列を含むPCRプライマー、PCR後の処理、ベクター調製、またはその他の時間のかかるDNA操作ステップは不要になります。提供されたトポイソメラーゼ荷電ベクターに直接PCR反応を加え、5分間インキュベートして、大腸菌コンピテントセルを形質転換するだけです。

効率的なクローニング
目的のインサートを含むクローンを最大95%まで使用できるため、スクリーニングするクローンの数を減らし、時間とコストを節約できます。このキットで使用されるpCR™ 2.1-TOPO™ TAベクターには3'-Tオーバーハングが付属しており、3'-Aオーバーハングを含むTaqポリメラーゼ増幅PCR産物を効率的にライゲーションできます。

クローニングの標準
クローニングの分野でTOPO™クローニング技術は10年以上にわたり数千人の科学者にとって信頼性の高いパートナーとなっています。高速で使いやすく効率的なTOPO™クローニングは、さまざまなアプリケーションのために多くの異なるベクターに適用されています。

TOPO™ TA Cloning™ Kit for Subcloning—キットオプション
TOPO™ TA Cloning™ Kit for Sequencingは、お客様のニーズに応じて異なる利点をもたらすさまざまなコンピテントセルとともに購入できます。

• 一般的なクローニング：TOP10細胞（カタログ番号K4500-01、K4500-40）
• 高効率のクローニング：TOP10 Electrocomp™細胞（カタログ番号K4560-01、K4560-40）
• 一般的なクローニング、バクテリオファージT1耐性：DH5α-T1R細胞（カタログ番号K4520-01、K4520-40）
• 迅速な増殖：Mach1™ -T1R化学的コンピテント大腸菌（カタログ番号K4510-20）
•自作のコンピテントセルを使用：柔軟性を高めながらコスト削減が可能（カタログ番号450641）

また、クリーンでシーケンス対応の組み換えプラスミドの分離に使用するためのPureLink™ Quick Plasmid Miniprep Kit（カタログ番号K4500-02およびK4510-02）を含むキットの2バージョンを提供しています。