Pierce™ Protein A Spin Plate for IgG Screening
Thermo Scientific™

Pierce™ Protein A Spin Plate for IgG Screening

IgGスクリーニング用Thermo Scientific Pierce Protein A Plusアガローススピンプレートは、抗体の迅速な精製とスクリーニング、および免疫沈降(IP)用のハイスループットフォーマットを提供します詳細を見る
製品番号(カタログ番号)数量
452021プレート
製品番号(カタログ番号) 45202
価格(JPY)
72,000
Each
数量:
1プレート
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IgGスクリーニング用Thermo Scientific Pierce Protein A Plusアガローススピンプレートは、抗体の迅速な精製とスクリーニング、および免疫沈降(IP)用のハイスループットフォーマットを提供します。96ウェルスピンプレートの各ウェルは、10~100 µlの血清、細胞培養上清、腹水サンプルを処理できます。

Pierce Protein A Plusアガロースは、抗体精製で汎用的に用いる高性能なアフィニティーレジンです。精製された天然Protein Aが高品質の6%架橋アガロースビーズ(CL-6B)に高密度で共有結合的に固定化されています。固定化Protein Aアフィニティレジンにはさまざまな種類がありますが、その中でもこの主要なレジンは、非常に汎用性の高いクロマトグラフィー機能の組み合わせを提供し、哺乳動物の血清サンプルから全IgGを高収量かつ高純度で精製できます。このアガロースビーズには、多くのアフィニティー精製システムに適した物理的および化学的性質があります。

Pierce Protein A Plusアガロースの特長:

天然Protain A – 固定化Protein Aは、ヒト、ウサギ、ブタ、イヌ、ネコの血清からのポリクローナルIgGの精製に最適
アガロースレジン – タンパク質アフィニティー精製法でもっともよく使用されている6%架橋アガロースビーズ(CL-6B)を担体とする
不活性で安定している – 優れた製造法により、無電荷で耐浸出性のある共有結合によってProtein Aが固定化されるため、非特異的結合が少なく、収量を低下させずに複数回の使用が可能
高い結合能 – この「Plus」バージョンのPierce Protein Aアガロースは、固定化Protein Aの高密度の負荷を有し、結合能はヒトIgGでレジン1 mLあたり34 mg(マウスIgGではレジン1 mLあたり約16~17 mg)を超える

Protein Aは、黄色ブドウ球菌のいくつかの菌株によって産生される細胞壁成分です。この分子量46.7 kDaのタンパク質は、基本的に糖鎖を含まない一本鎖ポリペプチドで構成されています。天然タンパク質Aには、特定の哺乳類種に由来するIgGクラス抗体のFc領域と高い親和性(Ka = 10^8/モル)で相互作用する4つの結合部位があります。IgG結合能はpH 8.2で最適になりますが、中性の生理的バッファー(pH 7.0~7.6)中でも効率的に結合します。

Protein Aは、抗体(特にIgGクラスの抗体)のFc部分に高い親和性で特異的に結合する、細菌由来のタンパク質です。Protein A は、Protein G と比べ、ラビット、ブタ、イヌ、およびネコ IgG に対して、高い結合能を示します。タンパク質AはヒトIgGに対しても高い結合能を示しますが、IgG3に対しては結合が弱まります。Protein AのマウスIgG1への結合性が弱いため、その抗体アイソタイプを用いるほとんどのアプリケーションには推奨されません。

Pierce Protein A Plus Agaroseは、Thermo Scientific AminoLink Coupling Chemistryを使用して調製しており、従来のリガンド固定化法と比べていくつかの利点があります。AminoLink固定化では、アガロースビーズの糖モノマーとProtein Aの天然リジン残基の間で、シンプルなアミド結合によって結合が形成されます。典型的な臭化シアン (CNBr) による固定化とは異なり、AminoLink では、非特異的結合の原因となり得る新規官能基が導入されず、安定で不可逆な結合が形成されます。その結果、抗体精製を複数回繰り返しても機能性固定化Protein Aを保持している結合能の高いレジンになります。

架橋型6%アガロースビーズ(CL-6B)の特性:
• pH安定性の維持:2~14(短期);3~13(長期)
•平均粒子径:45~165ミクロン
• 排除限界分子量:10,000~4,000,000 Da
• 最大流量:約1 mL/分(直径1 cmのカラムにおいて)
• 最大直線速度:30 cm/時
• 最大圧力:25 psi(1.5 bar)未満、「レジンが耐えられるカラム全体の圧力低下の最大値」と定義される(注:液体クロマトグラフィー装置に表示されたゲージ圧力は、カラム全体の圧力低下ではなく、システム全体の圧力の測定値である場合があります。)

詳細な製品データ
抗体精製のための抗体結合タンパク質の使用

関連製品
Pierce™ Protein A Plus Agarose
研究用途にのみご使用ください。診断目的には使用できません。
仕様
概要IgGスクリーニング用Pierce Protein A Spin Plate
精製標的IgG抗体
数量1プレート
カラムタイプアガロースレジン、アフィニティー
フォーマット96-ウェルフィルタープレート
製品ラインPierce
製品タイプスピンプレート
固定相タンパク質A
Unit SizeEach
組成および保存条件
受け取り後、4℃で保存

よくあるご質問(FAQ)

Can I use the Protein A or Protein G Antibody Screening Spin Plate to purify chicken IgY?

No. Neither Protein A nor Protein G binds IgY. Thermo Scientific Thiophilic Adsorbent (Cat. Nos. 20500 and 44916) purifies IgY from serum. The Thermo Scientific Chicken IgY Purification Kits (Cat. Nos. 44918 and 44922) purify IgY from yolks.

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Can I reuse the Protein A and Protein G Antibody Screening Spin Plates?

Yes. To regenerate the resins, wash wells three times with elution buffer and three times with 0.02% sodium azide in ultrapure water as detailed in the instructions.

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Can I use just a portion of the Antibody Screening Spin Plate to process a few samples?

No. The Protein A or Protein G 96-well Spin Plates have bottom and top seals. Removing the seals will cause the buffers to leak into the wash/collection plate. It is not possible to remove only a portion of the seal and continue with the purification process, and therefore, process 96 samples each time.

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What are the binding capacities of the Antibody Screening Spin Plates?

The Protein A Spin Plate binds 0.6 mg of human or 0.3-0.4 mg of mouse IgG/well (based on > 12 mg of human IgG or 6-8 mg of mouse IgG/mL of settled resin). The Protein G Spin Plate will bind > 0.5 mg human IgG/well (based on 11-15 mg of human IgG/mL of settled resin).

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What is the difference between Protein A and Protein G binding capabilities?

Protein A and Protein G bind almost exclusively with the IgG class of antibodies, but their binding properties differ among species and subclasses of IgG. Protein A is generally preferred for rabbit, pig, dog and cat IgG. Protein G has better binding capacity for a broader range of mouse and human IgG subclasses (IgG1, IgG2, etc.), and it binds rat IgG2a and IgG2b, which do not bind to Protein A. For a comprehensive list of the binding characteristics of Protein A and Protein G, see Tech Tip #34 (https://assets.thermofisher.com/TFS-Assets/LSG/Application-Notes/TR0034-Ab-binding-proteins.pdf).

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