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Dynabeads™ Oligo(dT)25
Dynabeads&trade; Oligo(dT)<sub>25</sub>
Citations & References (5)
Invitrogen™

Dynabeads™ Oligo(dT)25

完全なmRNAトランスクリプトームを15分で分離します。これらのmRNA分離ビーズは、事実上すべての未精製サンプルからmRNA分子を特異的に標的にして捕捉するので、mRNAに目的の情報がある場合に、トータルRNAを精製する必要がありません。細胞のトータルRNA中のmRNAはわずか ∼1-5%であるので、そのためにトータルRNAを単離する必要はあるでしょうか。トータルRNAを精製するために設計されたその他の技術を利用すると精製されたRNAのうち∼80%はリボソームRNAになるので、mRNAに膜への結合において詳細を見る
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製品番号（カタログ番号）数量
610055 mL
610022 mL
製品番号（カタログ番号） 61005
価格（JPY）
-
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数量:
5 mL
完全なmRNAトランスクリプトームを15分で分離します。これらのmRNA分離ビーズは、事実上すべての未精製サンプルからmRNA分子を特異的に標的にして捕捉するので、mRNAに目的の情報がある場合に、トータルRNAを精製する必要がありません。細胞のトータルRNA中のmRNAはわずか ∼1-5%であるので、そのためにトータルRNAを単離する必要はあるでしょうか。トータルRNAを精製するために設計されたその他の技術を利用すると精製されたRNAのうち∼80%はリボソームRNAになるので、mRNAに膜への結合において、リボソームRNA、転移RNA、マイクロ RNA、核小体低分子RNAおよび小細胞質RNAとの競合を強いさせます。

DynabeadsオリゴdT 25（ビーズのみ、5 ml）:
・高速で穏やかな手順により、純粋でインタクトなmRNAが得られます
・極めて純粋なmRNAの分離ができるので、cDNA合成のアップストリームの最良の選択になります
・極めて高感度のmRNA分離は、超微量の出発サンプルからのcDNA合成およびcDNAライブリーの構築を可能にします （単一細胞からのcDNAライブラリー構築を可能にします）

オリゴdT 25コーティングのDynabeads™は、極めて幅広い種類の未精製の出発サンプルからmRNA トランスクリプトームを特異的に標的にして捕捉します。リボソームRNA、DNA、タンパク質および低RNA分子（転移RNA、マイクロRNAおよび核小体RNAなど）は、ビーズに結合せずに捨て去られます。ポリアデニル化されたRNA（mRNA）のみが捕捉されます。単離されたmRNAは純粋なので、リボソームRNAの除去や抽出後のDNase 処理の必要がありません。

極めて広範なサンプルに利用できるように設計されています:
・精製されたトータルRNA
・細胞、血清、血漿からのウイルス性poly A付加 RNA
・哺乳類、両生類、魚類、および昆虫の組織: 脳、肺、肝臓、腸、心臓、腎臓、下垂体、膵臓、卵巣、筋肉、視床下部、卵子、昆虫のホールボディーなど…
・植物組織: ホールボディー、孔辺細胞（単一細胞）、胚、花、葉、胚珠、根、種子（糊粉、内胚乳）、柱頭など…
・酵母（Sacchromyces cerevisiae）
・未分画核酸サンプル（DNA + トータルRNA）

mRNAはあらゆるダウンストリームのアプリケーションに適しています:
・遺伝子クローニング
・cDNA合成、cDNAライブラリー構築
・RPA - リボヌクレアーゼプロテクションアッセイ
・サブトラクティブハイブリダイゼーション
・プライマーエクステンション
・SAGE、RACE、など...

カラムフリーのシステムにより、トランスクリプトームを最も効率よく回収することを確かにします:
・流動性のある磁性ビーズ上の物理的なmRNAの捕捉
・高速で穏やかな磁石による処理
・遠心中にmRNAを失うことはありません
・溶出中にmRNAのカラム膜へのトラップはありません

cDNAライブラリー構築に用いるmRNAの理想的な精製方法:
・トランスクルプトームの最高の回収率および濃縮率を確保します
・トータルRNAの分離を経て分離する方法で見込まれる量よりも、より多くのトランスクリプトームを捕捉します

さまざまな溶出方法が可能です:
・最小5μlまでのあらゆる量での溶出が可能です
-ダウンストリームでの酵素反応は、 Dynabeadsの存在により阻害されることはありません
-ビーズに直接cDNA合成を行い、再利用可能な固相cDNAライブラリーを作製することができます。
研究用途にのみご使用ください。診断目的には使用できません。
仕様
溶出量10–20 μL
最終産物タイプmRNA
使用対象（アプリケーション）qPCR
高スループット適合性High-throughput Compatible
リガンドタイプOligo-dT
精製時間15 min.
数量5 mL
出荷条件Room Temperature
出発物質量Cells: ≤106
Plant: ≤100 mg
Tissue: ≤50 mg
Total RNA: ≤75 μg
収量10 μg mRNA per 1 mL of beads (Binding capacity)
Isolation TechnologyMagnetic Bead
Unit SizeEach
組成および保存条件
5 mL Dynabeads; 4°C

よくあるご質問（FAQ）

I am getting DNA contamination after mRNA isolation using Dynabeads magnetic beads. Why is this?

There are several reasons why DNA contamination may occur:

- Incomplete DNA shearing.
- Incomplete removal of sample lysate after the hybridization step.
- Insufficient washing and/or removal of wash buffers.
- The ratio of sample to beads was too high.

I am getting rRNA contamination after mRNA isolation using Dynabeads magnetic beads. What should I do?

Ribosomal RNA is effectively eliminated by reextracting the mRNA from the eluate. Reuse the same Dynabeads Oligo(dT)25 beads that were used for the original isolation. Wash the beads twice in Washing Buffer B. Dilute the eluted mRNA with 4 times its volume of Lysis/Binding Buffer, then add the beads. Incubate with mixing at room temperature for 3-5 minutes, then continue with the Direct mRNA Isolation Protocol.

How long can I leave the isolated mRNA on Dynabeads Oligo(dT)25 magnetic beads?

We recommend immediate use of Dynabeads magnetic beads-mRNA complex or eluted mRNA for cDNA synthesis, in RT-PCR, or for other downstream applications. If storage is needed, we recommend you elute the mRNA from the beads using 10 mM Tris-HCl buffer (pH 7.5) and freeze it(-80°C). It is very important that all equipment and samples are RNase free.

My Dynabeads magnetic beads are not pelleting well with the magnet. Do you have any suggestions for me?

Please review the following possibilities for why your Dynabeads magnetic beads are not pelleting:

- The solution is too viscous.
- The beads have formed aggregates because of protein-protein interaction.

Try these suggestions: - Increase separation time (leave tub on magnet for 2-5 minutes)
- Add DNase I to the lysate (~0.01 mg/mL)
- Increase the Tween 20 concentration to ~0.05% of the binding and/or washing buffer.
- Add up to 20 mM beta-merecaptoethanol to the binding and/or wash buffers.

Find additional tips, troubleshooting help, and resources within our Dynabeads Nucleic Acid Purification Support Center.

Can I use Dynabeads Oligo(dT)25 magnetic beads in real-time PCR?

Dynabeads magnetic beads are compatible with TaqMan real-time PCR chemistry and non-capillary real-time PRC instruments. However, Dynabeads magnetic beads exhibit a low level of autofluorescence that can increase the intensity of the fluorescent signal to some degree. This can be compensated for by using a Dynabeads magnetic beads and water background in the instrument. Then background signal intensity can be subtracted from the sample signal intensity in all subsequent real-time PCR experiments containing Dynabeads magnetic beads. Alternatively, when using the standard curve method of analysis, an appropriate amount of Dynabeads magnetic beads can be added to each sample used to construct the standard curve.

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引用および参考文献 (5)

引用および参考文献
Abstract
Purification of mRNA directly from crude plant tissues in 15 minutes using magnetic oligo dT microspheres.
Authors:Jakobsen KS, Breivold E, Hornes E
Journal:Nucleic Acids Res
PubMed ID:2362831
Induction of nitric oxide synthase mRNA in coronary resistance arteries isolated from exercise-trained pigs.
Authors:Woodman CR, Muller JM, Laughlin MH, Price EM
Journal:Am J Physiol
PubMed ID:9435589
The purpose of this study was to develop a method by which endothelial cell nitric oxide synthase (ecNOS) mRNA expression could be measured in single coronary resistance arteries and to test the hypothesis that ecNOS gene expression is upregulated by exercise training. Yucatan miniature swine were randomly assigned to exercise-trained ... More
Disruption of imprinted gene methylation and expression in cloned preimplantation stage mouse embryos.
Authors:Mann MR, Chung YG, Nolen LD, Verona RI, Latham KE, Bartolomei MS
Journal:Biol Reprod
PubMed ID:12748125
Cloning by somatic cell nuclear transfer requires that epigenetic information possessed by the donor nucleus be reprogrammed to an embryonic state. Little is known, however, about this remodeling process, including when it occurs, its efficiency, and how well epigenetic markings characteristic of normal development are maintained. Examining the fate of ... More
Selective loss of imprinting in the placenta following preimplantation development in culture.
Authors:Mann MR, Lee SS, Doherty AS, Verona RI, Nolen LD, Schultz RM, Bartolomei MS
Journal:Development
PubMed ID:15240554
Preimplantation development is a period of dynamic epigenetic change that begins with remodeling of egg and sperm genomes, and ends with implantation. During this time, parental-specific imprinting marks are maintained to direct appropriate imprinted gene expression. We previously demonstrated that H19 imprinting could be lost during preimplantation development under certain ... More
In vitro characterization of somatostatin receptors in the human thymus and effects of somatostatin and octreotide on cultured thymic epithelial cells.
Authors:Ferone D, van Hagen PM, van Koetsveld PM, Zuijderwijk J, Mooy DM, Lichtenauer-Kaligis EG, Colao A, Bogers AJ, Lombardi G, Lamberts SW, Hofland LJ
Journal:Endocrinology
PubMed ID:9886848
Somatostatin (SS) and its analogs exert inhibitory effects on secretive and proliferative processes of various cells via high affinity SS receptors (SS-R). SS analogs bind with different affinity to the five cloned SS-R subtypes. Octreotide, an octapeptide SS analog, binds with high affinity to the SS-R subtype 2 (sst2). SS-R ... More