Uracil-DNA Glycosylase, heat-labile
Uracil-DNA Glycosylase, heat-labile
Thermo Scientific™

Uracil-DNA Glycosylase, heat-labile

ウラシル-DNAグリコシラーゼは、ウラシル塩基と糖鎖の間のN-グリコシド結合を切断することで、dU含有DNAからウラシルを励起します。この切断により、アルカリ性の高感度なアピリミジン部位が生成され、DNAポリメラーゼによる複製がブロックされるか、ハイブリダイゼーション部位になることが防げられます。二本鎖および一本鎖のdU含有DNAは、ウラシル-DNAグリコシラーゼの基質ですが、RNAおよび通常のdT含有DNAは基質ではありません詳細を見る
製品番号(カタログ番号)数量
78310100UN100 U
製品番号(カタログ番号) 78310100UN
価格(JPY)
31,600
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数量:
100 U
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ウラシル-DNAグリコシラーゼは、ウラシル塩基と糖鎖の間のN-グリコシド結合を切断することで、dU含有DNAからウラシルを励起します。この切断により、アルカリ性の高感度なアピリミジン部位が生成され、DNAポリメラーゼによる複製がブロックされるか、ハイブリダイゼーション部位になることが防げられます。

二本鎖および一本鎖のdU含有DNAは、ウラシル-DNAグリコシラーゼの基質ですが、RNAおよび通常のdT含有DNAは基質ではありません。

また、ウラシル-DNAグリコシラーゼを使用すると、dU含有プライマーが組み込まれたPCR産物のクローニング効率を向上させたり、部位特異的突然変異導入の効率を高めることができます。

タイセイヨウダラ由来のウラシル-DNAグリコシラーゼには、大腸菌由来の酵素のすべての特性があり、熱不安定性という利点もあります。50℃で10分間インキュベーションした後、完全かつ不可逆的に不活性化されます。

純度:
この酵素はクロマトグラフィーで精製され、エンドヌクレアーゼおよびエキソヌクレアーゼの汚染試験が行われています。

保存バッファー:
50 mMトリス-HCl(pH 7.5)、100 mM NaCl、0.5 mM EDTA、1 mM DTT、0.1% Triton X-100、50%グリセロール。

アッセイ条件:
反応混合液には、70 mMトリス-HCl、pH 8.0、10 mM NaCl、1 mM EDTA、100 µg/mL BSA、3H-dUTP標識DNA、およびウラシル-DNAグリコシラーゼが含まれます。インキュベーションは、37℃、1時間です。

ユニットの定義:
1ユニットは、37℃、1時間でdU含有DNAから1 nmolのウラシルを解放するために必要な酵素量です。

濃度:
1ユニット/µL

アプリケーション:
  1. DNA修復および変異検出の研究。
  2. PCR産物のクローニング効率の向上。
  3. 部位特異的突然変異導入の効率の向上。
  4. タンパク質-DNA相互作用の研究。

由来:
タイセイヨウダラ(タラ肝)の組換え


研究用途にのみご使用ください。診断目的には使用できません。
仕様
適合バッファー保存バッファー
製品タイプウラシルDNAグリコシラーゼ
数量100 U
酵素グリコシラーゼ
Unit SizeEach
組成および保存条件
ドライアイス同梱で出荷。-20℃で保存

よくあるご質問(FAQ)

What is UDG?

UDG (uracil-DNA-glycosylase) refers to a superfamily of enzymes comprising six sub-families. Family I UDG enzymes are called UNG, after the uracil-N-glycosylase gene. The terms UDG and UNG are commonly used interchangeably because they perform the same function in qPCR, namely, to remove Uracil from dU-containing DNA to prevent carryover contamination from previous PCRs. See the following link: https://www.thermofisher.com/uk/en/home/life-science/pcr/real-time-pcr/real-time-pcr-learning-center/real-time-pcr-basics/what-is-ung-udg.html

How many samples from the Oncomine Comprehensive Assay Plus, manual library preparation can I run on the Ion 550 Chip?

We recommend sequencing up to 5 DNA or RNA samples (4 samples and a non-template control (NTC)) on a single Ion 550 Chip.

Find additional tips, troubleshooting help, and resources within our Next-Generation Sequencing Support Center.

What is included in the Oncomine Comprehensive Assay Plus, manual library preparation?

The Oncomine Comprehensive Assay Plus, manual library preparation (Cat. No. A46721) is designed to prepare barcoded sample libraries from DNA and RNA. The kit consists of Oncomine Comprehensive Assay Plus DNA (2-pool) (Part No. A45615), RNA Oncomine Comprehensive Assay v3M (2-pool) (Part No. A33637), and two kits of Ion AmpliSeq Library Kit Plus (Cat. No. 4488990). Sufficient reagents are provided to prepare libraries from 24 samples.

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How much of each sample is needed for the Oncomine Comprehensive Assay Plus, manual library preparation?

10 ng of nucleic acid input per pool (20 ng of DNA and 20 ng of RNA) isolated from FFPE samples, including fine needle biopsies, is needed for the Oncomine Comprehensive Assay Plus, manual library preparation.

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What types of sample is the Oncomine Comprehensive Assay Plus, manual library preparation compatible with?

The assay is optimized for use with formalin-fixed paraffin embedded (FFPE) samples.

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