Thermo Scientific Y-PER Yeast Protein Extraction Reagentは、穏やかな界面活性剤溶解手順を利用した最初の商用酵母溶解試薬で、機能的に活性のある可溶化タンパク質を効率的に抽出します。
Y-PER Yeast Protein Extraction Reagentの特長:
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より多いタンパク質抽出量—ガラスビーズ法の2倍を超えるタンパク質を抽出
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手間が軽減—従来のガラスビーズ法に伴う困難(静電気を帯びたビーズのまとわり付き、タンパク質/ビーズの凝集、困難なビーズ収集など)を排除
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酵母用に最適化済み—サッカロマイセス・セレヴィシエ、シゾサッカロミセス・ポンベ、およびピキアパストリスでの使用が検証済み
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汎用—枯草菌、グラム陽性およびグラム陰性細菌を含む多数の微生物種に効果的で、さまざまな状況での使用に適合
この界面活性剤ベースの細胞溶解バッファーは、ガラスビーズの使用や、強力な還元剤、化学薬品、極端なpHや温度が関わる機械的処理を必要とすることなく、タンパク質抽出に必要なタンパク質性細胞エンベロープの破壊が可能です。一般的なガラスビーズ溶解プロトコルでは特別な機器が必要で、4℃で実施しなければなりません。この技術によるタンパク質収率は一般的に低く、その原因はガラスビーズに非特異的に結合するタンパク質や変性です。一方Y-PER試薬は、20分で完了するシンプルな室温プロトコルを使用し、特殊な機器を必要としません。
Y-PER試薬によるタンパク質抽出は使いやすい標準的なプロトコルで、適量のY-PER試薬をペレット状の酵母細胞に添加して室温で約20分間インキュベートし、細胞片を遠心分離します。その上澄みは濃縮したタンパク質溶液で、従来のガラスビーズ破壊で得られる一般的な収量を上回ります。
酵母は単細胞の性質と、高等の真核細胞で見られるプロセスを厳密に模倣する翻訳後修飾を行える能力を持ち合わせているため、酵母は重要な研究ツールです。多数の利用可能なベクターに加えて、組換え発現システムの開発により、酵母は研究分野において代わりがきかない役割を担っています。Y-PER試薬はサッカロマイセス・セレヴィシエやその他の一般的な種に効果的で、これらのモデル微生物を使用した融合タグ付きタンパク質精製およびレポーター酵素アッセイに適用できます。この溶解試薬は、酵母からゲノムおよびプラスミドDNAを抽出するのにも使用可能です。
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