Y-PER™ Plus Dialyzable Yeast Protein Extraction Reagent

Thermo Scientific Y-PER Plus透析可能酵母タンパク質抽出試薬は、酵母および細菌細胞を効率的に溶解し、分析用のタンパク質を抽出および可溶化します。

Y-PER Plus透析可能酵母タンパク質抽出試薬の特長：

•室温保管のためにデザインされた安定した製剤
• 20分間のシンプルかつ手動操作不要のインキュベーションによる酵母タンパク質抽出
• 機械的処理や長時間の酵素処理は不要
• NaClを含まない低イオン強度のTris緩衝液を使用
• 還元剤やキレート剤は非含有
• 完全に透析可能な界面活性剤成分を使用しているので、抽出タンパク質を下流技術で必要などんな緩衝液にも使用可能
• Thermo Scientific Pierce BCAおよびCoomassie Plusタンパク質アッセイの両方に適用可能

製品詳細（使用推奨）：
•新鮮細胞および凍結細胞：Y-PER-Plus試薬は、採取したばかりの細胞と凍結した細胞の両方からタンパク質を同等に抽出できます
• 細胞密度と株の変動：有機体内の増殖速度、増殖温度およびメディア組成における差により、既定の培養液量から収穫される細胞数は変化します。そのため、既定の細胞ペレット（湿細胞ペースト）重量に適用するY-PER-Plus試薬量決定のためのアドバイスが含まれています。
•Pichia pastoris：YEPDのような富栄養メディアで培養した細胞を溶解するには、細胞を対数期増殖中に収穫する必要があります。定常期において細胞溶解を促進するには、より多くの可溶性タンパク質を遊離するために溶解前にDTTまたはTCEP-HCl（最終濃度はそれぞれ0.1 Mおよび20～50 mM）をY-PER-Plus試薬に直接添加します。最もよい効果を得るには、1グラムの細胞ペーストにつき2.5～5.0 mLのY-PER-Plus試薬を使用します。量は適宜調節してください。還元剤を添加する代わりにプロテアーゼ阻害剤を添加、または45℃でインキュベートすることも可能です。
•Saccharomyces cerevisiae：もっともよい効果を得るには、細胞を対数期で収穫してください。定常期において細胞の収量を増加させるには、抽出前にDTTまたはTCEP·HCl（最終濃度はそれぞれ0.1Mおよび20～50 mM）をY-PER-Plus試薬に直接添加します。富栄養または合成既定メディアのどちらにおいても効率の差はありませんでした。もっともよい効果を得るには、1グラムの細胞ペーストにつき2.5～5.0 mLのY-PER Plus試薬を使用します。量は適宜調節してください。
•Schizosaccharomyces pombe：最良の結果を得るには、オリジナルのY-PER試薬（製品コード78990）を使用して、S. pombeからタンパク質を抽出してください。
•枯草菌：Y-PER Plus試薬は、枯草菌胞子からタンパク質を抽出しません。胞子形成が可能な細胞株を使用する場合、対数期に細胞を収穫してください。胞子形成が不可能な細胞を使用する場合、細胞は収穫前に飽和まで培養可能です。1 gの細胞ペーストにつき2.5～5.0 mLのY-PER-Plus試薬を使用します。量を適宜調節してください。
•大腸菌：1 gの細胞ペーストにつき2.5～5.0 mLのY-PER-Plus試薬を使用します。量を適宜調節してください。
•酵素活性：すべてのタンパク質は構造、可溶性、安定性において異なるので、特定のタンパク質ではY-PER-Plus試薬の存在下において最適な活性を得られない可能性があります。たとえばオリジナルのY-PER試薬は、β-ガラクトシターゼ活性のアッセイにおいて効率的ですが、Y-PER-Plus試薬はその速度を遅くします。Y-PER Plus試薬は、グルタチオンS-トランスフェラーゼ（GST）およびHisタグ付きタンパク質の標準的なアフィニティ精製プロトコルに適合します。

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