Pierce™ Universal Nuclease for Cell Lysis
Pierce™ Universal Nuclease for Cell Lysis
Thermo Scientific™

Pierce™ Universal Nuclease for Cell Lysis

Thermo Scientific Pierce Universal Nuclease for Cell Lysisは、細胞ライセートの調製時に核酸を完全に分解する必要があるさまざまなアプリケーションに最適です。Universal詳細を見る
製品番号(カタログ番号)数量
887005 kU
88702100 kU
8870125 kU
製品番号(カタログ番号) 88700
価格(JPY)
15,300
5 kU
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数量:
5 kU
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Thermo Scientific Pierce Universal Nuclease for Cell Lysisは、細胞ライセートの調製時に核酸を完全に分解する必要があるさまざまなアプリケーションに最適です。

Universal Nuclease for Cell Lysisの特長:

広範囲—あらゆる形態のDNAおよびRNAを分解
非常に高品質の酵素—SDS-PAGEによる試験で、ヌクレアーゼの純度は≥99%
高い活性—DNase Iより100倍高い比活性
多用途—幅広い細胞溶解試薬に使用可能

Pierce Universal Nuclease for Cell Lysisは、Serratia marcescensに由来する遺伝子組換えエンドヌクレアーゼです。この酵素は大腸菌から産生および精製され、2つの重要なジスルフィド結合を持つ2つの同一の30 kDaサブユニットで構成されています。このユニバーサルエンドヌクレアーゼは、1本鎖、2本鎖、線状、および環状DNAおよびRNAを分解し、幅広い温度とpHで効果を発揮できます。この酵素は比活性が高く(DNase Iの100倍)、他のヌクレアーゼよりも熱安定性が向上しています。Pierce Universal Nucleaseは純度≥99%の酵素で、測定可能なプロテアーゼ活性はなく、250 U/µLの濃度で提供されます。Pierce Universal Nuclease for Cell Lysisの性能は、Benzonase™ Nuclease(EMD Merck)と同等です。

アプリケーション:
• B-PER、Y-PER、またはその他の市販および自家製細胞溶解試薬や機械的破壊と併用して、タンパク質抽出物の粘度を低減
• ダウンストリーム処理の前に組換えタンパク質調製でDNAとRNAを除去

Pierce Universal Nuclease for Cell Lysisは一般的に、タンパク質調製物から核酸を除去することにより、ダウンストリームアプリケーション用に細菌や哺乳類のタンパク質抽出物の粘度を下げるために使用します。この酵素は、塩基長が5未満のオリゴヌクレオチドにまで核酸を完全に分解します。Pierce Universal Nuclease for Cell Lysisは、ライセートペレットの上清からの分離を向上させ、処理済みライセートのろ過を増強します。また、クロマトグラフィーの処理時間を短縮し、タンパク質の全体的な収量を増大させます。このエンドヌクレアーゼは、タンパク質抽出物の2Dゲル電気泳動への適合性を向上させることも実証されています。1ユニットは、ニシンDNAを37℃で30分間超音波処理して、260 nmでの吸光度を1.0変化させるのに必要な酵素量に匹敵します(標準ヌクレアーゼを使用して、Merck™ Serratia marcescens体積活性アッセイにより決定)。

関連製品
Micrococcal Nuclease Solution (≥ 1 unit/µL)
研究用途にのみご使用ください。診断目的には使用できません。
仕様
概要Pierce Universal Nuclease for Cell Lysis
酵素ヌクレアーゼ
組成50%グリセロール(v/v)、20 mM NaCl、2 mM MgCl2、20 mMトリス、pH 8.0に調製された、250 U/uLの純度99%以上の酵素
数量5 kU
試薬タイプ細胞溶解用酵素
対応可能対象200 mLライセート
形状液体
製品ラインPierce
製品タイプCell Lysis Enzyme
Unit Size5 kU
組成および保存条件
直射日光を避け、涼しく乾燥した換気の良い場所に保存。

よくあるご質問(FAQ)

At which concentration/dilution should the Pierce Universal Nuclease for Cell Lysis (Cat. No. 88700) be used, and what is the suggested incubation time and incubation temperature?

We would suggest the following procedure (note that you should determine yourself empirically the optimal incubation time, incubation temperature and also dilution): Please add 25 U or 0.1 µL Pierce Universal Nuclease for Cell Lysis (Cat. No. 88700) to 1 mL of cell lysate (dilution 1:10,000) and incubate at room temperature for 10-15 minutes. If you want to dilute the Nuclease for facilitating pipetting, please do this with Tris- or PBS-buffer at pH 7-8.

Find additional tips, troubleshooting help, and resources within our Protein Purification and Isolation Support Center.

After cell lysis, my mass spectrometry sample is very viscous and difficult to pipette. How do I reduce the sample viscosity?

High sample viscosity after lysis is due to release of DNA from the nucleus. Sonication or addition of a nuclease such as the Pierce Universal Nuclease (Cat. No. 88700, 88701, or 88702) can be used to degrade DNA and reduce sample viscosity.

Find additional tips, troubleshooting help, and resources within our Mass Spectrometry Support Center.

Can you explain how the B-PER Bacterial Protein Extraction Reagent lyses cells?

The B-PER Reagent solution contains a proprietary, mild, non-ionic detergent in 20 mM Tris-HCl, pH 7.5. It effectively disrupts cells and solubilizes native or recombinant proteins without denaturation. The reagent creates holes in the cell membrane that will leak out cytosolic proteins. The sample may become very viscous when the bacterial chromosome is released. We recommend adding DNAse I (Cat. No. 90083) to the reagent to reduce viscosity. For better lysis efficiency and if there are inclusion bodies, we recommend adding Lysozyme (Cat. No. 90082) to the reagent. Alternatively, you may purchase the B-PER Bacterial Protein Extraction Reagent with Enzymes Kit (Cat. No. 90078 or 90079) that includes the B-PER Bacterial Protein Extraction Reagent, DNase I, and Lysozyme.

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引用および参考文献 (1)

引用および参考文献
Abstract
p53 is active in murine stem cells and alters the transcriptome in a manner that is reminiscent of mutant p53.
Authors:Yan H, Solozobova V, Zhang P, Armant O, Kuehl B, Brenner-Weiss G, Blattner C
Journal:
PubMed ID:25719246
Since it was found that p53 is highly expressed in murine embryonic stem cells, it remained a mystery whether p53 is active in this cell type. We show that a significant part of p53 is localised in the nucleus of murine embryonic stem cells and that the majority of this ... More