Pierce™ c-Myc-Tag Magnetic IP/Co-IP Kit

Thermo Scientific Pierce磁気c-Myc-タグIP/Co-IPキットには、c-Myc融合タンパク質の免疫沈降アッセイや、c-Mycタグ付きベイトタンパク質を用いたco-IP実験を行うための、特異的な免疫親和性の磁気ビーズと試薬が含まれています。

従来のタンパク質A/Gビーズでの捕捉に基づくIP手順とは異なり、本キットでは、あらかじめ固定化された抗c-Myc抗体を含む磁気ビーズを使用しています。これらのPierce抗c-Myc磁気ビーズは、生物学的サンプルからのc-Mycタグ付きタンパク質複合体の特異的な結合を確実にします。抗体がビーズに共有結合しているため、IPターゲットは容易に溶出され、抗体汚染なしに回収されます。IPキット一式には、磁気ビーズ、溶解/洗浄バッファー、低pH溶出バッファー、中和バッファー、c-Mycタグ陽性対照溶解液、SDS-PAGE用非還元サンプルバッファーが含まれています。手動および自動ワークフロー用のプロトコルが用意されています。40 IPまたはco-IPアッセイを実行するのに十分な成分が提供されています。

c-Myc-Tag Magnetic IP/Co-IP Kitの特長：

•特異的磁気ビーズ—高品質の抗c-Myc単クローン性抗体を共有結合的に固定化することで、高収率の免疫沈降産物を得ることができます
• 低非特異的結合—安定したプレブロッキングされたビーズと特異的抗体は、オフターゲット結合を最小限に抑えます
• スムーズな溶出—低pHの溶出バッファーは、抗体の溶出汚染なしにc-Mycタグ付きタンパク質相互作用複合体を確実に回収します
• 便利で高速—キット一式と簡単な手順で、約1時間でIPまたはCo-IP実験を実行するための最適化されたプロトコルを提供します
• 高汎用性—磁性ビーズは、手動および自動の磁気単離ワークフローに対応しています（Thermo Scientific KingFisher機器など）

ヒトc-Mycタンパク質のC末端領域に由来するc-Mycペプチド（EQKLISEEDL）は、組換えタンパク質の発現に使用されるいくつかの融合タンパク質タグの1つです。Pierce c-Myc磁気IP/Co-IPキットは、特異的な高親和性固定化抗体（クローン9E10）を使用して、細菌や哺乳類の細胞溶解液やPierceヒトin vitro翻訳キットで調製した溶解液からc-Mycタグ付き融合タンパク質を迅速に免疫沈降させます。ビーズをc-Mycタグ付きタンパク質を含む細胞溶解物とインキュベートし、融合タンパク質を捕捉し、ビーズを洗浄した後、低pH溶出バッファーまたは非還元サンプルバッファーを用いて溶出します。プロトコルとバッファーはIPおよびco-IP反応に最適化されており、溶出サンプル内で特定のタンパク質相互作用複合体を濃縮します。抗c-Myc抗体は、ウエスタンブロット分析によるc-Mycタグ付きタンパク質の検出に使用できます。

このキットに使用されている磁気ビーズの結合容量やその他の特性については、Pierce抗c-Myc磁気ビーズ（製品コード88842）.

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