1-Step Human High-Yield IVT Kit

Thermo Scientific 1-Step Human High-Yield In Vitro Translation (IVT) Kitは、他の哺乳類IVT系と比べてmLあたり10～100倍の収量の機能タンパク質の発現を可能にします。

1-Step High-Yield IVT Systemは、改変HeLa細胞抽出物を使用して、堅牢なヒト翻訳機構を活用し、完全長の機能タンパク質を生成します。このシステムでは、タンパク質発現を独自の透析装置で行うため、ヌクレオチド、アミノ酸、およびエネルギー生成基質を反応に連続的に供給しながら、タンパク質合成の阻害物質を除去します。この連続交換無細胞（CECF）システムは、一晩のインキュベーションで最大750 µg/mLのタンパク質発現を実現します。完全マキシスケールキットには、最適化された発現ベクターなど、組換え遺伝子の転写と翻訳に必要なすべてのコンポーネントが含まれます。

1-Step Human High-Yield Maxi IVT Kitの特長：

•高発現—最大750 µg/mLの発現タンパク質
• 再現性—低い実験間ばらつき
• 迅速—6時間～一晩のインキュベーションで高濃度のタンパク質を発現
• 機能的—ジスルフィド結合を含有するタンパク質など、機能的に活性のあるタンパク質を発現

ワンステップのタンパク質発現：
•使いやすい—1回の反応ステップで転写と翻訳を実行
• 標識に適応—重アミノ酸または非天然アミノ酸の取り込みに適合

内容：
• キット一式には、細胞ライセート、反応ミックス、アクセサリタンパク質、5X透析バッファー、コントロールDNA、クローニングベクター、透析装置、および遠心チューブが含まれます

必要なもの：
• 30℃のインキュベーターまたはウォーターバス（シェイカーインキュベーターは発現を30～50%増加）

アプリケーション：
• 構造解析用の組換えタンパク質の生成
• タンパク質相互作用研究用の活性タンパク質の生成
• 変異タンパク質の迅速な発現と特性評価
• ウイルス粒子の小規模生成
• 非天然アミノ酸の取り込み、または毒性タンパク質の産生

1-Step Human High-Yield IVT Kitは、転写および翻訳に必要なすべての必須コンポーネントを提供するセルフリータンパク質発現システムです。このキットは、DNAテンプレートを使用するタンパク質合成をサポートするアクセサリタンパク質および反応ミックスで最適化されています。従来のin vivo発現システムと比較した1-Step Human High-Yield IVT Kitを使用する利点は、毒性または不溶性のタンパク質の発現が可能なこと、タンパク質を修飾アミノ酸で容易に標識できること、および組織培養細胞でヒトタンパク質を発現させるための時間とコストを削減できることです。1-Step Human IVT Kitは、T7ウイルスプロモーターとEMCV内部リボソーム侵入部位（Internal Ribosome Entry Site；IRES）を利用するpT7CFE1発現ベクターとともに使用するよう最適化されており、高濃度のin vitroタンパク質発現を促進します。pT7CFEベクターの使用は高い発現レベルを得るために欠かせません。タンパク質の検出と精製を容易にするため、pT7CFEベクターファミリーはタンデムアフィニティータグとともに利用でき、利便性が向上しています。（小規模スケールおよびスクリーニングオプションについては、1-Step Human Coupled IVT Kitをご覧ください。）

その他の製品データ
• in vitroタンパク質発現のためのベクターおよび精製方法の選択
• ハイスループット、高収量のin vitro翻訳用システム
• 無細胞ヒトIVTシステムを用いた高活性タンパク質発現