Pierce™ Protein A/G Chromatography Cartridges

Thermo Scientific™ Pierce™ Chromatography Cartridges Protein A/Gは、ほとんどの免疫グロブリンの分離・精製にすぐに使用できる便利な充填済みカートリッジです。

Pierce Protein A/G Agaroseは、精製したProtein A/G組換え融合タンパク質を、高品質の架橋型6%アガロースビーズ（CL-6B）に共有結合的に固定化しています。この特定の種類のレジンは、非常に汎用性が高いクロマトグラフィー機能を組み合わせ、哺乳動物の血清サンプルから全IgGを高収量かつ高純度で精製できます。このアガロースビーズには、多くのアフィニティー精製システムに適した物理的および化学的性質があります。

Protein A/Gアガロースの特長：

•Protein A/G – Protein AとProtein Gの抗体結合ドメインを持つ固定化された組換え融合タンパク質で、ほぼすべての哺乳類種からポリクローナルIgGを精製可能
• アガロースレジン – タンパク質アフィニティー精製法でもっともよく使用されている6%架橋アガロースビーズ（CL-6B）を担体とする
• 不活性で安定している – 優れた製造法により、無電荷で耐浸出性のある共有結合によってProtein A/Gが固定化されるため、非特異的結合が少なく、収量を低下させずに複数回の使用が可能
• 標準的な結合能 – Pierce Protein A/Gアガロースは、固定化Protein A/Gの標準的な負荷を有し、結合能はヒトIgGでレジン1 mLあたり7 mgを超える

Pierceクロマトグラフィーカートリッジは、主要な自動液体クロマトグラフィーシステムや手動のシリンジ処理に適合しており、ÄKTA™またはFPLCシステムに追加のコネクターなしで直接セットできます。各製品に付属のアクセサリパックは、Luer-Lokシリンジフィッティングや1/16 inチューブとともに使用できるようカートリッジに簡単に適合します。Protein A/Gカートリッジは、迅速かつ簡単で再現性のあるクロマトグラフィー分離を実現し、再生して繰り返し使用できます。

Protein A/Gは、Protein AとProtein GのIgG結合ドメインを組み合わせた遺伝子組換えタンパク質です。この融合タンパク質は大腸菌で発現されています。Protein A/GにはProtein Aの4つのFc結合ドメインとProtein Gの2つのFc結合ドメインが含まれるため、最終質量は50,460ダルトン（SDS-PAGEでは40～45 kDa）になります。Protein A/GはProtein A単独の場合ほどpH依存性ではありませんが、それ以外の点ではProtein AとGの加成性があります。

Protein A/GはすべてのヒトIgGサブクラスに結合するため、サブクラスの同一性が判定されていないポリクローナルまたはモノクローナルIgG抗体の精製に最適な選択肢です。また、Protein A/GはIgA、IgE、IgM、および（やや劣りますが）IgDにも結合します。Protein A/G はすべてのマウス IgG サブクラスにもうまく結合しますが、マウス IgA、IgM または血清アルブミンには結合しません。そのため、Protein A/G は IgG サブクラスからマウスモノクローナル抗体を精製、検出するのに優れたツールであり IgA、IgM、または血清アルブミンから干渉されません。マウスモノクローナルの各サブクラスは、Protein AやProtein GよりもキメラProtein A/Gに対する親和性が強い傾向があります。

Pierce Protein A/G Agaroseは、Thermo Scientific AminoLink Coupling Chemistryを使用して調製しており、従来のリガンド固定化法と比べていくつかの利点があります。AminoLink固定化では、アガロースビーズの糖モノマーとProtein Aの天然リジン残基の間で、シンプルなアミド結合によって結合が形成されます。典型的な臭化シアン (CNBr) による固定化とは異なり、AminoLink では、非特異的結合の原因となり得る新規官能基が導入されず、安定で不可逆な結合が形成されます。その結果、抗体精製を複数回繰り返しても固定化Protein A/Gの活性が失われない結合能の高いレジンになります。

Pierce Protein A/G Agaroseは、血清、腹水、細胞培養上清、その他の抗体サンプルから得られるほぼすべてのアイソタイプおよび哺乳類種のIgGと結合