アミン反応性のThermo Scientific TMT™アイソバリック質量タグ試薬は、タンデム質量分析を使用して、細胞や組織から抽出されたタンパク質のマルチプレックス定量を可能にします。
Tandem Mass Tag™ 2-plex(TMTduplex™)試薬は、アイソバリック化合物(同位体異性体とも呼ばれる同一の質量と構造)のセットで、一級アミン(—NH2)基の共有結合的で不可逆的な標識のためにNHS活性化されます。各アイソバリック試薬は、質量レポーター領域に異なる数の重同位体を含有するため、サンプルの同定と相対定量のためのタンデムMS/MSの際に固有のレポーター質量を得られます。この試薬は、細胞または組織サンプルから調製されたすべてのペプチドを標識して、1回のMS分析で2つのサンプルを分析することができます。
このTMTduplexアイソバリック標識試薬セットの特長:
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強力 — 2つのサンプルを同時にMS分析することで、スループットが向上し、2つの異なる処理条件での相対的な定量が可能
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一貫性 — 試薬の構造と性能がTMTzero™、TMTduplex™、
TMTsixplex™、
TMT10plex™間で同一なため、メソッド開発からマルチプレックス定量への移行を効率的に行え、プラットフォームやデータセット全体でバイオマーカー探索研究が可能
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確実 — 化学的性質に一貫性があるため、メソッド開発からマルチプレックス定量への移行を効率的に行え、バイオマーカー探索研究が可能
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効率的 — アミン反応性NHSエステル活性化試薬は、タンパク質配列やタンパク質分解酵素の特異性に関係なく、すべてのペプチドを効率的に標識
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適合性 — Q Exactive、Orbitrap Elite™、Orbitrap Fusion™ Tribrid™機器など、Proteome Discoverer™ 1.0以降で完全にサポートされているデータ分析を備えた高解像度ThermoScientific MS/MSプラットフォームでの使用に最適化
アプリケーション:• 正常状態と疾患状態、または対照と処理済みの比較によるタンパク質発現プロファイリング
• 1回の実験で2つの異なるサンプルを同時に測定
• 抗体を利用できないタンパク質の定量分析
• 膜および翻訳後修飾タンパク質の同定と定量
• 1回の実験で数百から数千のタンパク質を同定および定量
Tandem Mass Tag(TMT)試薬は、タンデム質量分析を使用して異なるサンプル中のタンパク質を同定および定量できる化学タグです。アミン反応性のNHSエステル活性化化合物は、ペプチドおよびタンパク質のリジン残基のペプチドアミノ末端および遊離アミノ末端に高効率で共有結合するため、消化に使用される酵素に関係なく、特定のサンプル内のすべてのペプチドを標識できます。TMT試薬は同一の構造と質量(同位体異性体)を共有しているため、標識ペプチドはLC分離中に共溶出し、MS/MS分析中に共分離されます。これによりサンプル間のペプチド同定の損失が少なくなります。MS/MS分析では、各アイソバリックタグも断片化され、サンプルの同定と定量に使用される固有のレポーターイオン質量を生成します。タンパク質の定量は、MS/MSスペクトル中の2つのレポーターイオンの相対強度を比較することで行います。
TMTduplexアイソバリック試薬セットにより、タンデムMS分析を用いた2つの条件のタンパク質プロファイリングが可能になります。TMTzeroタグは、費用のかかる同位体標識化合物を使用することなく、テスト、サンプル調製の最適化、標識化、分画、およびペプチド同定とレポーター検出のためのMS断片化を可能にします。TMTduplex同位体試薬セットは、TMTzeroタグを
TMT6タグの1つと組み合わせて、SILACと同様にMSレベルで2つの条件の定量的タンパク質プロファイリングを行います。
TMT試薬は、スタンドアロンセット、または必要となる全試薬とコントロールを含めて最適化されたキットフォーマットで提供され、最大限の柔軟性、利便性、および信頼性を実現します。タンデム質量タグ試薬は、業界をリードするThermo Scientific機器およびソフトウェアと組み合わせることで、定量的タンパク質発現分析のための総合的なシステムソリューションを提供します。
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