HisPur™ Ni-NTA Chromatography Cartridges, 1 mL
HisPur™ Ni-NTA Chromatography Cartridges, 1 mL
Thermo Scientific™

HisPur™ Ni-NTA Chromatography Cartridges, 1 mL

Thermo Scientific HisPur Ni-NTA Chromatography Cartridgesは高結合能で高性能のニッケル-IMACレジンを含有しており、Hisタグ付き融合タンパク質の日常的なアフィニティー精製に使用できます。HisPur Ni-NTA Resinの特長:•高結合能—レジン1詳細を見る
製品番号(カタログ番号)数量
900985カートリッジ
900992 x 5 mL
製品番号(カタログ番号) 90098
価格(JPY)
44,400
Each
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数量:
5カートリッジ
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Thermo Scientific HisPur Ni-NTA Chromatography Cartridgesは高結合能で高性能のニッケル-IMACレジンを含有しており、Hisタグ付き融合タンパク質の日常的なアフィニティー精製に使用できます。

HisPur Ni-NTA Resinの特長:

高結合能—レジン1 mLあたり最大60 mgの6xHisタグ付きタンパク質を結合
多用途—未変性または変性条件でタンパク質を精製
適合性—Thermo Scientific Cell Lysis Reagentsおよびさまざまなバッファー添加剤と併用可能
経済的—レジンは5回まで再利用可能
簡便—調製済みバッファーはキットフォーマットで提供
柔軟—バルクレジン、スピンカラム、クロマトグラフィーカートリッジ、および96ウェルフィルタープレートなど、さまざまなフォーマットで提供

特別に調製された担体は、ニトリロ三酢酸(NTA)キレート部位で誘導体化され、二価ニッケルイオン(Ni2+)を添加されたアガロースビーズで構成されています。固定化金属アフィニティークロマトグラフィー(IMAC)レジンは、組換えHisタグ付きタンパク質精製において卓越した結合能と性能を提供します。

組換えタンパク質の発現および精製は、タンパク質の調節、構造、および機能の研究における中枢です。大部分の組換えタンパク質は短いアフィニティータグとの融合として発現し、もっとも一般的なものはポリヒスチジン(6xHis)タグです。組換えHisタグ付きタンパク質の精製に使用される方法は固定化金属アフィニティークロマトグラフィー(IMAC)です。このクロマトグラフィーは、ヒスチジン側鎖と連携するニッケルイオンまたはコバルトイオンで荷電したキレートレジンで構成されています。

HisPur Ni-NTA Resinは、Thermo Scientific B-PER Bacterial Protein Extraction Reagentsで得られるような細菌ライセートから高レベルの過剰発現Hisタグ融合タンパク質を効果的に精製します。レジンはさまざまなスケールのバッチ結合およびスピンカラム法で優れた性能を発揮します。性能は他社の一般的なNi-NTAレジンと同等か、またはより高い効果を示します。HisPur Ni-NTA Resinは高品質かつ安定で、回復性のあるアフィニティー担体です。試験により、最低でも5回の繰り返し使用では性能は低減しないことが確認されています。これらのデータは、通常の使用において、レジンは構造的分解、またはニッケルイオン浸出に対する高い耐性があることを示しています。

HisPur Ni-NTA ResinおよびHisPur Cobalt ResinはIMACの代替形態で、Hisタグ結合を担うキレート金属イオンとして、前者はニッケルを、後者はコバルトを使用します。Ni-NTAレジンは、キレートの4つの金属結合部位により、高いタンパク質結合と低い金属イオン浸出を実現できるため、6xHisタグ付きタンパク質精製でもっとも一般的なIMACレジンです。コバルトは結合が強くなく、より識別的に結合するため、Hisタグ付タンパク質精製において高純度を実現できますが、一般的に収量は低下します。

利用可能なフォーマット:
レジンスラリー—クロスリンク型6%アガロースビーズ;10 mL、100 mL、500 mLボトル
スピンカラム—0.2 mL(微量遠心分離機)、1 mL、3 mLカラム
精製キット—3種類すべてのカラムサイズをそろえた完全キット
クロマトグラフィーカートリッジ—HisPur Chromatography Cartridgeデータの詳細を参照
96-ウェルスピンプレート

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研究用途にのみご使用ください。診断目的には使用できません。
仕様
カラムタイプアフィニティー、アガロースレジン
数量5カートリッジ
固定相二価ニッケル、金属キレート
ターゲットHisタグ付きタンパク質
容量(メートル法)1 mL
形状液体懸濁液
製品ラインHisPur
タイプクロマトグラフィーカートリッジ
Unit SizeEach
組成および保存条件
4~8℃で保存冷凍不可。

よくあるご質問(FAQ)

Are there other sequences that can bind to nickel more tightly than 6xHis-tagged proteins and how can they be eluted.

Yes, 7xHis-tagged proteins, proteins naturally high in histidine, and other combinations of His and other amino acids will bind. To elute them, you have to increase the concentration of imidazole. Generally these peptides will not contaminate your fraction since they remain on the column. However after multiple uses of the same column, these peptides may reduce the binding capacity of the column.

Find additional tips, troubleshooting help, and resources within our Protein Assays and Analysis Support Center.

Can ProBond or Ni-NTA beads be used for large-scale preparations?

ProBond and Ni-NTA beads can be used in FPLC columns. However, the beads can only withstand low pressure (~43.5 psi max).

Find additional tips, troubleshooting help, and resources within our Protein Purification and Isolation Support Center.

What should the typical protein recovery be when using the Probond Purification System or Ni-NTA Purification system?

Both systems are qualified by purifying 2 mg of myoglobin protein on a column and performing a Bradford assay. Protein recovery must be 75% or higher.

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What is the difference between HisPur Nickel Resin and HisPur Cobalt Resin?

Nickel has a higher affinity for histidines than does cobalt. It binds multiple histidines more tightly than cobalt, and requires more stringent conditions than is necessary for cobalt. The lower affinity of cobalt for multiple histidines typically results in less nonspecific binding of histidine-rich proteins that lack a his-tag compared to nickel resins.

HisPur Ni-NTA resin has a high capacity of up to 60 mg of 6xHis-tagged protein per milliliter. It is a versatile resin that can work under both native and denaturing conditions, and can also be used with a variety of lysis reagents and buffer additives.

HisPur Cobalt resin utilizes proprietary tetradentate chelating resin charged with cobalt. This system recovers highly purified protein with lower imidazole concentrations and has low metal leeching properties.

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Can the rapid equilibrium dialysis (RED) device be used with cells or virus included in the "plasma" side?

We have not tested the units with cells or viral particles. Customers would have to design and optimize their experiments to use the RED device with this type of sample.