ViraPower™ HiPerform™ T-REx™ Gateway™ Vector Kit
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ViraPower™ HiPerform™ T-REx™ Gateway™ Vector Kit

ViraPower™ HiPerform™ T-Rex™ Gateway™ベクターキットには、Gateway™に対応したViraPower™ HiPerform™テトラサイクリン制御レンチウイルス発現ベクター、pLenti6.3⁄TO⁄V5-DEST™が含まれており、簡単に組換えベースのクローニングができ、分裂および非分裂哺乳類細胞において、レンチウイルスベースの制御された高レベルな目的遺伝子の発現を得ることができます詳細を見る
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製品番号（カタログ番号）数量
A1114420 Reactions
製品番号（カタログ番号） A11144
価格（JPY）
493,500
Each
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数量:
20 Reactions
ViraPower™ HiPerform™ T-Rex™ Gateway™ベクターキットには、Gateway™に対応したViraPower™ HiPerform™テトラサイクリン制御レンチウイルス発現ベクター、pLenti6.3⁄TO⁄V5-DEST™が含まれており、簡単に組換えベースのクローニングができ、分裂および非分裂哺乳類細胞において、レンチウイルスベースの制御された高レベルな目的遺伝子の発現を得ることができます。pLenti6.3⁄TO⁄V5-DEST™ベクターは2つの重要な遺伝因子を持ち、これがHiPerform™ベクターを構成しています。HIV-1インテグラーゼ遺伝子からのWoodchuck Posttranscriptional Regulatory Element（WPRE）とセントラルポリプリン配列（cPPT）シーケンスによって、これらの因子を持たないベクターと比べて、タンパク質発現量が4倍以上になります。

利点
• 分裂または非分裂哺乳類細胞への形質導入用複製不能レンチウイルスを作製
• Gateway™技術を用いた組換えベースのクローニングが簡単
• テトラサイクリン制御による安定した長期の発現
• 従来のレンチウイルス発現システムと比較して、タンパク質発現が4倍以上に向上

主な特長
• ウッドチャック肝炎ウイルス由来のWPREによりトランス遺伝子発現が増加し、HIV-1インテグラーゼ遺伝子由来のcPPTにより宿主ゲノムに統合されるレンチウイルスのコピー数が増加するため、ウイルス力価が高まります。WPREとcPPTを用いることで、こうした因子を含まない他のベクターと比べて、ほぼすべての細胞タイプでタンパク質発現量が4倍以上も増加します。
•ヒトサイトメガロウイルス（CMV）プロモーターと2つのテトラサイクリンオペレーター2（TetO2）サイトで構成されるハイブリッドプロモーターにより、目的遺伝子の高レベルで制御された発現が得られます
• ブラストサイジン選択マーカーにより、SV40プロモーターのコントロール下で安定した選択を行えます

キットの内容物：
• pLenti6.3⁄TO⁄V5-DEST™ベクター
• pLenti3.3⁄TRベクター
• pLenti6.3⁄TO⁄V5-GW⁄lacZプラスミド
• テトラサイクリン
• One Shot™ Stbl3™ ケミカルコンピテント大腸菌（カタログ番号C737303）
• pENTRTM Gusポジティブコントロールプラスミド

研究用途にのみご利用ください。あらゆる治療もしくは診断用には使用できません。
研究用途にのみご使用ください。診断目的には使用できません。
仕様
抗生物質耐性菌アンピシリン（AmpR）、ブラストチジン（BsdR）
切断切断部位なし
構成または誘導システム誘導型
供給タイプレンチウイルス
使用対象（アプリケーション）ウイルス発現
Gateway酵素LR Clonase™ II Plus、LR Clonase™ II
誘導試薬ドキシサイクリン、テトラサイクリン
PCR酵素校正機能を持つポリメラーゼ
製品タイプベクターキット
タンパク質のタグ位置（遺伝子に対して）C-末端
数量20 Reactions
複製開始点pUCオリジン
選択剤（真核生物）ブラストサイジン
選択マーカー真核生物BsdR
選択マーカープロモーターPGKプロモーター
特殊元素WPRE、cPPT
ベクターpLenti
クローニング法Gateway™
製品ラインGateway、HiPerform、T-REx、ViraPower, HiPerform, T-REx, ViraPower
プロモーターCMV/TO
タンパク質タグV5エピトープタグ
Unit SizeEach
組成および保存条件
内容
ViraPower™ HiPerform™ T-REx™ Gateway™ベクターキットには以下のコンポーネントが含まれます：
•pLenti6.3⁄TO⁄V5-DEST™ベクター6 ug（ベクター40 µL、TEバッファー中150 ng⁄µL含有、pH 8.0）
• pLenti3.3⁄TRベクター20 ug（ベクター40 µL、TEバッファー中0.5 µg⁄µL含有、pH 8.0）
• pLenti6.3⁄TO⁄V5-GW⁄lacZプラスミド10 ug（プラスミド20 µL、TEバッファー中0.5 µg⁄µL含有、pH 8.0）
• テトラサイクリン1 mL（10 mg⁄mL水溶液）
• One Shot™ Stbl3™ ケミカルコンピテント大腸菌（カタログ番号C737303）：Stbl3™細胞21 X 50 µL、S.O.C.中6 mL培地とpUC19コントロールDNA 50 µL（10 pg⁄µL）
• pENTR™ Gusポジティブコントロールプラスミド

保管
• ベクター：-20℃
• テトラサイクリン：-20℃（光から保護してください）
• One Shot™ Stbl3™ケミカルコンピテント大腸菌：-80℃
• pENTR™ Gusポジティブコントロール：-20℃

よくあるご質問（FAQ）

Can I perform the single-step protocol for the BP/LR Clonase reaction using BP Clonase enzyme and LR Clonase enzyme instead of BP Clonase II enzyme and LR Clonase II enzyme?

In the single-step protocol for the BP/LR Clonase reaction, we would not recommend substituting the BP Clonase II/LR Clonase II enzymes with BP Clonase /LR Clonase enzymes as this would result in very low recombination efficiency.

Do you have a recommended single-step protocol for BP/LR recombination?

Yes, we have come up with a single-step protocol for BP/LR Clonase reaction (http://www.thermofisher.com/us/en/home/life-science/cloning/gateway-cloning.html#1), where DNA fragments can be cloned into Destination vectors in a single step reaction, allowing you to save time and money.

How can I move my gene of interest from a Gateway-adapted expression clone to a new Destination vector as I have lost the entry clone?

We would recommend performing a BP reaction with a Donor vector in order to obtain an entry clone. This entry clone can then be used in an LR reaction with the Destination vector to obtain the new expression clone.

Can I purchase the 5X LR Clonase buffer or 5X BP Clonase buffer separately?

We do not offer the 5X LR Clonase buffer and 5X BP Clonase buffer as standalone products. They are available as part of the enzyme kits.

Do you offer Gateway vectors for expression in plants?

We do not offer any Gateway vectors for expression in plants.

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引用および参考文献 (2)

引用および参考文献
Abstract
Endothelial cell surface F1-F0 ATP synthase is active in ATP synthesis and is inhibited by angiostatin.
Authors:Moser TL, Kenan DJ, Ashley TA, Roy JA, Goodman MD, Misra UK, Cheek DJ, Pizzo SV
Journal:Proc Natl Acad Sci U S A
PubMed ID:11381144
'Angiostatin blocks tumor angiogenesis in vivo, almost certainly through its demonstrated ability to block endothelial cell migration and proliferation. Although the mechanism of angiostatin action remains unknown, identification of F(1)-F(O) ATP synthase as the major angiostatin-binding site on the endothelial cell surface suggests that ATP metabolism may play a role ... More
Characterization of peroxisomal Pex5p from rat liver. Pex5p in the Pex5p-Pex14p membrane complex is a transmembrane protein.
Authors:Gouveia AM, Reguenga C, Oliveira ME, Sa-Miranda C, Azevedo JE
Journal:J Biol Chem
PubMed ID:10889202
Pex5p is the receptor for the vast majority of peroxisomal matrix proteins. Here, we show that about 15% of rat liver Pex5p is found in the peroxisomal fraction representing 0.06% of total peroxisomal protein. This population of Pex5p displays all the characteristics of an intrinsic membrane protein. Protease protection assays ... More