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Bac-to-Bac™ HBM TOPO™ Secreted Expression System
Bac-to-Bacバキュロウイルス発現は、昆虫細胞における高レベルのタンパク質発現のためのバキュロウイルス生成の効率的な方法です。これは、昆虫細胞の相同組換えではなく、E. coliにおける部位特異的転移による組換えウイルスの生成に依存しています。pFastBac HBM TOPO発現システムの特長：•分泌タンパク質の発現— Bac-to-Bac詳細を見る
| 製品番号（カタログ番号） | 数量 |
|---|---|
| A11339 | 20反応 |
製品番号（カタログ番号） A11339
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570,400
Each
数量:
20反応
Bac-to-Bacバキュロウイルス発現は、昆虫細胞における高レベルのタンパク質発現のためのバキュロウイルス生成の効率的な方法です。これは、昆虫細胞の相同組換えではなく、E. coliにおける部位特異的転移による組換えウイルスの生成に依存しています。pFastBac HBM TOPO発現システムの特長：
•分泌タンパク質の発現— Bac-to-Bac HBM TOPOベクターには、分泌タンパク質発現を可能にするハニービーメリチン（HBM）分泌シグナルが含まれます。分泌シグナルがないと糖タンパク質をグリコシル化できないため、このベクターは糖タンパク質の発現に推奨されます。
•柔軟性— Bac-to-Bac HBM TOPOベクターには、TEV切断部位を持つC末端Hisタグが含まれており、ニッケルキレート樹脂（Invitrogen ProBond Purification Systemなど）を用いたHisタグ標識タンパク質の精製や、Invitrogen AcTEVプロテアーゼを用いた天然タンパク質の生成を容易に行えます。
• 高速クローニング、簡単なスクリーニング— Blunt TOPOクローニングテクノロジーにより、5分で平滑端末PCR産物をpFastBac TOPOベクターにクローニングできます。さらに、pFastBac TOPO発現キットには、他の標準的なクローニング株と比べて時間が2倍短縮されているため、アンピシリン選択プレートでプレーティングしてから8時間後のコロニーの可視化を可能にするMach1-T1R E. coliが付属しています。TOPOクローニングの利点の詳細を見る›
• ExpiFectamine SFトランスフェクション試薬による高いトランスフェクション効率— Bac-to-Bac TOPO発現キットには、迅速で柔軟なプロトコルを用いた昆虫細胞への効率的なDNAトランスフェクションを実現する次世代のExpiFectamine SFトランスフェクション試薬が付属しています。この試薬の詳細を見る›
• 時間を節約する発現バクミド— Bac-to-Bacシステムで、pFastBacベクターの発現カセットがDH10Bac E. coliコンピテント細胞の親バクミドと再結合し、発現バクミドを形成します。その後、バクミドを昆虫細胞にトランスフェクションして組換え型バキュロウイルス粒子を産生します。
•簡単なコロニースクリーニング—DH10Bac大腸菌の親バクミドは、lacZa遺伝子のセグメントを含みます。lacZa遺伝子は、発現カセットがバクミドに転移すると破壊され、組換えコロニーの同定を容易にする組換え体の青／白選択が可能になります。
• 高タンパク質発現— pFastBacベクターは、強力なポリヘドリンプロモーターを使用して、Sf9、Sf21、High Five細胞などのさまざまな昆虫細胞株で高レベルの発現を生成します。
•分泌タンパク質の発現— Bac-to-Bac HBM TOPOベクターには、分泌タンパク質発現を可能にするハニービーメリチン（HBM）分泌シグナルが含まれます。分泌シグナルがないと糖タンパク質をグリコシル化できないため、このベクターは糖タンパク質の発現に推奨されます。
•柔軟性— Bac-to-Bac HBM TOPOベクターには、TEV切断部位を持つC末端Hisタグが含まれており、ニッケルキレート樹脂（Invitrogen ProBond Purification Systemなど）を用いたHisタグ標識タンパク質の精製や、Invitrogen AcTEVプロテアーゼを用いた天然タンパク質の生成を容易に行えます。
• 高速クローニング、簡単なスクリーニング— Blunt TOPOクローニングテクノロジーにより、5分で平滑端末PCR産物をpFastBac TOPOベクターにクローニングできます。さらに、pFastBac TOPO発現キットには、他の標準的なクローニング株と比べて時間が2倍短縮されているため、アンピシリン選択プレートでプレーティングしてから8時間後のコロニーの可視化を可能にするMach1-T1R E. coliが付属しています。TOPOクローニングの利点の詳細を見る›
• ExpiFectamine SFトランスフェクション試薬による高いトランスフェクション効率— Bac-to-Bac TOPO発現キットには、迅速で柔軟なプロトコルを用いた昆虫細胞への効率的なDNAトランスフェクションを実現する次世代のExpiFectamine SFトランスフェクション試薬が付属しています。この試薬の詳細を見る›
• 時間を節約する発現バクミド— Bac-to-Bacシステムで、pFastBacベクターの発現カセットがDH10Bac E. coliコンピテント細胞の親バクミドと再結合し、発現バクミドを形成します。その後、バクミドを昆虫細胞にトランスフェクションして組換え型バキュロウイルス粒子を産生します。
•簡単なコロニースクリーニング—DH10Bac大腸菌の親バクミドは、lacZa遺伝子のセグメントを含みます。lacZa遺伝子は、発現カセットがバクミドに転移すると破壊され、組換えコロニーの同定を容易にする組換え体の青／白選択が可能になります。
• 高タンパク質発現— pFastBacベクターは、強力なポリヘドリンプロモーターを使用して、Sf9、Sf21、High Five細胞などのさまざまな昆虫細胞株で高レベルの発現を生成します。
研究用にのみ使用できます。診断用には使用いただけません。
仕様
クローニング法Blunt TOPO™
発現メカニズム細胞ベースの発現
製品ラインBac-to-Bac、TOPO
タンパク質タグHisタグ（x 6）
数量20反応
選択剤（真核生物）なし
発現システムバキュロウイルス
プロモーターポリヘドリン
タイプ分泌発現システム
Unit SizeEach
組成および保存条件
Bac-to-Bac HBM TOPO分泌発現システム：
•20 TOPOクローニング反応用ベクターキット、-20℃で保管
–、C末端TEV切断部位を含むpFastBac/HBM-TOPOベクター、およびHisタグ
–pFastBac 1-Gusコントロールプラスミド（コントロール発現ベクター）
–その他のキット試薬：10X PCR、dNTPミックス、塩溶液、滅菌水、コントロールPCRテンプレート、ポリヘドリンフォワードプライマー、SV40 pAリバースプライマー
• 20反応用One Shot Mach1-T1Rケミカルコンピテント大腸菌（20 x 50 µL）、-80℃で保管
• 20反応用MAX Efficiency DH10Bacコンピテント大腸菌（各5 x 0.1 mLのキット4個）、-80℃で保管
• ExpiFectamine SF Transfection Reagent（1 mL）、4℃で保管すること。凍結しないでください
•20 TOPOクローニング反応用ベクターキット、-20℃で保管
–、C末端TEV切断部位を含むpFastBac/HBM-TOPOベクター、およびHisタグ
–pFastBac 1-Gusコントロールプラスミド（コントロール発現ベクター）
–その他のキット試薬：10X PCR、dNTPミックス、塩溶液、滅菌水、コントロールPCRテンプレート、ポリヘドリンフォワードプライマー、SV40 pAリバースプライマー
• 20反応用One Shot Mach1-T1Rケミカルコンピテント大腸菌（20 x 50 µL）、-80℃で保管
• 20反応用MAX Efficiency DH10Bacコンピテント大腸菌（各5 x 0.1 mLのキット4個）、-80℃で保管
• ExpiFectamine SF Transfection Reagent（1 mL）、4℃で保管すること。凍結しないでください