Amplex™ Acetylcholine/Acetlycholinesterase Assay Kit
Amplex™ Acetylcholine/Acetlycholinesterase Assay Kit
Invitrogen™

Amplex™ Acetylcholine/Acetlycholinesterase Assay Kit

Amplex™ Redアセチルコリン/アセチルコリンエステラーゼアッセイキットは、蛍光マイクロプレートリーダーまたはフルオロメーターでアセチルコリンエステラーゼ(AChE)活性を検出する超高感度の手法を提供します。蛍光マイクロプレートアッセイの全製品ラインアップをご覧ください。•1時間で0.002 U/mLという低活性レベルのAChEを検出できます• 過剰なAChEを使用して、0.3詳細を見る
製品番号(カタログ番号)数量
A12217500 Assays
製品番号(カタログ番号) A12217
価格(JPY)
88,700
Each
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数量:
500 Assays
Amplex™ Redアセチルコリン/アセチルコリンエステラーゼアッセイキットは、蛍光マイクロプレートリーダーまたはフルオロメーターでアセチルコリンエステラーゼ(AChE)活性を検出する超高感度の手法を提供します。

蛍光マイクロプレートアッセイの全製品ラインアップをご覧ください

•1時間で0.002 U/mLという低活性レベルのAChEを検出できます
• 過剰なAChEを使用して、0.3 µMという低濃度のアセチルコリンを検出できます
• 0.3 µM~100 µMのアセチルコリン検出範囲を実現します
• 複数のタイムポイントでの測定が可能なフォーマットです
• 自己蛍光干渉を最小限に抑えるように設計されています

過酸化水素用の高感度蛍光プローブである10アセチル-3,7ジヒドロキシフェノキサジン(Amplex™ Red試薬)を使用して、間接的にAChE活性をモニタリングします。AChEはアセチルコリン基質をコリンに変換します。これがコリンオキシダーゼによって酸化され、ベタインおよび過酸化水素になります。西洋ワサビペルオキシダーゼが存在する場合、過酸化水素は1:1の化学量論比でAmplex™ Red試薬と反応し、高蛍光性産物であるレゾルフィンを生成します。

レゾルフィンの最大吸収波長と最大蛍光波長はそれぞれ571 nmと585 nmであるため、大部分の生物学的サンプルでは、自己蛍光による干渉はほとんど発生しません。デンキウナギから精製されたAChEを用いた実験では、Amplex™ Redアセチルコリン/アセチルコリンエステラーゼアッセイキットは、1時間の反応時間で、0.002 U/mLという低レベルのAChEを検出できています。また、アッセイの過剰なAChEを利用することで、0.3 µMという低レベルのアセチルコリンを検出することもできます。アセチルコリンの検出範囲は、0.3 µM~100 µMです。

Amplex™ Redアッセイは、幅広い研究にご利用いただけます
検証済みのAmplex™ Redアッセイは幅広く用意されており、細胞シグナル伝達および脂質、神経生物学、炎症および免疫機能、代謝の研究にご利用いただけます。また、より高い感度と明るい蛍光性を提供する第二世代試薬であるAmplex™ UltraRed試薬(カタログ番号A36006)や、Amplex™ Red/UltraRed停止試薬も提供しています(カタログ番号A33855)。Amplex™ Red/UltraRed停止試薬を使用することで、ユーザーが決定した時点で蛍光シグナル生成反応を終了させることができるため、利便性と制御性が提供されます。停止試薬を添加してから少なくとも3時間は、蛍光シグナルは安定を保ちます。カスタムアッセイの設計およびパッケージもご利用いただけます。
研究用にのみ使用できます。診断用には使用いただけません。
仕様
検出法蛍光強度
数量500 Assays
出荷条件室温
基質特性分子基質
基質タイプHRP(西洋ワサビペルオキシダーゼ)基質、アセチルコリンエステラーゼ基質
標的酵素アセチルコリンエステラーゼ
使用対象(アプリケーション)アセチルコリン/アセチルコリンエステラーゼアッセイ
使用対象 (装置)蛍光マイクロプレートリーダー
製品ラインAmplex
製品タイプアセチルコリン⁄アセチルコリンエステラーゼアッセイ
Unit SizeEach
組成および保存条件
フリーザー(-5℃~-30℃)に保存し、遮光してください。

よくあるご質問(FAQ)

I'm using an Amplex Red kit, the reagent changes color to pink almost immediately in my own Krebs-Ringer buffer but not in HBSS. Why is this?

The components of Krebs-Ringer buffer (salts) should not cause oxidation of the Amplex reagent (which, in the presence of peroxidase and H2O2 oxidizes to resorufin, which is pink in color and fluorescent). Try water alone (the water used to make the Krebs-Ringer buffer). Since Hank's Buffered Saline Solution is typically purchased rather than made in the lab, it likely would not have the same contaminant. Another option is to degas the buffer prior to use to removed dissolved oxygen radicals.

Find additional tips, troubleshooting help, and resources within our Cell Analysis Support Center.

Can Amplex Red Assays be performed using cell lysates?

This is not recommended. The presence of endogenous proteases can complicate the assay by degrading the horseradish peroxidase (HRP). Endogenous peroxidases and antioxidants can modify the H2O2 required for the reaction, competing with HRP (and catalase) for the substrate.

The Amplex Red Assays are best performed with either purified enzymes or extracted H2O2 in a defined buffer system, extracellular solutions or body fluids (media, serum, etc.) that do not exhibit high levels of endogenous protease or oxidase activity and do not contain antioxidants.

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引用および参考文献 (8)

引用および参考文献
Abstract
G-CSF rescues the memory impairment of animal models of Alzheimer's disease.
Authors:Tsai KJ, Tsai YC, Shen CK,
Journal:J Exp Med
PubMed ID:17517969
'Most of the current clinical treatments for Alzheimer''s disease (AD) are largely symptomatic and can have serious side effects. We have tested the feasibility of using the granulocyte colony-stimulating factor (G-CSF), which is known to mobilize hematopoietic stem cells (HSCs) from the bone marrow into the peripheral blood, as a ... More
The effects of anticholinergic insecticides on human mesenchymal stem cells.
Authors:Hoogduijn MJ, Rakonczay Z, Genever PG
Journal:Toxicol Sci
PubMed ID:16960032
'Mesenchymal stem cells (MSCs) are located primarily in the bone marrow and are characterized by their capacity to differentiate into mesenchymal lineages such as bone, fat, and cartilage in response to appropriate signals. Several signaling mechanisms act to control MSC survival, proliferation, and differentiation, and failure or disruption of these ... More
Enhanced purinergic contractile responses and P2X1 receptor expression in detrusor muscle during cycles of hypoxia-glucopenia and reoxygenation.
Authors:Elliott RA, Tonnu A, Ghaffar N, Taylor AH, Tincello DG, Norman RI,
Journal:
PubMed ID:23975903
'Bladders from patients with detrusor overactivity have an increased atropine-resistant contractile response to nerve stimulation. The bladder has also been shown to be very susceptible to hypoxia-glucopenia and reperfusion injury, leading to the hypothesis that episodes of hypoxia-glucopenia and reoxygenation result in increased atropine-resistant responses to nerve stimulation in the ... More
Role of pancreatic cancer-derived exosomes in salivary biomarker development.
Authors:Lau C, Kim Y, Chia D, Spielmann N, Eibl G, Elashoff D, Wei F, Lin YL, Moro A, Grogan T, Chiang S, Feinstein E, Schafer C, Farrell J, Wong DT,
Journal:
PubMed ID:23880764
'Recent studies have demonstrated that discriminatory salivary biomarkers can be readily detected upon the development of systemic diseases such as pancreatic cancer, breast cancer, lung cancer, and ovarian cancer. However, the utility of salivary biomarkers for the detection of systemic diseases has been undermined due to the absence of the ... More
Butyrate enemas enhance both cholinergic and nitrergic phenotype of myenteric neurons and neuromuscular transmission in newborn rat colon.
Authors:Suply E, de Vries P, Soret R, Cossais F, Neunlist M,
Journal:Am J Physiol Gastrointest Liver Physiol
PubMed ID:22492692
'Postnatal changes in the enteric nervous system (ENS) are involved in the establishment of colonic motility. In adult rats, butyrate induced neuroplastic changes in the ENS, leading to enhanced colonic motility. Whether butyrate can induce similar changes during the postnatal period remains unknown. Enemas (Na-butyrate) were performed daily in rat ... More