Amplex™ Red Sphingomyelinase Assay Kit
Amplex™ Red Sphingomyelinase Assay Kit
Citations & References (12)
Invitrogen™

Amplex™ Red Sphingomyelinase Assay Kit

Amplex™ Redスフィンゴミエリナーゼアッセイキットは、蛍光マイクロプレートリーダーまたはフルオロメーターを使用して非常に低濃度のスフィンゴミエリナーゼを検出する高感度で迅速かつシンプルな蛍光測定法を提供します。蛍光マイクロプレートアッセイの全製品ラインアップをご覧ください。•200 µLのアッセイボリュームで80 µU/mLという低活性レベルのスフィンゴミエリナーゼを検出できます• 複数のタイムポイントでの測定が可能なフォーマットです• 自己蛍光干渉を最小限に抑えるように設計されていますこの酵素結合アッセイでは、過酸化水素用の高感度蛍光プローブである10アセチル-3,7ジヒドロキシフェノキサジン詳細を見る
テクニカルサポートオーダーサポート
製品番号（カタログ番号）数量
A12220500 Assays
製品番号（カタログ番号） A12220
価格（JPY）
53,200
キャンペーン価格
Ends: 27-Mar-2026
88,700
割引額 35,500 (40%)
Each
お問い合わせください ›
数量:
500 Assays
Amplex™ Redスフィンゴミエリナーゼアッセイキットは、蛍光マイクロプレートリーダーまたはフルオロメーターを使用して非常に低濃度のスフィンゴミエリナーゼを検出する高感度で迅速かつシンプルな蛍光測定法を提供します。

蛍光マイクロプレートアッセイの全製品ラインアップをご覧ください。

•200 µLのアッセイボリュームで80 µU/mLという低活性レベルのスフィンゴミエリナーゼを検出できます
• 複数のタイムポイントでの測定が可能なフォーマットです
• 自己蛍光干渉を最小限に抑えるように設計されています

この酵素結合アッセイでは、過酸化水素用の高感度蛍光プローブである10アセチル-3,7ジヒドロキシフェノキサジン（Amplex™ Red試薬）を使用して、間接的にスフィンゴミエリナーゼ活性をモニタリングします。スフィンゴミエリナーゼは、スフィンゴミエリンを加水分解して、セラミドおよびホスファチジルコリンを産生します。アルカリホスファターゼを添加すると、ホスホコリンが加水分解されてコリンが形成されます。コリンはコリンオキシダーゼによって酸化され、ベタインと過酸化水素を形成します。西洋ワサビペルオキシダーゼが存在する場合、過酸化水素は1：1の化学量論比でAmplex™ Red試薬と反応し、高蛍光性産物であるレゾルフィンを生成します。

レゾルフィンの最大吸光波長と最大蛍光波長はそれぞれ571 nmと585 nmであるため、大部分の生物学的サンプルでは、自己蛍光による干渉はほとんど発生しません。

Amplex™ Redアッセイは、幅広い研究にご利用いただけます
検証済みのAmplex™ Redアッセイは幅広く用意されており、細胞シグナル伝達および脂質、神経生物学、炎症および免疫機能、代謝の研究にご利用いただけます。また、より高い感度と明るい蛍光性を提供する第二世代試薬であるAmplex™ UltraRed試薬（カタログ番号A36006）や、Amplex™ Red/UltraRed停止試薬も提供しています（カタログ番号A33855）。Amplex™ Red/UltraRed停止試薬を使用することで、ユーザーが決定した時点で蛍光シグナル生成反応を終了させることができるため、利便性と制御性が提供されます。停止試薬を添加してから少なくとも3時間は、蛍光シグナルは安定を保ちます。カスタムアッセイの設計およびパッケージもご利用いただけます。
研究用にのみ使用できます。診断用には使用いただけません。
仕様
検出法蛍光
染色剤タイプその他の標識または色素
フォーマット96-ウェルプレート
数量500 Assays
出荷条件湿氷
使用対象（アプリケーション）スフィンゴミエリナーゼアッセイ
使用対象 (装置)フルオロメータ, マイクロプレートリーダー
製品ラインAmplex
製品タイプRed Sphingomyelinase Assay Kit
Unit SizeEach
組成および保存条件
フリーザー（-5℃～-30℃）に保存し、遮光してください。

よくあるご質問（FAQ）

I'm using an Amplex Red kit, the reagent changes color to pink almost immediately in my own Krebs-Ringer buffer but not in HBSS. Why is this?

The components of Krebs-Ringer buffer (salts) should not cause oxidation of the Amplex reagent (which, in the presence of peroxidase and H2O2 oxidizes to resorufin, which is pink in color and fluorescent). Try water alone (the water used to make the Krebs-Ringer buffer). Since Hank's Buffered Saline Solution is typically purchased rather than made in the lab, it likely would not have the same contaminant. Another option is to degas the buffer prior to use to removed dissolved oxygen radicals.

Find additional tips, troubleshooting help, and resources within our Cell Analysis Support Center.

Can Amplex Red Assays be performed using cell lysates?

This is not recommended. The presence of endogenous proteases can complicate the assay by degrading the horseradish peroxidase (HRP). Endogenous peroxidases and antioxidants can modify the H2O2 required for the reaction, competing with HRP (and catalase) for the substrate.

The Amplex Red Assays are best performed with either purified enzymes or extracted H2O2 in a defined buffer system, extracellular solutions or body fluids (media, serum, etc.) that do not exhibit high levels of endogenous protease or oxidase activity and do not contain antioxidants.

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引用および参考文献 (12)

引用および参考文献
Abstract
Involvement of the acid sphingomyelinase pathway in uva-induced apoptosis.
Authors:Zhang Y, Mattjus P, Schmid PC, Dong Z, Zhong S, Ma WY, Brown RE, Bode AM, Schmid HH, Dong Z
Journal:J Biol Chem
PubMed ID:11278294
'The sphingomyelin-ceramide pathway is an evolutionarily conserved ubiquitous signal transduction system that regulates many cell functions including apoptosis. Sphingomyelin (SM) is hydrolyzed to ceramide by different sphingomyelinases. Ceramide serves as a second messenger in mediating cellular effects of cytokines and stress. In this study, we find that acid sphingomyelinase (SMase) ... More
Combination brain and systemic injections of AAV provide maximal functional and survival benefits in the Niemann-Pick mouse.
Authors:Passini MA, Bu J, Fidler JA, Ziegler RJ, Foley JW, Dodge JC, Yang WW, Clarke J, Taksir TV, Griffiths DA, Zhao MA, O'Riordan CR, Schuchman EH, Shihabuddin LS, Cheng SH
Journal:Proc Natl Acad Sci U S A
PubMed ID:17517638
'Niemann-Pick disease (NPD) is caused by the loss of acid sphingomyelinase (ASM) activity, which results in widespread accumulation of undegraded lipids in cells of the viscera and CNS. In this study, we tested the effect of combination brain and systemic injections of recombinant adeno-associated viral vectors encoding human ASM (hASM) ... More
Protection from high fat diet-induced increase in ceramide in mice lacking plasminogen activator inhibitor 1.
Authors:Shah C, Yang G, Lee I, Bielawski J, Hannun YA, Samad F,
Journal:J Biol Chem
PubMed ID:18359942
'Obesity increases the risk for metabolic and cardiovascular disease, and adipose tissue plays a central role in this process. Ceramide, the key intermediate of sphingolipid metabolism, also contributes to obesity-related disorders. We show that a high fat diet increased ceramide levels in the adipose tissues and plasma in C57BL/6J mice ... More
Counteracting suppression of CFTR and voltage-gated K+ channels by a bacterial pathogenic factor with the natural product tannic acid.
Authors:Ramu Y, Xu Y, Shin HG, Lu Z,
Journal:
PubMed ID:25313718
'Mutations in the cystic fibrosis transmembrane conductance regulator (CFTR) cause recurring bacterial infection in CF patients'' lungs. However, the severity of CF lung disease correlates poorly with genotype. Antibiotic treatment helps dramatically prolong patients'' life. The lung disease generally determines prognosis and causes most morbidity and mortality; early control of ... More
Ceramide upregulation causes pulmonary cell apoptosis and emphysema-like disease in mice.
Authors:Petrache I, Natarajan V, Zhen L, Medler TR, Richter AT, Cho C, Hubbard WC, Berdyshev EV, Tuder RM
Journal:Nat Med
PubMed ID:15852018
'Alveolar cell apoptosis is involved in the pathogenesis of emphysema, a prevalent disease primarily caused by cigarette smoking. We report that ceramide, a second messenger lipid, is a crucial mediator of alveolar destruction in emphysema. Inhibition of enzymes controlling de novo ceramide synthesis prevented alveolar cell apoptosis, oxidative stress and ... More
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