CorrectASE™ Enzyme

CorrectASE™酵素は、オリゴヌクレオチド合成エラーによるミスマッチを除去し、合成遺伝子や合成断片の変異を3分の1から10分の1に減らします。自作の遺伝子合成ワークフローにCorrectASE™酵素を導入することで、以下のことが可能になります。

•合成遺伝子や合成断片の変異数が減る
• スクリーニングするクローン数が、合成コンストラクトあたり10～16個ではなく、2～4個になるため、作業時間が短縮される
• スクリーニングするのが、10～16個の合成遺伝子ではなく、2～4個のクローンになるため、コストが削減される

不要な変異を防止
市販の合成オリゴヌクレオチドは合成中のエラー率が高く、ソースに応じて、300～1000塩基ごとに1つのエラーが生じます。これらのエラーは、遺伝子合成中のフレームシフト（欠失および挿入）およびミスマッチ変異を引き起こします。CorrectASE™酵素とインキュベーションすることで、両方のタイプの変異が除去されます。

CorrectASE™酵素とのインキュベーション操作は、オリゴヌクレオチドの最初のPCRアセンブリの後に導入されます。PCR産物は変性・再アニーリングされるため、どの変異も一致しません。CorrectASE™酵素は結果として生じるミスマッチに結合し、エラーの両方のDNA鎖3’に切れ目を入れます。酵素の3’-5’エキソヌクレアーゼ活性により、エラーが除去されます。次に、プルーフリーディングポリメラーゼを使用した最終的なPCRにより、修正された断片がアセンブルされるため、正しい配列を持つクローンが分離される可能性が高まります。受け取ったオリゴヌクレオチドの品質に応じて、スクリーニングする必要があるクローンは2～4個だけです。これに対して、修正ステップを含まないワークフローでは10～16個のクローンのスクリーニングが必要です。遺伝子合成ワークフローでCorrectASE™酵素を使用すると、作業時間とシーケンシングコストが削減されます。

研究用にのみ使用できます。ヒトまたは動物の治療または診断用には使用できません。