Amplex™ Red Neuraminidase (Sialidase) Assay Kit

Citations & References (10)

Invitrogen™

Amplex™ Red Neuraminidase (Sialidase) Assay Kit

製品番号（カタログ番号）	数量
A22178	400 Assays

製品番号（カタログ番号） A22178

価格（JPY）

88,700

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400 Assays

Amplex™ Red ノイラミニダーゼ／ノイラミニダーゼアッセイキットは、蛍光マイクロプレートリーダーまたはフルオロメーターのいずれかを使用して、血清および精製された酵素系のノイラミニダーゼ活性を検出する高感度でシンプルな手法を提供します。

蛍光マイクロプレートアッセイの全製品ラインアップをご覧ください。

•0.2 mU/mLという低ベルのノイラミニダーゼを検出できます
• 複数のタイムポイントでの測定が可能なフォーマットです
• 自己蛍光干渉を最小限に抑えるように設計されています
• 血清などの生体サンプルにおけるノイラミニダーゼ活性を検出します

ノイラミニダーゼ（シアリダーゼとも呼ばれる）は、多糖鎖上の末端シアル酸残基を加水分解する非常に一般的な酵素で、多くの場合、ガラクトース残基を露出します。ノイラミニダーゼは、標的細胞の浸潤とその後のインフルエンザウイルスの複製において重要な役割を果たし、インフルエンザの医薬品開発における重要な標的となっています。

Amplex™ Red ノイラミニダーゼ／ノイラミニダーゼアッセイキットは、ノイラミニダーゼ活性を検出する超高感度の手法を提供します。このアッセイは、Amplex™ Red試薬を使用して、脱シアル酸化ガラクトースのガラクトースオキシダーゼ酸化によって生成された過酸化水素（ノイラミニダーゼの作用の最終的な結果）を検出します。その後この過酸化水素は、西洋ワサビペルオキシダーゼ（HRP）が存在する環境において1：1の化学量論比でAmplex™ Red試薬と反応し、赤色蛍光の酸化産物であるレゾルフィンを生成します。

レゾルフィンの最大吸光波長と最大蛍光波長はそれぞれ571 nmと585 nmであるため、大部分の生物学的サンプルでは、自己蛍光による干渉はほとんど発生しません。

Amplex™ Redアッセイは、幅広い研究にご利用いただけます
検証済みのAmplex™ Redアッセイは幅広く用意されており、細胞シグナル伝達および脂質、神経生物学、炎症および免疫機能、代謝の研究にご利用いただけます。また、より高い感度と明るい蛍光性を提供する第二世代試薬であるAmplex™ UltraRed試薬（カタログ番号A36006）や、Amplex™ Red/UltraRed停止試薬も提供しています（カタログ番号A33855）。Amplex™ Red/UltraRed停止試薬を使用することで、ユーザーが決定した時点で蛍光シグナル生成反応を終了させることができるため、利便性と制御性が提供されます。停止試薬を添加してから少なくとも3時間は、蛍光シグナルは安定を保ちます。カスタムアッセイの設計およびパッケージもご利用いただけます。

研究用にのみ使用できます。診断用には使用いただけません。

検出法蛍光

染色剤タイプその他の標識または色素

フォーマットチューブ、96ウェルプレート

数量400 Assays

出荷条件室温

使用対象（アプリケーション）ノイラミニダーゼ（シアルダーゼ）アッセイ

使用対象 (装置)マイクロプレートリーダー, 分光光度計, フルオロメータ

製品ラインAmplex

製品タイプRed Neuraminidase (Sialidase) Assay Kit

Unit SizeEach

組成および保存条件

フリーザー（-5℃～-30℃）に保存し、遮光してください。

よくあるご質問（FAQ）

I'm using an Amplex Red kit, the reagent changes color to pink almost immediately in my own Krebs-Ringer buffer but not in HBSS. Why is this?

The components of Krebs-Ringer buffer (salts) should not cause oxidation of the Amplex reagent (which, in the presence of peroxidase and H₂O₂ oxidizes to resorufin, which is pink in color and fluorescent). Try water alone (the water used to make the Krebs-Ringer buffer). Since Hank's Buffered Saline Solution is typically purchased rather than made in the lab, it likely would not have the same contaminant. Another option is to degas the buffer prior to use to removed dissolved oxygen radicals.

Find additional tips, troubleshooting help, and resources within our Cell Analysis Support Center.

Can Amplex Red Assays be performed using cell lysates?

This is not recommended. The presence of endogenous proteases can complicate the assay by degrading the horseradish peroxidase (HRP). Endogenous peroxidases and antioxidants can modify the H₂O₂ required for the reaction, competing with HRP (and catalase) for the substrate.

The Amplex Red Assays are best performed with either purified enzymes or extracted H₂O₂ in a defined buffer system, extracellular solutions or body fluids (media, serum, etc.) that do not exhibit high levels of endogenous protease or oxidase activity and do not contain antioxidants.

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How does the Amplex Red Neuraminidase (Sialidase) Assay kit detect neuramimidase activity?

The assay utilizes Amplex Red to detect H₂O₂ generated by galactose oxidase oxidation of desialiated galactose, the result of neuraminidase activity. In the presence of HRP, H₂O₂ reacts with a 1:1 stiochiometry with Amplex Red reagent to generate the red-fluorescent oxidation product, resorufin.

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引用および参考文献 (10)

引用および参考文献

Abstract

Filifactor alocis has virulence attributes that can enhance its persistence under oxidative stress conditions and mediate invasion of epithelial cells by porphyromonas gingivalis.

Authors:Aruni AW, Roy F, Fletcher HM,

Journal:Infect Immun

PubMed ID:21825062

'Filifactor alocis, a Gram-positive anaerobic rod, is one of the most abundant bacteria identified in the periodontal pockets of periodontitis patients. There is a gap in our understanding of its pathogenicity and ability to interact with other periodontal pathogens. To evaluate the virulence potential of F. alocis and its ability ... More

VimA-dependent modulation of acetyl coenzyme A levels and lipid A biosynthesis can alter virulence in Porphyromonas gingivalis.

Authors:Aruni AW, Lee J, Osbourne D, Dou Y, Roy F, Muthiah A, Boskovic DS, Fletcher HM,

Journal:Infect Immun

PubMed ID:22144476

'The Porphyromonas gingivalis VimA protein has multifunctional properties that can modulate several of its major virulence factors. To further characterize VimA, P. gingivalis FLL406 carrying an additional vimA gene and a vimA-defective mutant in a different P. gingivalis genetic background were evaluated. The vimA-defective mutant (FLL451) in the P. gingivalis ... More

Preterm human milk contains a large pool of latent TGF-ß, which can be activated by exogenous neuraminidase.

Authors:Namachivayam K, Blanco CL, Frost BL, Reeves AA, Jagadeeswaran R, MohanKumar K, Safarulla A, Mandal P, Garzon SA, Raj JU, Maheshwari A,

Journal:Am J Physiol Gastrointest Liver Physiol

PubMed ID:23558011

'Human milk contains substantial amounts of transforming growth factor (TGF)-ß, particularly the isoform TGF-ß2. We previously showed in preclinical models that enterally administered TGF-ß2 can protect against necrotizing enterocolitis (NEC), an inflammatory bowel necrosis of premature infants. In this study we hypothesized that premature infants remain at higher risk of ... More

Resistance of influenza viruses to neuraminidase inhibitors--a review.

Authors:McKimm-Breschkin JL

Journal:Antiviral Res

PubMed ID:10930642

Neuraminidase inhibition and viral chemotherapy.

Authors:Haskell TH, Peterson FE, Watson D, Plessas NR, Culbertson T

Journal:J Med Chem

PubMed ID:4318072

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