Amplex™ Red Hydrogen Peroxide/Peroxidase Assay Kit

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Amplex™ Red Hydrogen Peroxide/Peroxidase Assay Kit

Amplex™ Red過酸化水素／ペルオキシダーゼアッセイキットには、Amplex™ Red試薬（10-acetyl-3,7-dihydroxyphenoxazine）を使用して、過酸化水素（H2O2）またはペルオキシダーゼ活性を検出する高感度なワンステップアッセイが含まれています。Amplex™詳細を見る

製品番号（カタログ番号）	数量
A22188	500 Assays

製品番号（カタログ番号） A22188

価格（JPY）

83,100

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500 Assays

Amplex™ Red過酸化水素／ペルオキシダーゼアッセイキットには、Amplex™ Red試薬（10-acetyl-3,7-dihydroxyphenoxazine）を使用して、過酸化水素（H₂O₂）またはペルオキシダーゼ活性を検出する高感度なワンステップアッセイが含まれています。Amplex™ Red試薬を西洋ワサビペルオキシダーゼ（HRP）と組み合わせることで、細胞などの生物学的サンプルから放出された、あるいは酵素結合反応によって生成されたH₂O₂を検出します。さらに、Amplex™ Red試薬はH₂O₂が過剰な場合に、ペルオキシダーゼ活性に対する超高感度アッセイとしても使用できます。ペルオキシダーゼが存在する場合、 Amplex™ Red試薬はH₂O₂と1対1の化学量論比で反応し、赤色蛍光酸化生成物であるレゾルフィンを産生します。レゾルフィンの最大励起波長と最大発光波長はそれぞれ約571 nmおよび585 nmであり、吸光係数が高いため（58,000 ± 5,000 cm–¹M–¹）、蛍光測定法または分光光度法でアッセイを行えます。の反応は、100 µL容量または1 x 10–5 U/mLのHRP内のわずか10ピコモルのH₂O₂を検出するために使用されます。

Amplex™ Red過酸化水素／ペルオキシダーゼアッセイキットの仕様：
• 反応生成物レゾルフィンの励起／発光：約571/585 nm
• 過酸化水素またはペルオキシダーゼ活性をin vitroで検出する高感度なワンステップアッセイを行えます
•100 μLのアッセイ容量内のわずか10ピコモルの過酸化水素、または10 μU/mLの西洋ワサビペルオキシダーゼ活性を検出できます
• アッセイあたり100 μLの反応液量を使用する約500回分のアッセイに十分な試薬を提供します
• 96ウェル蛍光または吸光マイクロプレートリーダー用に設計されていますが、その他の容量、蛍光高度計、分光光度計にも簡単に適応できます

酸化酵素用基質の詳細を見る
これらの製品の詳細については、Molecular Probes™ハンドブックのAmplex Red Kitなどの酸化酵素用基質（英語）—セクション10.5を参照してください。

研究用途にのみご使用ください。ヒトまたは動物の治療もしくは診断目的には使用できません。

研究用にのみ使用できます。診断用には使用いただけません。

検出法蛍光

染色剤タイプその他の標識または色素

フォーマットチューブ、96ウェルプレート

数量500 Assays

出荷条件室温

使用対象（アプリケーション）過酸化水素／ペルオキシダーゼアッセイ

使用対象 (装置)マイクロプレートリーダー, 分光光度計, フルオロメータ

製品ラインAmplex

製品タイプRed Hydrogen Peroxide/Peroxidase Assay Kit

Unit SizeEach

組成および保存条件

フリーザー（-5℃～-30℃）に保存し、遮光してください。

よくあるご質問（FAQ）

I'm using an Amplex Red kit, the reagent changes color to pink almost immediately in my own Krebs-Ringer buffer but not in HBSS. Why is this?

The components of Krebs-Ringer buffer (salts) should not cause oxidation of the Amplex reagent (which, in the presence of peroxidase and H₂O₂ oxidizes to resorufin, which is pink in color and fluorescent). Try water alone (the water used to make the Krebs-Ringer buffer). Since Hank's Buffered Saline Solution is typically purchased rather than made in the lab, it likely would not have the same contaminant. Another option is to degas the buffer prior to use to removed dissolved oxygen radicals.

Find additional tips, troubleshooting help, and resources within our Cell Analysis Support Center.

Can I use the Amplex Red Hydrogen Peroxide/Peroxidase Assay Kit (Cat. No. A22188) to measure H2O2 from frozen cell culture supernatant?

We recommend using fresh samples that have not been frozen since H2O2 degrades over time and more readily in diluted form or in solutions that contain metal ions or natural antioxidants. For assaying cell culture supernatant, we would recommend analyzing samples as soon as possible.

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Can Amplex Red Assays be performed using cell lysates?

This is not recommended. The presence of endogenous proteases can complicate the assay by degrading the horseradish peroxidase (HRP). Endogenous peroxidases and antioxidants can modify the H₂O₂ required for the reaction, competing with HRP (and catalase) for the substrate.

The Amplex Red Assays are best performed with either purified enzymes or extracted H₂O₂ in a defined buffer system, extracellular solutions or body fluids (media, serum, etc.) that do not exhibit high levels of endogenous protease or oxidase activity and do not contain antioxidants.

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引用および参考文献 (62)

引用および参考文献

Abstract

Roles for the human ATP-dependent Lon protease in mitochondrial DNA maintenance.

Authors:Lu B,Yadav S,Shah PG,Liu T,Tian B,Pukszta S,Villaluna N,Kutejová E,Newlon CS,Santos JH,Suzuki CK

Journal:The Journal of biological chemistry

PubMed ID:17420247

Similar transition states mediate the Q-cycle and superoxide production by the cytochrome bc1 complex.

Authors:Forquer I,Covian R,Bowman MK,Trumpower BL,Kramer DM

Journal:The Journal of biological chemistry

PubMed ID:17008316

Overexpression of Na(+)/K (+)-ATPase parallels the increase in sodium transport and potassium recycling in an in vitro model of proximal tubule cellular ageing.

Authors:Silva E, Gomes P, Soares-da-Silva P,

Journal:J Membr Biol

PubMed ID:17334838

'Na(+)/K(+)-ATPase plays a key role in the transport of Na(+) throughout the nephron, but ageing appears to be accompanied by changes in the regulation and localization of the pump. In the present study, we examined the effect of in vitro cell ageing on the transport of Na(+) and K(+) ions ... More

Reactive oxygen species production via NADPH oxidase mediates TGF-beta-induced cytoskeletal alterations in endothelial cells.

Authors:Hu T, Ramachandrarao SP, Siva S, Valancius C, Zhu Y, Mahadev K, Toh I, Goldstein BJ, Woolkalis M, Sharma K

Journal:Am J Physiol Renal Physiol

PubMed ID:16159901

'Cytoskeletal alterations in endothelial cells have been linked to nitric oxide generation and cell-cell interactions. Transforming growth factor (TGF)-beta has been described to affect cytoskeletal rearrangement in numerous cell types; however, the underlying pathway is unclear. In the present study, we found that human umbilical vein endothelial cells (HUVEC) have ... More

Subcellular localization of Nox4 and regulation in diabetes.

Authors:Block K, Gorin Y, Abboud HE,

Journal:Proc Natl Acad Sci U S A

PubMed ID:19706525

'Oxidative stress is implicated in human diseases. Some of the oxidative pathways are harbored in the mitochondria. NAD(P)H oxidases have been identified not only in phagocytic but also in somatic cells. Nox4 is the most ubiquitous of these oxidases and is a major source of reactive oxygen species (ROS) in ... More

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