GeneArt™ Synechococcus Protein Expression Vector
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Invitrogen™

GeneArt™ Synechococcus Protein Expression Vector

GeneArt™ Synechoccusタンパク質発現ベクターは、藻類における相対的な高レベル発現用に最適化された第2世代のSynechoccusタンパク質発現ベクターで、目的遺伝子の検出および/または精製用の二重タンパク質タグを備えています。このキットには、発現ベクターとわかりやすいプロトコルが含まれています。Gibco™ BG-11培地は別売りで、ATCC コレクションから入手可能なSynechoccus伸長などの特定のCyanobacteriaの増殖と維持に最適化されています詳細を見る
製品番号(カタログ番号)数量
A2423010 reactions
製品番号(カタログ番号) A24230
価格(JPY)
74,500
Each
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数量:
10 reactions
GeneArt™ Synechoccusタンパク質発現ベクターは、藻類における相対的な高レベル発現用に最適化された第2世代のSynechoccusタンパク質発現ベクターで、目的遺伝子の検出および/または精製用の二重タンパク質タグを備えています。このキットには、発現ベクターとわかりやすいプロトコルが含まれています。Gibco™ BG-11培地は別売りで、ATCC コレクションから入手可能なSynechoccus伸長などの特定のCyanobacteriaの増殖と維持に最適化されています。

•目的遺伝子の総可溶性タンパク質の発現が10%超
• 6His-TEVおよび/またはV5-Hisエピトープタグで検出および精製
• シームレスなアセンブリと互換性がありコンストラクトの作成が可能

特定の発現ベクター
GeneArt Synechococcus Protein Expression Vectorは、Synechococcus伸長における恒常的な発現を提供するように設計されています。発現は、プロモーターpsbA1、リボソーム結合部位(RBS)、および遺伝子の位置に応じたオプションの開始/停止コドンによって制御されます。このベクターは、N末端およびC末端に精製タグと検出タグを提供します。N末端ポリヒスチジンタグには TEV認識部位が付加されており、オプションで開裂が可能です。C末端のV 5エピトープに続いてポリヒスチジンタグが付加されます。2つのMCSサイトは、タンパク質にタグを付加することもしないこともできる柔軟性が提供されています。当社のpSyn_6ベクターは、シームレスクローニングにも対応しています。シームレスクローニングは、オプションのクローニングメソッドで、最終的なコンストラクトに余分な配列を生成することがありません。

ベクターの特徴は以下のとおりです。
•目的遺伝子組換えの堅牢な発現を目的とした強力な構成プロモーターであるpsbA1
• 一部の遺伝子の発現向上のためのリボソーム結合部位(RBS)
• 目的遺伝子のSynechococcus伸長ゲノムへの狙いを定めた統合
• N末端6His-TEVおよびC末端V5-6Hisエピトープタグ
Synechococcusでの選択のためのスぺクチノマイシン耐性遺伝子
• 柔軟な複数のクローニング部位ベクター

>80%の統合効率
Synechococcusの伸長PCC7942の形質転換は、細胞染色体と外因性DNAの相同組換えに依存します。この組換えは、独立して複製されず、染色体との配列相同性を含んでいます。染色体への統合位置(中性部位、NS1)はクローニング遺伝子座として開発されました。異常な表現型がないのに破壊され、異所性配列の組み換えが起こる可能性があるためです。抗生物質耐性カセットおよび中性部位配列を含むベクターで形質転換すると、中性部位ベクターとSynechococcus伸長染色体の間に二重相同組換えイベントが発生します。選択マーカー (スペクチノマイシン)とプロモーターによって駆動される目的遺伝子が中性部位に挿入され、ベクターバックボーン(pUC)が失われるため、Synechoccus伸長PCC 7942で組換え遺伝子を発現できます。

Gibco BG-11 Media—Cyanobacteria用に最適化
Gibco BG-11 Mediaは別途入手可能で、Synechoccus伸長などの特定のCyanobacteriaの増殖と維持に最適化されています。1X処方により、面倒な培地調製手順を回避できます。受賞歴のあるボトル設計は、バイオセーフティキャビネットでの使用が容易で、汚染のリスクを最小限に抑え、細胞培養の一貫性を向上させます。Cyanobacteria培養における優れたパッケージと品質、高い信頼性、および向上した一貫性により、全体的な効率が上昇し、より堅牢なデータが得られます。
研究用途にのみご使用ください。診断目的には使用できません。
仕様
製品タイプタンパク質発現ベクター
数量10 reactions
出荷条件ドライアイス
製品ラインGeneArt
Unit SizeEach

よくあるご質問(FAQ)

What is the difference between pSyn_1 and pSyn_6?

The promoter for pSyn_1 is the Psc. Psc is a weak constitutive promoter that drives basal expression of your gene of interest. The promoter was taken from the solanesyl diphosphate synthase gene from Synechocystis sp. Strain PCC 6803. Note: Use of this weak constitutive promoter is a good fit for applications that are hindered by strong expression, such as pathway engineering or complementation of mutant genes normally expressed at low levels (Simkovsky et al., 2012).

The promoter for pSyn_6 is the psbA promoter (PpsbA). PpsbA is a strong constitutive promoter of the psbA gene (encoding photosystem II protein D1) from Synechococcus elongatus, driving high-level expression of your gene of interest. The pSyn-6 vector also includes a ribosome-binding site (GAAGGAG) for efficient initiation of translation, as well as a stop codon. A 6xHis TEV and a V5-His epitope tag is also included in the vector backbone for detection/purification of the gene of interest. NS1 (neutral site 1) homologous recombination sites are present in both vectors for the integration of the vector into the Synechococcus elongatus genome.

Find additional tips, troubleshooting help, and resources within our Protein Expression Support Center.

What is the mechanism of integration when using the Synechococcus expression kits?

A double homologous recombination event occurs between the Neutral Site 1 in the genome and between NSa and NSb in the plasmid. This results in the gene of interest and spectinomycin resistance integrating into the genome within the Neutral Site 1.

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I would like to create a stable algae line via non-random integration. Which kit would you recommend?

We recommend our Synechococcus kit (A24230), where the integration is directed to the Neutral Site 1 of the algae genome.

Find additional tips, troubleshooting help, and resources within our Protein Expression Support Center.

What does the GeneArt Synechococcus Protein Expression Vector include?

It includes the pSyn_6 vector. This vector has been tested for protein expression in the Synechococcus elongatus PPC 7942. You can get the Synechococcus elongatus PPC 7942 from academic resources (https://genome.jgi.doe.gov/portal/synel/synel.info.html) or from the ATCC Collection (https://www.atcc.org/products/all/33912.aspx).

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