Thermo Scientific EZ-Link Sulfo-NHS-LC-LC-Biotinを使用して、抗体、タンパク質、および高分子を含有するその他の一級アミンをシンプルかつ効率的にビオチン標識できます。細胞表面タンパク質の特異的標識も、これら独自の水溶性かつ膜不透過性の試薬の一般的なアプリケーションです。
Thermo Scientific No-Weigh製品は、あらかじめ分注された形で提供される特殊試薬です。計量済みのパッケージではバイアルを繰り返し開閉することがないため、経時的な試薬反応性の喪失や汚染を防ぎます。このフォーマットでは、毎回新しい試薬バイアルを使用できるため、少量の試薬を計量する手間がなくなり、試薬の安定性に対する懸念が軽減します。
EZ-Link Sulfo-NHS-LC-LC-Biotinの特長:
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タンパク質の標識—ストレプトアビジンレジンまたはプローブを使用して抗体を容易に固定、精製、または検出するために抗体をビオチン化
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細胞表面の標識—負電荷試薬は細胞膜を透過しないため、全細胞の表面タンパク質のみをビオチン化
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アミン反応性—リジンの側鎖(K)やポリペプチドの末端などの一級アミン(-NH2)と反応
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可溶性—電荷たスルホ-NHS基は、従来のNHSエステル化合物と比べて試薬の水溶性を向上
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不可逆的—恒久的なアミド結合を形成;スペーサーアームは切断不可能
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2倍の長さ—スペーサーアーム(ターゲットに付加される全長)は22.4オングストローム;このアームの延長により、ビオチン結合の立体障害を最小限に抑制
Sulfo-NHS-LC-LC-Biotinは非常に類似した3種類のEZ-Link試薬の中で最長で、水溶性かつ切断不可能であり、これを使用して、抗体、タンパク質、および溶液中のその他の一級アミン含有高分子をシンプルかつ効率的にビオチン化できます。細胞表面タンパク質の特異的標識も、これら独自の水溶性かつ膜非透過性の試薬の一般的なアプリケーションです。3種類のスルホ-NHS-エステル試薬はスペーサーアームの長さのみが異なり、ビオチン結合の立体障害が重要な要素となる標識および検出実験を最適化します。
当社は、意図した研究アプリケーションで可能な限り最高の製品完全性、一貫性、および性能を確保するようビオチン試薬を製造しています。
ビオチンの
N-ヒドロキシスルホスクシンイミド(NHS)エステルはもっとも一般的なビオチン化試薬です。NHS活性化ビオチンは、アルカリ性バッファー中で1級アミノ基(-NH2)と効率的に反応して、安定したアミド結合を形成します。タンパク質(抗体など)は一般的に、リジン(K)残基の側鎖や各ポリペプチドのN末端など、標識の標的として利用できる複数の1級アミンを有しています。
ビオチンNHSエステル試薬には、長さ、溶解性、細胞透過性、および開裂性が異なるさまざまな種類があります。非スルホン化NHSビオチンは細胞透過性ですが、DMSOやDMFなどの有機溶媒に溶解する必要があります。スルホ-NHSビオチン(およびペグ化ペーサーを有するもの)は直接水に溶解しますが、膜透過性ではありません。ジスルフィド結合を含む種類は還元剤を使用して開裂できるため、ビオチン基を標識タンパク質から切り離すことができます。