SYBR™ Green Fast Advanced Cells-to-CT™ Kit

Invitrogen™

SYBR™ Green Fast Advanced Cells-to-CT™ Kit

Name: SYBR™ Green Fast Advanced Cells-to-CT™ Kit
SKU: A35380

SYBRグリーンFast Advanced Cells-to-Ct Kitは、RNA精製なしで、培養細胞から直接遺伝子発現解析を行うことを可能とする完全な細胞ライセートシステムです。SYBRグリーンFast Advanced Cells-to-Ct細胞溶解試薬は、最高感度のCells-to-Ct詳細を見る

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製品番号（カタログ番号）	反応数	DNase
A35380	反応100回分	55 μL DNase I
A35379	反応40回分	22 μL DNase I
A35381	反応400回分	220 μL DNase I

3 オプション

製品番号（カタログ番号） A35380

価格（JPY）

177,000

Each

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反応数:

反応100回分

DNase:

55 μL DNase I

SYBRグリーンFast Advanced Cells-to-Ct Kitは、RNA精製なしで、培養細胞から直接遺伝子発現解析を行うことを可能とする完全な細胞ライセートシステムです。SYBRグリーンFast Advanced Cells-to-Ct細胞溶解試薬は、最高感度のCells-to-Ct Fast Advanced逆転写酵素ミックス、2倍RTバッファー、そしてクラス最高のPowerUp SYBRグリーンマスターミックスと共に提供されます。SYBRグリーンFast Advanced Cells-to-Ctキットは、約1.5時間で細胞プレート全体の遺伝子発現解析を実現できる最速のワークフローにおいて、求める感度を提供します。

•完全—最適化されたワークフローには、gDNA除去を伴う細胞溶解試薬、新しいFast Advanced RT酵素ミックス、バッファー、および新しいPowerUp SYBRグリーンFast Advancedマスターミックスが含まれます
• 高速—室温でのDNase処理を含む7分間のサンプル調製
• 簡単—チューブまたは培養プレートで直接サンプルを溶解します
• 堅牢—サンプルあたり10–100,000個の細胞で遺伝子発現解析を実行します。精製されたRNAから得られる結果と同等の結果です
• 効果的—100の開始時サンプルから1000のリアルタイムPCR結果を生成するのに十分な試薬が含まれています

独自の方法により、培養細胞からRNAを分離する必要がなくなります
Cells-to-Ct法は、細胞を溶解してRNAを保護する独自の溶解試薬を特徴としています。5分間の溶解ステップで同時にDNAが除去されることで、時間が節約され、簡便性が向上します。次に、溶解試薬に不可逆的に結合する“停止液”を添加することにより、溶解を停止します。

SYBRグリーンFast Advanced Cells-to-CTキットには、cDNA合成用のCells-to-Ct Fast Advanced逆転写（RT）試薬と、リアルタイムPCR分析用のPowerUp SYBRグリーンマスターミックスが含まれています。プライマーセットはユーザーが提供します。

簡単な7分間のサンプル調製
SYBRグリーンFast Advanced Cells-to-CTキットは、10–100,000個の培養細胞／サンプル用に設計されています。細胞をPBSで洗浄後、室温で5分間、溶解液で溶解します。DNase処理も同時に行うことができます。溶解は室温にて停止液を用い、2分間のインキュベーションで終了します。ライセートを逆転写および–20℃で短期保存、または-80℃で長期保存する準備ができました。

検出感度を最大化
RT反応におけるライセート量を10%に制限する他社キットとは異なり、SYBRグリーンFast Advanced Cells-to-CT Kitは、細胞ライセートとして総RT反応量の45%に対応できます。さらに、リアルタイムPCR反応量の最大30%までをcDNAとすることができます。最適化されたRT反応に使用できるライセート量の増量と、続くPowerUP SYBRグリーンマスターミックスを使用するリアルタイムPCRにおけるcDNA量の増量により、最大感度が実現できます。マスターミックスはターゲットを正確かつ正確に増幅し、低濃度で発現された転写物などの少量のターゲットを検出できます。

サンプル損失と転送エラーの削減
サンプルは培養ウェル（96または384ウェル）で直接処理できるため、サンプルの取り扱いとサンプルの損失または転送エラーの可能性が最小限に抑えられ、迅速なハイスループット処理が容易になります。工程が多い従来のRNA分離プロトコルとは異なり、熱処理、洗浄、または遠心分離のステップは必要ありません。このキットでは、手間のかかる30～60分間のプロセスが大幅に簡素化され、7分まで短縮されます。

一緒に証明されている実証済みの性能
SYBRグリーンFast Advanced Cells-to-CT Kitのすべてのコンポーネントは、一貫性のある信頼性の高いパフォーマンスを実現するために最適化されています。これにより、個々のサンプル調製とRTおよびリアルタイムPCR用のキットを組み合わせる際の勘に頼る作業がなくなり、サンプルから結果まで最速ワークフローにおいてお客様が求める感度を提供します。

研究用途にのみご使用ください。診断目的には使用できません。

仕様

DNase55 μL DNase I

フィデリティ（vs. Taq）2倍

フォーマットチューブ

グリーン機能使用するリソースが少ないことから廃棄物が少なく、危険性も低減

高スループット適合性ハイスループットに対応

反応数反応100回分

製品ラインCells-to-CT

製品タイプFast Advanced Cells-to-Ctキット

精製標的ライセート、リアルタイムPCRに即対応

数量100 reactions

試薬タイプCell Lysis

サンプルタイプ細胞

出荷条件ドライアイス

原料10-100,000 Cells

対応可能対象100反応

濃度2倍

検出法プライマー-プローブ

使用対象（アプリケーション）遺伝子発現解析

GC-Rich PCR Performance高

PCR法2ステップRT-qPCR

反応速度高速

Unit SizeEach

組成および保存条件

• 250 µL 20X Fast Advanced RT酵素ミックス
• 5 mL 2X Fast Advanced RTバッファー
• 5 mL溶解液
• 550 µL停止液
• 55 µL DNase I
• 5 mL PowerUp SYBR Greenマスターミックス

-5～-30℃で保存してください。

よくあるご質問（FAQ）

Will the Cells-to-CT system work with my special cell line?

There is no reason why the Cells-to-CT system shouldn’t work with any cell line. However, due to differences in cell size and composition, the maximum number of cells per lysis reaction may be slightly different for different cell lines. We recommend testing for inhibition and optimal cell input by using the TaqMan Cells-to-CT and SYBR Green Cells-to-CT Control kits.

Find additional tips, troubleshooting help, and resources within our Real-Time PCR and Digital PCR Applications Support Center.

Do you offer 1-step kits using the Fast Advanced reagents?

No. The Fast Advanced kits are only available in the 2-step format. For a 1-step Cells-to-CT kit, you will need to use the legacy TaqMan (Cat. No. A25603) and Power SYBR (Cat. No. A25601) 1-step kits.

Find additional tips, troubleshooting help, and resources within our Real-Time PCR and Digital PCR Applications Support Center.

Do the 2-step Cells-to-CT kits contain RNase inhibitor?

Yes, the Stop Solution provided in the 2-step Cells-to-CT kits contains RNase inhibitor.

Can I use the TaqMan Gene Expression Cells-to-CT kit for multiplexing?

The TaqMan Gene Expression Cells-to-CT kit has been validated for duplexing. If you want to set up a multiplex real-time PCR reaction with 3 assays, we recommend using the TaqMan Fast Advanced Cells-to-CT kit (https://www.thermofisher.com/order/catalog/product/A35374).

I am using a Cells-to-CT kit and I see signal from the genomic DNA in my real-time PCR results. How do I get rid of the genomic DNA contamination?

To prevent signal from genomic DNA in the Cells-to-CT real-time PCR reaction, we recommend using a TaqMan assay or primer set that spans an exon-exon boundary, and adding DNase I to degrade genomic DNA during the lysis reaction. For optimal DNase activity in the lysis reaction, we recommend the following:
1. Ensure all media is removed from the cells.
2. Wash each well or cell pellet with an equal volume of room temperature 1X PBS.
3. Ensure the lysis reaction happens at room temperature. The lysis reaction may not reach room temperature if the plate is on ice prior to adding Lysis Solution, or cold Lysis Solution is added.
4. Warm the Lysis Solution to room temperature before adding to the cells.
5. Perform the lysis reaction at 25 degrees C for up to 8 minutes.

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