Expi293™ Inducible GnTI- Expression System Kit

製品番号（カタログ番号）	数量
A39252	1 kit

製品番号（カタログ番号） A39252

価格（JPY）

506,800

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1 kit

Expi293誘導性GnTI発現システムキットは、哺乳類293細胞からの迅速かつ高収量の一過性タンパク質発現を実現するExpi293プラットフォームの一部です。このシステムキットは、N-アセチルグルコサミン転移酵素I（GnTI）活性がない複合型N-グリカンを持たない改変型Expi293F細胞を中心にしており、、テトラサイクリンリプレッサー（TetR）タンパク質を安定的に発現し、テトラサイクリン制御タンパク質発現を可能にします。Expi293F誘導性GnTI細胞株は、Expi293F親細胞におけるGnTI遺伝子の選択的ノックアウト、およびヒトCMVプロモーターの制御下でTetR遺伝子をコードする調節プラスミドpcDNA6/TRの安定した統合により確立されました。この細胞株は、均一にグリコシル化された組換えタンパク質のテトラサイクリン誘導性高収量発現のための強力なツールです。

Expi293誘導性GnTI発現システムキットの特長：
•発現タンパク質の均一なN-グリコシル化
• 極めて低い基礎発現レベルでのテトラサイクリン誘導性タンパク質発現
• Expi293F親細胞と同等なタンパク質収量—最大1 g/L
• テトラサイクリン制御による目的遺伝子の発現のためのpcDNA5/TO発現ベクター
• Expi293発現培地中のExpi293F誘導性GnTI細胞の懸濁液による高密度培養
• 特殊なトランスフェクションエンハンサーと組み合わせてExpiFectamine293試薬を用いる高効率な一過性トランスフェクション

Expi293誘導性GnTI発現システムキットに含まれる構成品は以下のとおりです：凍結Expi293F誘導性GnTI細胞 1バイアル、Expi293発現培地 1 L、培養1 Lをトランスフェクションするのに十分なExpiFectamine293トランスフェクションキット 1個、Opti-Plex錯体形成バッファー 100 mL、PNGアーゼFグリカン開裂キット 1個、pcDNA5/TO哺乳類発現キット 1個、塩酸テトラサイクリン 500 mg、およびpRABBIT IgG IRES-EmGFPポジティブコントロールベクターです。Expi293誘導性GnTI発現システムの構成品はすべて、単品購入することもできます。

研究用にのみ使用できます。診断用には使用いただけません。

細胞株Expi293F™

供給タイプTransfection

使用対象（アプリケーション）タンパク質生産

製品ラインExpi293

数量1 kit

出荷条件室温または氷水またはドライアイスでの出荷が承認されています

プロモーターCMV⁄TO

Unit SizeEach

組成および保存条件

• Expi293F誘導性GnTI細胞（1バイアルあたり1 x 10⁷細胞）は、気相式液体窒素で保存してください
• Expi293発現培地1 Lは、2～8℃で保存してください（遮光）
• 1 Lの培養用ExpiFectamine 293トランスフェクションキットは、2～8℃で保存してください
• PNGアーゼFグリカン開裂キットは、-20℃で保存してください
• Opti-Plex錯体形成バッファー100 mLは、2～8℃で保存してください（遮光）
• pcDNA5/TO哺乳類発現ベクター20 µgは、2～8℃で保存してください。長期保存の場合は-20℃で保存してください。
•塩酸テトラサイクリン500 mgは、-20℃で保存してください
• pRABBIT IgG IRES-EmGFPポジティブコントロールベクターは、2–8℃で保存してください。また長期保存の場合は-20℃で保存してください

よくあるご質問（FAQ）

Can I leave my Expi293F culture expressing for more than 7 days?

The growth and expression characteristics of Expi293F cells are such that, by 7 days post-transfection, the culture medium should be close to being spent and maximal protein expression should have already been achieved. Continued incubation will result in a large decrease in cell culture viability.

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What is the difference between the Expi293F Inducible Cell Line and the T-REx -293 Cell Line?

The Expi293F Inducible Cell Line was created using the same technology as the T-REx -293 Cell Line. Both cell lines have been created by stable transfection with the pcDNA 6/TR vector; thus, they ubiquitously express the tetracycline repressor (TetR) protein. The parental cell line of Expi293F Inducible cells is Expi293F Cells (Cat. No. A14527). The key differences between these 2 cell lines are:
- Expi293F Inducible cells are grown in suspension and are adapted to high-density culture (> 15x10E6 cells/mL).
- Expi293F Inducible cells grow in Expi293 Expression System and perform equivalently to parental Expi293F cells, thus making them ideal for high-yield, inducible protein expression.

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What method do you recommend for quantifying rabbit IgG expression from pRABBIT IgG IRES-EmGFP Positive Control Vector, Cat. No. A39243?

The formation of intact IgG molecules may be quantified using a sandwich ELISA designed to capture and detect rabbit IgG. Besides the rabbit IgG positive control vector, reagents, and consumables that are included in the kit, you will also need purified rabbit IgG to be used as a standard, F(ab')2-Goat anti-Rabbit IgG (H+L) Cross-Adsorbed Secondary Antibody, HRP (Cat. No. A10547), Protein A Coated Plates, Clear, 96-Well (Cat. No. 15130), TMB Substrate Kit (Cat. No. 34021), SuperBlock (TBS) Blocking Buffer (Cat. No. 37535), and PBS or TBS buffer for washes. There is an example procedure in our Protein A Coated Plates manual (https://tools.thermofisher.com/content/sfs/manuals/MAN0011310_Thermo Scientific_ProteinA_G_AG_Coat_96Well_UG.pdf). Please note that our R&D scientists determine titer values from crude cell culture supernatants using a Pall Life Sciences FortéBio Octet instrument equipped with a Protein A biosensor.

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Do you offer a GFP-expressing mammalian expression vector that I can use as a control to monitor my transfection and expression with the Expi systems?

We offer pRABBIT IgG IRES-EmGFP Positive Control Vector, Cat. No. A39243, which you can use to monitor your transfection and expression.

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Can I use doxycycline instead of tetracycline as an inducer in the Expi293 Inducible Expression System?

Doxycycline may be used as an alternative inducing agent in the Expi293 Inducible System. It is similar to tetracycline in its mechanism of action. Doxycycline has been shown to have a longer half-life than tetracycline (48 hr vs. 24 hr, respectively). If the use of doxycycline is desired with the Expi293 Inducible System, we recommend performing a dose-response curve to determine the optimal concentration for induction.

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