TrueTag™ Donor DNA Kit, GFP
TrueTag™ Donor DNA Kit, GFP
Invitrogen™

TrueTag™ Donor DNA Kit, GFP

Invitrogen TrueTagドナーDNAキット(GFP)は、ゲノム編集実験用のトランスフェクションに対応したドナーDNAを用いた、高効率(最大100%の編集済み細胞)な遺伝子のタギングを促進する迅速なソリューションを提供します。 TrueTag詳細を見る
製品番号(カタログ番号)数量
A4299210 Reactions
製品番号(カタログ番号) A42992
価格(JPY)
110,000
Each
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数量:
10 Reactions
Invitrogen TrueTagドナーDNAキット(GFP)は、ゲノム編集実験用のトランスフェクションに対応したドナーDNAを用いた、高効率(最大100%の編集済み細胞)な遺伝子のタギングを促進する迅速なソリューションを提供します。

TrueTag Donor DNA Kitには以下の利点があります:
• ワンステップのPCR増幅によるドナーテンプレートの作成—クローニング不要
• トランスフェクションに対応したDNAドナーを数日ではなく数時間で作成可能
• 100%のGFPタグ付き細胞を濃縮

TrueTag Donor DNA Kit、GFPは、選択マーカーおよびGFPで遺伝子にタグ付けするための、高品質なDNAドナー生成に必要な材料がすべて付属します。2つの遺伝子特異的プライマーを供給するだけで、数日ではなくわずか数時間で、相同性アーム、PCR増幅、およびトランスフェクションに対応したドナーの精製を行うことができます。各キットは、ユーザーが以下のことができるように設計されています:
•目的遺伝子のカルボン酸(C-)またはアミノ(N-)末端にタグ付け
• 目的の細胞モデルに最適な、ピューロマイシンまたはブラストサイジン選択マーカーから選択—から選択します。
• 細胞濃縮後、Cre/Loxで抗生物質耐性マーカーを容易に除去することが可能

キット内容
• 4種の線形ドナーテンプレート:N末端/ピューロマイシン耐性、N末端/ブラストサイジン耐性、C末端/ピューロマイシン耐性、C末端/ブラストサイジン耐性
•Phusion Flash High-Fidelity PCR Master Mix
•PCRクリーンアップカラムおよびバッファー
•ヒトβ-アクチン(ACTB)をタグ付けするポジティブコントロールプライマー

遺伝子特異的試薬を迅速に設計するための直感的なソフトウェア
蛍光タグを適切にノックインするためには、ターゲットに特化した遺伝子編集試薬が必要です。Invitrogen TrueDesign Genome Editorウェブベースのソフトウェアは、以下の目的で特別に開発されました:
1.ターゲット遺伝子転写物を同定します
2.挿入部位を指定します
3.必要なすべてのコンポーネントを設計し、簡単に注文できます

TrueDesignソフトウェアから必要な試薬を入手可能(キットには含まれません)
• CRISPRガイドRNAまたはTALENは、N末端またはC末端に隣接して設計されています
• オリゴを使用してドナーをPCR増幅し、適切なホモロジーアームを追加します
• CRISPR-Cas9切断効率の評価用シーケンシングプライマー
• TrueTag DNA Donorが正しく挿入されていることを確認するためのベリフィケーションプライマー

別途購入するか、TrueDesignのワークフローの一部として購入する必要があります:
• TrueCut Cas9 Protein v2、TrueCut HiFi Cas9 Protein、またはGeneART CRISPR mRNA
• CRISPRMAXトランスフェクション試薬またはMessengerMAXトランスフェクション試薬

研究用途にのみご使用ください。診断目的には使用できません。
仕様
概要タグ:GFP
使用対象(アプリケーション)蛍光遺伝子標識、細胞株の生成
標識または色素GFP
製品ラインTrueTag
製品タイプドナーDNAキット
数量10 Reactions
出荷条件氷水またはドライアイスでの出荷が承認されています
フォーマットキット
Unit SizeEach
組成および保存条件
• TrueTag Assembly Kit、-20℃で保存してください
• TrueTag Cleanup Kit、室温で保存してください

よくあるご質問(FAQ)

My TrueTag Donor DNA Kit, GFP (Cat No. A42992) does not have the ACTB sgRNA included in the kit. Where can I get the ACTB sgRNA?

While the TrueTag Donor DNA Kit, GFP (Cat No: A42992) contains all the necessary reagents to generate the positive control donor template to tag ACTB at the N-terminal end with GFP, the gRNA targeting ACTB is not included in the kit. You would need to purchase it separately as a custom TrueGuide sgRNA that can be ordered through the Invitrogen TrueGuide gRNA ordering tool . The targeting sequence of the ACTB gRNA would be: CGCGGCGATATCATCATCCA.

引用および参考文献 (1)

引用および参考文献
Abstract
Enhanced CRISPR/Cas9-mediated precise genome editing by improved design and delivery of gRNA, Cas9 nuclease, and donor DNA.
Authors:Liang X, Potter J, Kumar S, Ravinder N, Chesnut JD
Journal:J Biotechnol
PubMed ID:27845164
'While CRISPR-based gene knock out in mammalian cells has proven to be very efficient, precise insertion of genetic elements via the cellular homology directed repair (HDR) pathway remains a rate-limiting step to seamless genome editing. Under the conditions described here, we achieved up to 56% targeted integration efficiency with up ... More