Invitrogen TrueTagドナーDNAキット（RFP）は、ゲノム編集実験用のトランスフェクションに対応したドナーDNAを用いた、高効率（最大100%の編集済み細胞）な遺伝子のタギングを促進する迅速なソリューションを提供します。

TrueTag Donor DNA Kitには以下の利点があります：
• ワンステップのPCR増幅によるドナーテンプレートの作成—クローニング不要
• トランスフェクションに対応したDNAドナーを数日ではなく数時間で作成可能
• 100%のRFPタグ付き細胞を濃縮

TrueTag Donor DNA Kit、RFPは、選択マーカーおよびRFPで遺伝子にタグ付けするための、高品質なDNAドナー生成に必要な材料がすべて付属します。2つの遺伝子特異的プライマーを供給するだけで、数日ではなくわずか数時間で、相同性アーム、PCR増幅、およびトランスフェクションに対応したドナーの精製を行うことができます。各キットは、ユーザーが以下のことができるように設計されています：
•目的遺伝子のカルボン酸（C-）またはアミノ（N-）末端にタグ付け
• 目的の細胞モデルに最適な、ピューロマイシンまたはブラストサイジン選択マーカーから選択—から選択します。
• 細胞濃縮後、Cre/Loxで抗生物質耐性マーカーを容易に除去することが可能

キット内容
• 4種の線形ドナーテンプレート：N末端／ピューロマイシン耐性、N末端／ブラストサイジン耐性、C末端／ピューロマイシン耐性、C末端／ブラストサイジン耐性
•Phusion Flash High-Fidelity PCR Master Mix
•PCRクリーンアップカラムおよびバッファー
•ヒトβ-アクチン（ACTB）をタグ付けするポジティブコントロールプライマー

遺伝子特異的試薬を迅速に設計するための直感的なソフトウェア
蛍光タグを適切にノックインするためには、ターゲットに特化した遺伝子編集試薬が必要です。Invitrogen TrueDesign Genome Editorウェブベースのソフトウェアは、以下の目的で特別に開発されました：
1.ターゲット遺伝子転写物を同定します
2.挿入部位を指定します
3.必要なすべてのコンポーネントを設計し、簡単に注文できます

TrueDesignソフトウェアから必要な試薬を入手可能（キットには含まれません）
• CRISPRガイドRNAまたはTALENは、N末端またはC末端に隣接して設計されています
• オリゴを使用してドナーをPCR増幅し、適切なホモロジーアームを追加します
• CRISPR-Cas9切断効率の評価用シーケンシングプライマー
• TrueTag DNA Donorが正しく挿入されていることを確認するためのベリフィケーションプライマー

別途購入するか、TrueDesignのワークフローの一部として購入する必要があります：
• TrueCut Cas9 Protein v2、TrueCut HiFi Cas9 Protein、またはGeneART CRISPR mRNA
• CRISPRMAXトランスフェクション試薬またはMessengerMAXトランスフェクション試薬