GeneArt GibsonアセンブリEXマスターミックスでは、1本のチューブと2ステップで反応を最適化して複数の重複するDNA断片をシームレスにリンクする手法によって、DNAアセンブリを実施できます。異なる長さのDNAフラグメントを、フラグメント間の相補的なオーバーラップを使用して同様にアセンブルします。このアプローチ固有の柔軟性と成功率は、小規模および大規模なDNAコンストラクトに適しており、単一のインサートと複数のインサートの両方に対応し、全ゲノムの構築に使用されています。得られる産物は、形質転換、PCR、ローリングサークル増幅(RCA)などのさまざまなダウンストリームアプリケーションに使用できます。GeneArt GibsonアセンブリEXマスターキットには、マスターミックス、ポジティブコントロール、水が含まれており、お客様独自のコンピテントセルの用途にご利用いただけます。
GeneArt GibsonアセンブリEXマスターミックスの特長:
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シンプル — 最大15個のDNAフラグメントを、1回の反応でシームレスにアセンブルおよびクローニングします
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効率的 — ロバストな効率により、シンプルなコンストラクト、困難なコンストラクトの両方で良好なクローンが得られます
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柔軟 — 設計ガイドラインにより、ご希望のあらゆるベクターにアセンブリできます
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便利 — マスターミックスキット、および、ケミカルコンピテントセルまたはエレクトロコンピテントセル入りのクローニングキットとしてご利用いただけます
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信頼性 — 科学文献での引用は4,000件を超えており、優れた成果が示されています
最大15個のフラグメントのシームレスなアセンブリGeneArt GibsonアセンブリEXクローニングは堅牢なシングルチューブの2ステッププロセスです。最大15個のインサートとベクターを独自の酵素ミックスで組み合わせ、余分な配列や傷を残さずに末端の相同性を共有してDNAフラグメントをアセンブルします(シームレス)。この二重に最適化された反応が完了すると、アセンブリ反応の一部でケミカルコンピテントセルまたはエレクトロコンピテントセルが形質転換され、翌日に解析可能なクローンが得られます。必要な20~40塩基対の末端相同性は、合成用のde novoフラグメントに設計されているか、カスタムDNAオリゴを用いたPCR増幅によって容易に設計できます。この特殊な酵素ミックスは、共有結合したシームレスなDNAコンストラクトを形成し、高い効率を実現します。
最大限の効率を実現する堅牢なメソッドGeneArt GibsonアセンブリEXメソッドでは共有結合の最終産物が得られるため、ケミカルコンピテントセルまたはエレクトロコンピテントセルを利用して形質転換効率を最大限に高めることができます。これは、困難なコンストラクトには特に重要です。制限酵素、ライゲーション、組換え部位は必要ありません。この方法は、不要な余分の塩基がない完全にシームレスなコンストラクトを提供します。
優れた汎用性を提供しますGeneArt GibsonアセンブリEXメソッドは汎用性を提供します。DNAセグメントの迅速な組み合わせ、追加、削除、交換により多くの技術を合理化し、サブクローニングの必要性を排除し、クローニングワークフローの時間と労力を節約します。
便利なフォーマットGeneArt GibsonアセンブリEXキットには、以下のような複数のフォーマットがあります。
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GeneArt GibsonアセンブリEXクローニングキット、エレクトロコンピテントセル(ElectroMAX DH10Bエレクトロコンピテントセルを使用)
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GeneArt GibsonアセンブリEXクローニングキット、ケミカルコンピテントセル(One Shot TOP10ケミカルコンピテントセルを使用)
• GeneArt GibsonアセンブリEXマスターキット(セル未使用のクローニングキット)(このページ)