MessageAmp™ II aRNA Amplification Kit
MessageAmp™ II aRNA Amplification Kit
Invitrogen™

MessageAmp™ II aRNA Amplification Kit

MessageAmp II aRNA増幅キットは、わずか100 pgのRNAサンプルを増幅できるため、GeneChip解析が可能です。MessageAmp II aRNA増幅キットの利点は以下のとおりです。•増幅効率の向上詳細を見る
製品番号(カタログ番号)数量
AM175120反応
製品番号(カタログ番号) AM1751
価格(JPY)
354,800
Each
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数量:
20反応
MessageAmp II aRNA増幅キットは、わずか100 pgのRNAサンプルを増幅できるため、GeneChip解析が可能です。MessageAmp II aRNA増幅キットの利点は以下のとおりです。

•増幅効率の向上 — 最大5,000倍
•完全長cDNAが高収量で得られ、感度が向上
•わずか100 ngのRNAサンプルでもGeneChip解析が可能
•効率的なラベリングにより、プレゼントコールが高くなり、3'/5'比が低下
•改良されたM-MLV逆転写酵素であるArrayScript RTが付属
•第二鎖cDNA合成反応に最適化

システムの概要
遺伝子アレイを用いた発現プロファイリングは、ゲノムワイド/スケールでの遺伝子発現評価方法として最も広く使用されています。この技術の主な制限は、アレイのハイブリダイゼーションに大量のRNAを必要とすることです。この問題は通常、T7 RNAポリメラーゼによる(トータルRNAサンプルから得られた)cDNAの転写を使用して、十分な量のcRNAを増幅することで解消できます。この増幅法は、MessageAmp II aRNA増幅キットの基礎となっています。

cDNA増幅用に改良されたキット
キットに含まれるArrayScript RTは、他の酵素と同等以上の高収量で完全長cDNAを合成できるよう改良されたM-MLV逆転写酵素です。第二鎖cDNA合成反応の最適化とともにArrayScript RTを使用することで、mRNAを完全長の二本鎖cDNAテンプレートに効率的に変換できます。さらに、in vitro転写(IVT)はMEGAscript技術を使用しているため、IVTのインキュベーション時間を短縮できます。こうした改良により、MessageAmp IIキットは2ラウンド反応にも対応し、わずか100 pgの少量サンプルからでもトータルRNAを確実に増幅できます。

関連製品
Bio-11-UTP(カタログ番号:AM8450)、Bio-16-UTP(カタログ番号:AM8451)は、MessageAmp aRNA増幅反応に使用して、GeneChip™解析用にターゲットを標識できます。Bio-UTPは非特異的エンドヌクレアーゼ活性、エキソヌクレアーゼ活性、RNase活性がないことが確認されており、MessageAmp™ II aRNA増幅キットを使用して機能試験が行われています。
仕様
標識または色素を含む不可
製品ラインAmbion、MessageAmp
製品タイプaRNA増幅キット
数量20反応
逆転写酵素ArrayScript™
サンプルタイプPoly(A+)RNA、トータルRNA
フォーマットキット
Unit SizeEach
組成および保存条件
•T7オリゴ(dT)プライマー60 µL(-20℃)
•ArrayScript™逆転写酵素22 µL(-20℃)
•RNase阻害剤22 µL(-20℃)
•10X第一鎖バッファー42 µL(-20℃)
•dNTPミックス170 µL(-20℃)
•10X第二鎖バッファー210 µL(-20℃)
•DNAポリメラーゼ42 µL(-20℃)
•RNase H 22 µL(-20℃)
•T7酵素ミックス84 µL(-20℃)
•T7 10X反応バッファー84 µL(-20℃)
•T7 ATP、CTP、GTP、およびUTP各84 µL(-20℃)
•第2ラウンドプライマー40 µL(-20℃)
•コントロールRNA 1 mg/mL 10 µL(-20℃)
•ヌクレアーゼフリー水1.75 mL(任意の温度)
•洗浄バッファー30 mL(4℃または室温)
•cDNA結合バッファー7 mL(室温)
•aRNA結合バッファー9 mL(室温)
•aRNAフィルターカートリッジ20個(室温)
•aRNA収集チューブ40本(室温)
•cDNAフィルターカートリッジ + チューブ20セット(室温)
•cDNA溶出チューブ20本(室温)
•ヌクレアーゼフリー水10 mL(任意の温度)

よくあるご質問(FAQ)

Can I use modified nucleotides with the MessageAmp II aRNA Amplification Kit?

Yes,modified nucleotides with the MessageAmp II aRNA Amplification Kit and instructions can be found in Section II.F., Page 17 of the manual (https://tools.thermofisher.com/content/sfs/manuals/cms_056141.pdf).