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Ambion DNase I（RNaseフリー）（E.C.3.1.21.1）は非特異的エンドヌクレアーゼであり、二本鎖および一本鎖のDNAおよびクロマチンを分解します。これは、ホスホジエステル結合を加水分解することで機能し、5'-リン酸基および3'-ヒドロキシル基を含むモノヌクレオチドおよびオリゴヌクレオチドを産生します。最高純度のRNaseフリーDNase Iが提供されており、RNAの完全性を維持するためにRNaseが不在であることが必須条件となる場合に、RNAの存在下でDNAを分解するには、本製品が推奨されます。たとえば、DNase Iは多くの場合、in vitro転写後のテンプレートDNAの除去、およびトータルRNA調製物（特にプラスミドDNAを含む可能性のあるトランスフェクション細胞）からの混入DNAの除去に使用されます。この調製物は、リボヌクレアーゼ保護アッセイ、cDNAライブラリの収縮、およびRT-PCRに使用されます。DNase Iの活性を最大化するには二価陽イオン（Mg2+とCa2+、それぞれ約5 mMと0.5 mM）が必要で、最適pHは7.8です。
卓越した性能のRNaseフリーDNase I
BioTechniquesの研究レポート（Matthews et al., 32: 1412-1417, 2002）では、Sigma、Roche、Applied Science、Qiagen、AmbionのDNase I調製物におけるRNase混入が比較されています。その結果から、Ambion™のRNaseフリーDNase Iを除き、in vitro転写反応からのcRNAの完全性が損なわれ、DNAがまだ混入していることがわかりました。Ambion™のDNaseは、DNase消化を必要とする残りの実験に使用されました。Ambion™ DNase Iは、RNaseおよびプロテアーゼ活性の混入試験済みです。機能性は、ヒトゲノムDNAの消化に続いて定量的リアルタイムPCRを行い、未消化のDNAを検出することで決定されます。
ユニット定義
1ユニットは、37℃、10分で1 µgのDNAを完全に分解するために必要な酵素量で、0.04クニッツユニットに相当します。
アクセサリー製品
ウシDNase Iの代替品として、組換えDNase I（カタログ番号AM2235）。活性と耐塩性がより高いDNaseについては、TURBO™ DNase製品（カタログ番号AM2239およびAM2238）。
卓越した性能のRNaseフリーDNase I
BioTechniquesの研究レポート（Matthews et al., 32: 1412-1417, 2002）では、Sigma、Roche、Applied Science、Qiagen、AmbionのDNase I調製物におけるRNase混入が比較されています。その結果から、Ambion™のRNaseフリーDNase Iを除き、in vitro転写反応からのcRNAの完全性が損なわれ、DNAがまだ混入していることがわかりました。Ambion™のDNaseは、DNase消化を必要とする残りの実験に使用されました。Ambion™ DNase Iは、RNaseおよびプロテアーゼ活性の混入試験済みです。機能性は、ヒトゲノムDNAの消化に続いて定量的リアルタイムPCRを行い、未消化のDNAを検出することで決定されます。
ユニット定義
1ユニットは、37℃、10分で1 µgのDNAを完全に分解するために必要な酵素量で、0.04クニッツユニットに相当します。
アクセサリー製品
ウシDNase Iの代替品として、組換えDNase I（カタログ番号AM2235）。活性と耐塩性がより高いDNaseについては、TURBO™ DNase製品（カタログ番号AM2239およびAM2238）。
研究用にのみ使用できます。診断用には使用いただけません。
仕様
製品タイプDNase I
数量2000 U
出荷条件ドライアイス
酵素DNase
製品ラインAmbion
Unit SizeEach
組成および保存条件
-20℃