Ambion™ RNase Inhibitor, cloned, 40 U/μL

大腸菌で産生される組換えヒトタンパク質であるAmbion RNase阻害剤は、中性膵臓RNase A型酵素の強力な阻害剤です。阻害のモードは非競合的であり、阻害剤は1：1の比率でRNaseに緊密に結合されます。10,000 U（40 U/ µL）を含む1本のチューブで提供されます。この酵素は、多くの組織および細胞タイプに存在するRNaseを不活性化することが示されています。リボヌクレアーゼ阻害剤（RI）の添加は、逆転写による cDNA の調製、in vitro RNA転写、in vitroタンパク質合成など、RNAの完全性を維持する必要がある場合に有用であることが示されています。RIはRNase I、T1、T2、H、U1、U2、またはCL3を阻害しません。RIでは活性を維持するために1 mM以上のDTTが必要で、pH 7.0～8.0の範囲で最大活性を持つpH 5.0～8.0の活性範囲を有します。阻害のモードはRNaseを持つ1：1の複合体の形成であるため、（SDS、尿素などの添加による）リボヌクレアーゼ阻害剤の変性または酸化を避けるために注意が必要です。RIを転写反応、トランスレーション反応、cDNA合成反応に加えて、1U／µLの最終濃度を得る必要があります。RNase阻害剤は、RNase、エキソヌクレアーゼ、エンドヌクレアーゼ、プロテアーゼ活性の汚染について厳格に試験されています。

ユニットの定義：
1つのユニットは、RNase Aの5ngの活性を50 %阻害するために必要なタンパク質量です。ユニットアッセイの条件：100 mMのトリス-酢酸（pH 6.5）、1 mMのEDTA、1mMのサイクリック2フィート、3フィート-CMP、およびRNase阻害剤。RNase Aを添加すると反応が開始します。RNase阻害剤の活性は、RNase Aによるサイクリック2フィート、3フィート-CMPの加水分解の阻害によって測定されます。