Alexa Fluor™ 488 Tyramide SuperBoost™ Kit, streptavidin
Alexa Fluor™ 488 Tyramide SuperBoost™ Kit, streptavidin
Invitrogen™

Alexa Fluor™ 488 Tyramide SuperBoost™ Kit, streptavidin

SuperBoost™チラミドシグナル増幅は、マルチプレックス対応蛍光免疫細胞化学(ICC)、免疫組織化学(IHC)、in situハイブリダイゼーション(ISH詳細を見る
製品番号(カタログ番号)数量
B40932150 Slides
製品番号(カタログ番号) B40932
価格(JPY)
162,500
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数量:
150 Slides
SuperBoost™チラミドシグナル増幅は、マルチプレックス対応蛍光免疫細胞化学(ICC)、免疫組織化学(IHC)、in situハイブリダイゼーション(ISH)において、低含量ターゲットを検出するためのもっとも感度の高い方法です。SuperBoostキットは、AlexaFluor™色素の輝度と、ポリ-HRPを介したチラミド標識反応の優れたシグナル増幅を組み合わせることで、標準的な手法に比べ、10~200倍高い感度を実現します。傑出した研究のために、SuperBoostキットでは結果の解像度を高め、標準のイメージング手法では解明できない、重要な領域を明確に確認できるようにします。

SuperBoostキットは使いやすく、あらゆる細胞タイプまたは組織タイプを使用した、標準のICC、IHC、FISH実験プロトコルに容易に対応できます。SuperBoostキットを使用して標識された細胞は、あらゆるタイプの顕微鏡を使用してイメージングでき、高解像度のマルチプレックス画像を生成します。この特定キットは、標準のグリーン/FITC/GFPフィルターキューブを使用して検出されるAlexaFluor 488チラミド(496/524励起/発光)を備えています。このキットはHRP標識ストレプトアビジンも備えています。

SuperBoostキットの特長:
•蛍光イメージングによる検出が難しいターゲットや低含量ターゲットを検出できる優れた感度
• 標準フィルターを使用したシンプルなプロトコルと検出
• 高解像度マルチプレックスイメージに適している — DAPI、二次抗体、その他のSuperBoostキットとの共同標識
• 標準的なICC/IHC/ISH実験に比べて、必要な一次抗体が10-100倍少なくて済む

SuperBoostキットは、チラミドシグナル増幅法に基づき、西洋ワサビペルオキシダーゼ(HRP)の触媒活性を使用することで、標的タンパク質やin situ核酸配列を高濃度標識します。SuperBoostキットを使用した一般的なICC/IHC/ISH実験では、標準的なICC/IHC/ISH実験に比べ、必要な一次抗体が10-100倍少なくて済みます。SuperBoostキットは、特定の標識の濃度をバックグラウンドに対して大きく高めるため、高い内因性自家蛍光が検出されるサンプルで特定の標識を検出するように、プロトコルを容易に最適化できます。

SuperBoostキットの利点

Alexa Fluorチラミドを使用した標識の機能向上には、次のようなものがあります。SuperBoostキットは、Alexa Fluorチラミドを使用します。これはHRPと反応し、最終的に周囲のタンパク質や他の類似分子に、高い輝度と光安定性を持つAlexa Fluor Dyeを沈着させます。SuperBoostキットは、Alexa Fluor Dyeの輝度と、チラミドシグナル増幅の機能向上を組み合わせることで、優れた標識を生成する唯一のキットです。

反応停止液:他の酵素ベースの標識システムと同様に、標識が過剰に発現される場合があります。SuperBoostキットには、HRP反応を停止させるHRP停止液が含まれています。HRP停止液を使用すると、バックグラウンド標識を増加させることなく、最大の標識を得ることができます。最適化されたHRP反応時間で生成されたイメージと、標準的なICC/IHC/ISH手法で生成されたイメージとでは、鮮明さは同程度ですが、感度は前者のほうが10-200倍高くなります。

バックグラウンドの低減:SuperBoostキットには、内因性ペルオキシダーゼおよび蛍光バックグラウンド標識を除去または低減するためのブロッカーが含まれています。これらのブロッカーは、非特異的/バックグラウンドシグナルをチェックしながら、特定のシグナルのみを確実に強化するのに役立ちます。

研究用途にのみご使用ください。診断目的には使用できません。
仕様
製品タイプTyramide Kit
数量150 Slides
出荷条件室温またはウェットアイスでの出荷
コンジュゲートAlexa Fluor 488
製品ラインSuperBoost
Unit SizeEach
組成および保存条件
顕微鏡スライド(18 x 18 mm)150枚に十分なキット1個、以下が含まれます:ブロッキングバッファー(1X)、22.5 mL
  • HRP標識ストレプトアビジン(1X)、22.5 mL
  • Alexa Fluorチラミド試薬
  • 過酸化水素(安定化3%溶液
  • よくあるご質問(FAQ)

    With a SuperBoost tyramide kit, I got excessive and non-specific labeling. What can I do to limit background and acquire a more localized labeling?

    To limit background, we recommend performing a pre-blocking step with 3% H2O2 for 60 mins to inactivate endogenous peroxidases. To limit the localization of labeling, we recommend optimizing the final concentration of the primary and secondary antibodies and the dye-tyramide. You may also limit the incubation time of the dye-tyramide on the sample.

    Find additional tips, troubleshooting help, and resources within our Cell Analysis Support Center.

    Is it possible to perform dual TSA labeling with SuperBoost tyramide kits?

    Yes. This involves the sequential application of the antibodies and the tyramides with a HRP-quenching step between antibodies using H2O2.

    Find additional tips, troubleshooting help, and resources within our Cell Analysis Support Center.

    How are SuperBoost tyramide kits different from the original TSA labeling kits?

    The SuperBoost tyramide kits utilize poly-HRP labeled antibodies. This provides a greater number of horseradish peroxidase (HRP) molecules per antibody. The original kits used antibodies and streptavidin that were directly conjugated with HRP and thus, limited the number per antibody or streptavidin.

    Find additional tips, troubleshooting help, and resources within our Cell Analysis Support Center.

    引用および参考文献 (2)

    引用および参考文献
    Abstract
    Sensitive immunofluorescent staining of cells via generation of fluorescent nanoscale polymer films in response to biorecognition.
    Authors:Avens HJ, Berron BJ, May AM, Voigt KR, Seedorf GJ, Balasubramaniam V, Bowman CN
    Journal:J Histochem Cytochem
    PubMed ID:21339175
    Immunofluorescent staining is central to nearly all cell-based research, yet only a few fluorescent signal amplification approaches for cell staining exist, each with distinct limitations. Here, the authors present a novel, fluorescent polymerization-based amplification (FPBA) method that is shown to enable similar signal intensities as the highly sensitive, enzyme-based tyramide ... More
    FGF23 is synthesised locally by renal tubules and activates injury-primed fibroblasts.
    Authors:Smith ER, Tan SJ, Holt SG, Hewitson TD,
    Journal:Sci Rep
    PubMed ID:28611350
    In kidney disease, higher circulating levels of the mineral-regulating hormone fibroblast growth factor (FGF)-23 are predictive of disease progression but direct pathogenic effects on the kidney are unknown. We sought evidence of local renal synthesis in response to unilateral ureteric obstruction in the mouse, and pro-fibrotic actions of FGF23 on ... More