NativePAGE™ Bis-Tris Mini Protein Gels, 3 to 12%, 1.0 mm
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NativePAGE™ Bis-Tris Mini Protein Gels, 3 to 12%, 1.0 mm
Invitrogen™

NativePAGE™ Bis-Tris Mini Protein Gels, 3 to 12%, 1.0 mm

Invitrogen NativePAGE Bis-Trisゲルシステム は、プレキャストポリアクリルアミドミニゲルシステムで、天然タンパク質およびタンパク質複合体の高感度かつ高分解能分析を行い、分子量の推定や純度の評価を行います。
製品番号(カタログ番号)ウェル
BN1001BOX10ウェル
BN1003BOX15ウェル
製品番号(カタログ番号) BN1001BOX
価格(JPY)
34,600
Each
お問い合わせください ›
ウェル:
10ウェル
Invitrogen NativePAGE Bis-Trisゲルシステム は、プレキャストポリアクリルアミドミニゲルシステムで、天然タンパク質およびタンパク質複合体の高感度かつ高分解能分析を行い、分子量の推定や純度の評価を行います。Schäggerとvon Jagowが開発したブルーネイティブポリアクリルアミドゲル電気泳動(BN PAGE)技術をベースにしており、中性に近い操作pHと洗剤適合性によって従来のネイティブ電気泳動の制約を克服しています。

NativePAGE Bis-Trisゲルシステムの特長は以下のとおりです。
広範囲の分子量15~10,000 kDaまでの幅広い分離能
中性pH分離タンパク質複合体の天然状態をより良く保ちます
すべてのタンパク質の分解 ゲル内の等電点(pI)に関係なく分解
膜タンパク質複合体の解析能天然のコンフォメーション条件で解析します
優れた分解能 従来のトリスグリシンネイティブ電気泳動よりも優れた分解能を得ることができます

NativePAGE Bis-Trisゲルの働き
SDS-PAGEでは、SDSが電荷シフト分子として機能し、タンパク質に正味の負電荷を与えて変性させ、タンパク質が陽極に向かって移動させることができます。BN PAGEでは、クマシーG-250を電荷シフト分子として使用します。この分子はタンパク質に結合し、正味マイナス電荷を与えながら、タンパク質を非変性状態で天然状態に維持します。NativePAGE Bis-Trisゲルシステムの中性に近いpHは、タンパク質とゲルマトリックスの両方の安定性を最大限に高めます。その結果、天然な膜タンパク質複合体を高感度で分析することができ、従来のトリス-グリシンゲルシステムよりも優れたバンド分解能を実現しました。

タンパク質を膜に転写する場合は、従来のウェットトランスファーおよびPVDF膜にNuPAGE転写バッファーを使用することをお勧めします。NuPAGE転写バッファーは、電気泳動中に確立された中性pH環境を維持します。ニトロセルロース膜は、膜がクーマシーG-250色素を非常に強固に結合するため、ブロッティングには適していません。このほか、Invitrogen Power Blotter(PB0013)を使用して迅速なセミドライ転写を行うか、PVDFメンブレンを使用してiBlot 2ゲル転写装置(IB21001)を使用して迅速なドライ転写を行うことができます。

研究用にのみ使用できます。診断用には使用いただけません。
仕様
Gel Thickness1.0 mm
長さ(メートル法)8 cm
分離モード分子量
製品ラインNativePAGE
数量10ゲル/箱
推奨アプリケーション天然
サンプル充填量最大25 µL
品質保持期間12カ月
出荷条件湿氷
保存要件2~8℃にて保存してください。冷凍不可。
幅(メートル法)8 cm
使用対象 (装置)Mini Gel Tank, XCell SureLock Mini-Cell
ゲル濃度3 ~ 12%
ゲルサイズミニ
ゲルタイプBis-Tris
分離範囲30~10,000 kDa
分離タイプ天然
ウェル10ウェル
Unit SizeEach

よくあるご質問(FAQ)

What gels can I use to separate native proteins?

The NativePAGE Invitrogen Bis-Tris Gel System is a pre-cast polyacrylamide mini gel system that provides a sensitive and high-resolution method for analyzing native membrane protein complexes, native soluble proteins, molecular mass estimations, and assessing purity of native proteins. It is based on the blue native polyacrylamide gel electrophoresis technique (BN PAGE) developed by Schagger and von Jagow.

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What does it mean when bands appear to be getting narrower (or "funneling") as they progress down a protein gel?

There may be too much beta-mercaptoethanol (BME), sample buffer salts, or dithiothreitol (DTT) in your samples. If the proteins are over-reduced, they can be negatively charged and actually repel each other across the lanes causing the bands to get narrower as they progress down the gel.

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After transferring onto a nitrocellulose membrane, what is the best way to store the membrane overnight for probing the next day?

We recommend rinsing the membrane briefly in water, air drying and store it at room temperature in a ziplock bag. Do not place nitrocellulose in the freezer because it will shatter. Unlike PVDF, nitrocellulose membranes should never be pre-wetted in alcohol as it will cause them to shrivel.

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Are NativePAGE gels and buffers compatible with Mini Gel tank?

Yes, NativePAGE gels are compatible with our Mini Gel tank, however there is a small variation from the original protocol.

The following protocol are for using NativePage gels with the Mini Gel Tank depending on if you are also performing a western transfer or not:
If you are NOT performing a western transfer:
1. Prepare 250 mL of each buffer (Anode and Dark Blue Cathode) per gel
2. After inserting a loaded NativePAGE gel into the Mini Gel Tank and pulling the clamp forward, fill the front cathode buffer chamber to the Fill Line with Dark Blue Cathode Buffer (~200 mL per gel)
3. Add 220 mL of Anode Buffer to the back anode buffer chamber for that gel. Start the gel run

If you are performing a western transfer:
1. Prepare 250 mL of Dark Blue Cathode Buffer, 250 mL of Light Blue Cathode Buffer, and 500 mL of Anode Buffer per gel
2. After inserting a loaded NativePAGE gel into the Mini Gel Tank and pulling the clamp forward, fill the front cathode buffer chamber to the Fill Line with Dark Blue Cathode Buffer (~200 mL per gel
3. Add 220 mL of Anode Buffer to the back anode buffer chamber for that gel
4. Start the gel run; pause the run after the dark blue dye has run ~1/3 of the way through gel
a. Pour out the buffers from the Mini Gel Tank
b. Refill the back anode buffer chamber with 220 mL of Anode Buffer per gel
c. Fill the front cathode buffer chamber to the Fill Line with Light Blue Cathode Buffer (~200 mL per gel)
5. Resume the gel run

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I would like to run a NativePAGE gel. Which of your protein standards should I use?

We recommend using the NativeMark Unstained Protein Standard, Cat. No. LC0725 for native gel electrophoresis with Tris-Glycine, NuPAGE Tris-Acetate or NativePAGE gels.

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引用および参考文献 (1)

引用および参考文献
Abstract
A protein secretion system linked to bacteroidete gliding motility and pathogenesis.
Authors:Sato K, Naito M, Yukitake H, Hirakawa H, Shoji M, McBride MJ, Rhodes RG, Nakayama K,
Journal:Proc Natl Acad Sci U S A
PubMed ID:19966289
'Porphyromonas gingivalis secretes strong proteases called gingipains that are implicated in periodontal pathogenesis. Protein secretion systems common to other Gram-negative bacteria are lacking in P. gingivalis, but several proteins, including PorT, have been linked to gingipain secretion. Comparative genome analysis and genetic experiments revealed 11 additional proteins involved in gingipain ... More