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Citations & References (19)
Invitrogen™
Click-iT™ AHA Alexa Fluor™ 488 Protein Synthesis HCS Assay
Click-iT™ AHA Alexa Fluor™ 488タンパク質の合成HCSアッセイは、蛍光顕微鏡とハイコンテントイメージングを利用して新生タンパク質の合成を検出する、迅速で高感度、無毒性、非放射性の手法を提供します。Click-iT™詳細を見る
| 製品番号（カタログ番号） | 数量 |
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| C10289 | 2 plates |
製品番号（カタログ番号） C10289
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117,600
Each
数量:
2 plates
Click-iT™ AHA Alexa Fluor™ 488タンパク質の合成HCSアッセイは、蛍光顕微鏡とハイコンテントイメージングを利用して新生タンパク質の合成を検出する、迅速で高感度、無毒性、非放射性の手法を提供します。Click-iT™ AHAは、アジド基を含むメチオニンのアミノ酸類似体です。35S-メチオニンと同様に、Click-iT™ AHAは培養細胞に供給され、活性タンパク質の合成中にタンパク質に取り込まれます。取り込まれたアミン酸の検出には、アジドとアルキンの間の化学選択的ライゲーションまたは「クリック」反応を利用します。この反応では、緑色蛍光のAlexa Fluor™ 488アルキンを使用してアジド修飾タンパク質が検出されます。Click-iT™ AHA Alexa Fluor™ 488タンパク質の合成HCSアッセイは、シクロヘキシミド、アニソマイシン、ピューロマイシンなど、タンパク質合成を阻害するさまざまな試薬を用いたA549およびU-2 OS細胞を対象とした試験において、用量反応とMin⁄Max形式のどちらについても成功しています。
研究用にのみ使用できます。診断用には使用いただけません。
仕様
検出法蛍光
染色剤タイプAlexa Fluor™ 488、Hoechst 33258
フォーマット96-ウェルプレート
グリーン機能危険性が低い
数量2 plates
出荷条件室温
色青色、緑色
使用対象（アプリケーション）タンパク質合成HCSアッセイ
使用対象 (装置)蛍光顕微鏡, ハイコンテント装置
製品ラインAlexa Fluor、Click-iT、Molecular Probes
製品タイプHCSアッセイ
Unit SizeEach
組成および保存条件
このキットには（96ウェルプレートフォーマットで2枚のプレートを実行するのに十分な試薬が含まれています。≦-20℃で保存し、乾燥させて遮光してください。
よくあるご質問（FAQ）
Click-iT® AHA (L-azidohomoalanine) kit を用いて生細胞で新生タンパク質を標識し、固定・透過処理後、Click反応により TAMRA alkyneを結合して検出しています。 しかしながら、細胞の核小体も染色されました。 これは期待されることですか？
I am using Click-iT AHA (L-azidohomoalanine) kit to label nascent proteins in live cells, then detecting with TAMRA alkyne after fixation and permeabilization and a click reaction. But I'm seeing nucleolar labeling in the cells. It this expected?
引用および参考文献 (19)
引用および参考文献
Abstract
Selective identification of newly synthesized proteins in mammalian cells using bioorthogonal noncanonical amino acid tagging (BONCAT).
Journal:Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America
PubMed ID:16769897
In both normal and pathological states, cells respond rapidly to environmental cues by synthesizing new proteins. The selective identification of a newly synthesized proteome has been hindered by the basic fact that all proteins, new and old, share the same pool of amino acids and thus are chemically indistinguishable. We
In situ visualization and dynamics of newly synthesized proteins in rat hippocampal neurons.
Journal:Nature neuroscience
PubMed ID:20543841
Protein translation has been implicated in different forms of synaptic plasticity, but direct in situ visualization of new proteins is limited to one or two proteins at a time. Here we describe a metabolic labeling approach based on incorporation of noncanonical amino acids into proteins followed by chemoselective fluorescence tagging
Two-color labeling of temporally defined protein populations in mammalian cells.
Journal:Bioorganic & medicinal chemistry letters
PubMed ID:18774715
The proteome undergoes complex changes in response to disease, drug treatment, and normal cellular signaling processes. Characterization of such changes requires methods for time-resolved protein identification and imaging. Here, we describe the application of two reactive methionine (Met) analogues, azidohomoalanine (Aha) and homopropargylglycine (Hpg), to label two protein populations in
Fluorescence visualization of newly synthesized proteins in mammalian cells.
Journal:Angewandte Chemie (International ed. in English)
PubMed ID:17036290
Noncanonical amino acid tagging enables the selective fluorescent visualization of newly synthesized proteins in mammalian cells (see the picture). Susceptibility to tagging is determined by the spatial and temporal character of the protein synthesis, thus providing a complement to methods which identify relevant members of the proteome.
Spatial coupling of mTOR and autophagy augments secretory phenotypes.
Journal:Science (New York, N.Y.)
PubMed ID:21512002
Protein synthesis and autophagic degradation are regulated in an opposite manner by mammalian target of rapamycin (mTOR), whereas under certain conditions it would be beneficial if they occurred in unison to handle rapid protein turnover. We observed a distinct cellular compartment at the trans side of the Golgi apparatus, the